血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin表達水平與冠心病患者病變程度的關系

黃為俊 李藝樂 李同社

[摘 要] 目的 研究冠心病患者血清趨化因子fractalkine（CX3CL1）、硫氧還蛋白互作蛋白（thioredoxin interacting proteins，TXNIP）和內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑（visceral fat-specific serine protease inhibitors，Vaspin）表達水平與疾病病變程度的關系。方法 選取在我院診治的100例冠心病患者，以同期100例健康人群為對照組，分別檢測兩組患者入院后的血脂水平和血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP，同時分析單獨檢測和聯(lián)合檢測對患者的不同病變程度預測效率。結(jié)果 觀察組患者的總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）、高密度脂蛋白（HDL）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）水平明顯高于對照組，隨著患者的Gensini積分的提升，患者的LDL明顯上升，HDL明顯下降（t=8.21，7.24，P<0.05）;觀察組患者血清CX3CL1、TXNIP水平顯著高于對照組（t=7.89，5.32，P<0.05），Vaspin水平顯著低于對照組（t=8.21，P<0.05），隨著患者的Gensini積分的逐漸升高，患者的Vaspin水平顯著下降，血清CX3CL1、TXNIP顯著上升（P<0.05）;觀察組患者的CX3CL1、TXNIP水平與Gensini積分呈現(xiàn)正相關（r=0.65～0.77，P<0.01），Vaspin水平與Gensini積分呈現(xiàn)負相關（r=-0.78，P<0.01），血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平均為冠心病患者嚴重程度的獨立危險因素;通過ROC曲線分析，隨著Gensini積分的逐漸升高，血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP水平的臨界值依次為1.88μg/L，299.35ng/mL，2144.12ng/mL;1.55μg/L，317.12ng/mL，2254.53ng/mL;0.79μg/L，418.12ng/mL，2335.12ng/mL。結(jié)論 血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP水平在冠心病發(fā)生發(fā)展的不同階段表達水平不同，聯(lián)合檢測以上指標對冠心病患者的不同病變程度預測具有重要意義。

[關鍵詞] 人趨化素;內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑;硫氧還蛋白互作蛋白;冠心病

中圖分類號：R541.4? 文獻標識碼：A? 文章編號：1009-816X（2019）04-0318-05

[Abstract] Objective To study the relationship between the levels of serumCX3 chemokine ligand 1 （CX3CL1）， thioredoxin interacting proteins （TXNIP），visceral fat-specific serine protease inhibitors （Vaspin） and the degree of disease in patients with coronary heart disease. Methods 100 patients with coronary heart disease treated in our hospital were selected， and 100 healthy people were enrolled as control group. The blood lipid levels and serum Vaspin， CX3CL1 and TXNIP were measured. The prediction efficiency of individual and joint testing was analyzed. Results The levels of Total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， low density lipoprotein （LDL）， high density lipoprotein （HDL）， uric acid （UA） and urea nitrogen （BUN） in the observation group were significantly higher than those in the control group （P<0.05）. With the increase of Gensini score， LDL increased and HDL decreased significantly （P<0.05）. The serum levels of CX3CL1 and TXNIP in the observation group were significantly higher than those in control group （P<0.05）. The level of serum Vaspin in observation group was significantly lower than that in control group （P<0.05）. With the gradual increase of Gensini scores， the level of Vaspin in the observation group decreased significantly， while the levels of serum CX3CL1 and TXNIP increased significantly （P<0.05）; CX3CL1 and TXNIP levels in the observation group were positively correlated with Gensini scores， Vaspin levels were negatively correlated with Gensini scores， and serum CX3CL1， TXNIP and Vaspin levels were independent risk factors for the severity of coronary heart disease; ROC curve analysis showed that with the gradual increase of Gensini scores， blood levels were independent risk factors for the severity of coronary heart disease. The critical values of clearing Vaspin， CX3CL1 and TXNIP were 1.88ug/L， 299.35ng/mL， 2144.12ng/mL， 1.55ug/L， 317.12ng/mL， 2254.53ng/mL， 0.79ug/L， 418.12ng/mL and 2335.12ng/mL， respectively. Conclusions The expression levels of serum Vaspin， CX3CL1 and TXNIP are different in different stages of occurrence and development of coronary heart disease .Joint detection of the above indicators is of great significance in predicting different pathological changes in patients with CHD.

[Key words] Human chemokines; Visceral fat-specific serine protease inhibitors; Thioredoxin interacting proteins; Coronary heart disease

冠心病（CHD）是由于冠狀動脈發(fā)生粥樣硬化導致血管管腔狹窄或阻塞，繼而心肌細胞缺血壞死所引起的，其臨床表現(xiàn)主要為胸悶、胸痛、心肌梗死等，嚴重者甚至發(fā)生猝死[1]。人趨化因子fractalkine（CX3CL1）在機體炎癥反應中起到重要作用，有研究報道，人體在冠狀動脈粥樣硬化過程中，隨著粥樣硬化的嚴重程度增加，患者CX3CL1水平大量表達[2，3]。硫氧還蛋白互作蛋白（TXNIP）是患者冠心病發(fā)生發(fā)展重要的防御系統(tǒng)之一，廣泛參與冠心病的進展。內(nèi)臟脂肪組織特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑（Vaspin）具有抵抗內(nèi)皮細胞凋亡的作用[4]，通過增加內(nèi)皮細胞一氧化氮（NO）的利用度，增加內(nèi)皮細胞的抗炎作用，進而達到保護血管的作用，與冠心病呈現(xiàn)負相關[5]。本研究將通過冠心病患者血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin表達水平與疾病病變程度的關系研究，為臨床診斷和治療提供科學依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料：研究對象為2016年6月至2017年6月在我院診治的100例首次因胸痛、胸悶就診的CHD患者為觀察組。納入標準：（1）所有患者均符合CHD診斷標準[6];（2）所有患者簽署知情同意書。排除標準：（1）急性心功能不全、先天性心臟病、原發(fā)性心肌病等非冠狀動脈狹窄所致的心臟病;（2）腦血管病;（3）肝腎功能障礙;（4）自身免疫性疾病;（5）急性感染、慢性感染急性發(fā)作;（6）Ⅱ型糖尿病;（7）活動性肺結(jié)核或惡性腫瘤患者;（8）已發(fā)生心力衰竭者;（9）年齡不足18周歲者;（10）嚴重精神疾病患者。以同期100例健康人群為對照組。觀察組患者男62例，女38例，年齡51～84歲，平均（66.57±5.04）歲。根據(jù)患者的冠狀動脈狹窄情況，依據(jù)Gensini積分，Gensini積分在30分以下患者39例;Gensini積分在30～60分患者33例，Gensini積分在60分以上患者28例。對照組患者男60例，女40例;年齡51～84歲，平均（66.25±5.11）歲。兩組患者性別、年齡之間的差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。本研究經(jīng)本院倫理委員會批準，所有患者或其家屬均對此次研究知情且簽署知情同意書。

1.2 方法：入院第2天清晨空腹抽取外周靜脈血5mL，3000r/min離心10min取上清液，-80℃儲存。采用RLMax型全自動生化分析儀（德國西門子公司）測定受試者的血清總膽固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）、尿酸（UA）、尿素氮（BUN）水平。采用酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測定血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平，儀器為NDM-9602G型全自動酶標分析儀（北京普朗新技術有限公司），所用試劑為美國R&D公司產(chǎn)品。所有試劑均在有效期內(nèi)使用，嚴格按照儀器說明書的實驗步驟進行所有操作。

1.2.1 冠狀動脈造影檢查：對所有患者進行冠狀動脈造影檢查，采用Gensini積分系統(tǒng)對兩組患者進行疾病危險因素分析。Gensini積分[7]：患者冠狀動脈狹窄情況在25%以內(nèi)，則為1分;患者冠狀動脈狹窄在26%～50%之間則為2分，患者冠狀動脈狹窄在51%～75%之間為4分，患者冠狀動脈狹窄在76%～90%之間則為8分，患者冠狀動動脈狹窄在91%～99%之間則為16分，患者冠狀動脈狹窄為100%為32分。依據(jù)患者的病變部位，乘以其相應系數(shù)。其中，病變部位為左主干，其系數(shù)為5;病變部位為左前降支或回旋支，其系數(shù)為2.5;病變部位為左前降支中段，其系數(shù)為1.5;病變部位為左前降支遠端、左回旋支中遠端、右冠狀動脈，其系數(shù)為1;病變部位為小分支，其系數(shù)為0.5。

1.2.2 觀察指標：（1）兩組及不同Gensini積分患者的TC、TG、LDL、HDL、UA、BUN情況。（2）兩組及不同Gensini積分患者的CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平情況。（3）單獨檢測和聯(lián)合檢測對不同Gensini積分患者的診斷效能對比。其中血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP水平的臨界值依次為1.88μg/L，299.35ng/mL，2144.12ng/mL;1.55μg/L，317.12ng/mL，2254.53ng/mL;0.79μg/L，418.12ng/mL，2335.12ng/mL。

1.3 統(tǒng)計學處理：采用SPSS20.0版軟件對數(shù)據(jù)進行分析。其中計量資料以（x -±s）表示，三組間比較采用方差分析，多組間的兩兩比較采用LSD-t檢驗;計數(shù)資料以例（%）表示，組間比較采用χ2檢驗;血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平與Gensini積分的相關性分析采用Pearson直線相關分析;Gensini積分的危險因素采用二元Logistic回歸分析;CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平的診斷價值通過繪制ROC曲線進行判斷，采用Hanley-McNeil方法比較ROC曲線下面積。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血脂和血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平比較：觀察組患者的TC、TG、LDL、HDL、UA、BUN水平明顯高于對照組;觀察組患者血清CX3CL1、TXNIP水平顯著高于對照組（P<0.05），觀察組患者的血清Vaspin水平顯著低于對照組（P<0.05），見表1。

2.2 觀察組不同Gensini積分患者血脂和血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平對比：對不同Gensini積分患者的TC、TG、LDL、HDL、UA、BUN對比，結(jié)果顯示隨著患者的Gensini積分的提升，患者的LDL明顯上升，HDL明顯下降，其余指標未見明顯差異。通過對不同Gensini積分患者的血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平對比，發(fā)現(xiàn)隨著患者的Gensini積分的逐漸升高，患者的Vaspin水平顯著下降，血清CX3CL1、TXNIP顯著上升，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），見表2。

2.3 血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平與Gensini積分的相關性分析：觀察組患者的CX3CL1、TXNIP水平與Gensini積分呈正相關（r=0.65、0.77，P<0.05），Vaspin水平與Gensini積分呈現(xiàn)負相關（r=-0.78，P<0.05）。

2.4 Gensini積分的危險因素多因素分析：通過對不同Gensini積分的多因素回歸分析，以Gensini積分為因變量，血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平作為自變量。結(jié)果顯示血清CX3CL1、TXNIP和Vaspin水平均為冠心病患者嚴重程度的獨立危險因素，見表3。

2.5 單獨檢測和聯(lián)合檢測對不同Gensini積分患者的診斷效能比較：通過對不同Gensini積分患者的診斷效能對比觀察，聯(lián)合檢測的ROC曲線下面積及檢測靈敏度均高于單獨檢測，見表4。

3 討論

根據(jù)流行病學研究顯示，到2020年CHD將持續(xù)成為全球死亡的首位原因[8]。目前對于CHD疾病的治療研究已經(jīng)從藥物治療逐漸到介入手術等多層次、多學科的研究，但是，就目前的研究而言，CHD疾病帶給患者除了巨大的生理性痛苦外，患者的經(jīng)濟壓力與日俱增[9]。所以，在研究治療CHD的有效方法的同時，還應從診斷切入，做到預防為主的同時，早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早干預、早治療。

目前臨床醫(yī)學認為，脂質(zhì)代謝是冠狀動脈粥樣硬化最為重要的病理環(huán)節(jié)之一[10]，同時，隨著冠狀動脈粥樣硬化狀態(tài)的不斷惡化，脂質(zhì)代謝異常也是冠狀動脈斑塊形成的重要因素之一[11]。TC和TG對于冠狀動脈的血管壁硬化和衰老具有顯著作用，最終導致患者血管彈性降低，患者血管炎性反應劇烈，最終導致患者斑塊形成，嚴重影響患者的生命安全[12]。在疾病的進展過程中，血清Vaspin作為機體的保護性因子[13]，在內(nèi)皮細胞的修復過程中，能夠誘導NO的生物合成，改善血管壁的炎癥狀態(tài)及保護內(nèi)皮細胞的作用，所以在臨床工作中血清Vaspin水平可作為患者血管內(nèi)皮損傷的重要依據(jù)[14]。本研究中，隨著患者Gensini積分明顯上升，患者的血清Vaspin水平明顯下降，提示由于患者局部血管的炎性反應造成的內(nèi)皮損傷超出了患者的自我修復能力，對于疾病的嚴重程度的診斷具有積極的意義。袁海等[15]在氫氯噻嗪并纈沙坦對高血壓患者的治療中，隨著患者血壓的控制，血清Vaspin水平明顯上升，患者冠狀動脈狹窄情況得到明顯改善，其冠狀動脈狹窄情況與血清Vaspin水平呈現(xiàn)負相關，與本研究相互印證。

在冠心病患者的診斷治療中，冠狀動脈斑塊的形成以及發(fā)展與患者的預后以及疾病分型密切相關。而血清CX3CL1、TXNIP表達水平與患者的冠狀動脈的炎癥反應有關。CX3CL1是趨化因子CX3C中的重要成員，在血管平滑肌細胞中高度表達，隨著患者的組織因子抗原表達，參與患者凝血酶的形成，進而促進患者冠狀動脈血栓形成。同時，還參與患者血栓形成后的炎性反應，導致患者冠狀動脈的不穩(wěn)定性，最終形成惡性循環(huán)。TXNIP通過介導患者的應急氧化反應，導致患者的胰島素抵抗以及炎癥反應，激活患者炎性因子，最終導致黏附因子表達。隨著炎癥反應的不斷加劇，患者冠狀動脈斑塊也隨之發(fā)生變化，最終導使冠狀動脈狹窄甚至堵塞。有研究報道顯示，患者的冠狀動脈斑塊的積聚以及管腔狹窄與炎癥反應密切相關。以往研究顯示，血清CX3CL1、TXNIP表達水平與患者的疾病進展呈現(xiàn)正相關[11，16]。本研究中，不同型別的冠心病患者，隨著病情的加重，其血清CX3CL1、TXNIP水平呈現(xiàn)上升趨勢是冠心病患者獨立危險因素，與文獻報道一致[17]。

本文通過對三種血清因子的單獨檢測和聯(lián)合檢測ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測血清Vaspin、CXCL13、TXNIP對于CHD患者不同病變程度的判定檢測效率較高，推斷認為，三種血清因子對于冠心病的發(fā)生發(fā)展在不同的階段進行作用，血清Vaspin主要對患者的炎性反應和內(nèi)皮損傷情況進行評估，血清CXCL13主要對患者斑塊形成的不穩(wěn)定因素進行作用，而TXNIP則是在對患者的冠心病最起初的病因進行刺激作用，通過對不同階段患者的全面預后分析，其效率較高。

綜上所述，血清Vaspin、CX3CL1、TXNIP表達水平對冠心病發(fā)生發(fā)展的不同階段進行作用，聯(lián)合檢測以上指標，對CHD患者的不同病變程度預測具有重要意義，值得在臨床工作中進行推廣。

參考文獻

[1]Khamis RY， Ammari T， Mikhail GW. Gender differences in coronary heart disease[J]. Heart，2016，102（14）：1142-1149.

[2]陳慧敏，許逸飛.曲美他嗪聯(lián)合阿托伐他汀鈣治療冠心病心絞痛伴血脂異常的臨床研究[J].中國臨床藥理學雜志，2016，32（11）：966-968.

[3]陳航，盧聰，閆亞非.他汀類藥物在冠心病治療中的多效性[J].現(xiàn)代臨床醫(yī)學，2013，39（5）：386-389.

[4]陳偉光，王柏春，官瑩，等.G1254023X對白細胞介素6受體、趨化因子CX3CL1的抑制作用及其對冠心病的影響[J].國際免疫學雜志，2017，40（4）：396-400.

[5]楊阿應，白亞娜，解芝洞，等.2001-2013年金昌隊列人群冠心病死亡趨勢及疾病負擔研究[J].中華疾病控制雜志，2017，21（3）：261-264.

[6]韓雅玲.冠心病抗栓診治中國臨床循證及指南共識[J].中華醫(yī)學信息導報，2016，31（20）：16.

[7]Anil A， Serdar F， Mustafa TM， et al. Association between the Gensini score and carotid artery stenosis[J]. Korean Circ J，2016，46（5）：639-645.

[8]王階，李軍，毛靜遠，等.冠心病心絞痛主要證型的辨證診斷標準[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2018，38（2）：154-155.

[9]李永姝，張寶歡，賈克剛，等.CX3CL1和CX3CR1與動脈粥樣硬化性心臟病損傷機制的研究現(xiàn)狀[J].檢驗醫(yī)學，2016，31（11）：1002-1010.

[10]童方念，張效林，程茗慧，等.趨化因子CX3C受體1基因rs3732378多態(tài)性與急性冠狀動脈綜合征的相關性[J].中國動脈硬化雜志，2017，39（2）：173-178.

[11]張效林，梁振洋，孫瑩，等.趨化因子CX3CL1與冠心病合并2型糖尿病發(fā)病的相關關系[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2017，17（4）：645-648.

[12]楊明琦，劉妍妍.血清Vaspin、ATGL水平與老年患者冠心病危險因素及嚴重程度的相關性[J].現(xiàn)代醫(yī)學，2018（4）.402-406.

[13]Chen X， Deng Q， Na AN， et al. Value of serum Fractalkine and Vaspin contents for the diagnosis of coronary heart disease and the correlation with cardiac function and myocardial injury[J]. Journal of Hainan Medical University，2017，23（19）：15-18.

[14]張汝鋒，婁國忠.不同類型冠心病患者的血清Vaspin、ATGL水平及基因表達量研究[J].中華全科醫(yī)學，2017，10（1）：45-47.

[15]袁海.氫氯噻嗪并纈沙坦對高血壓患者療效、心功能及血清RBP4、Vaspin水平的影響[J].心血管康復醫(yī)學雜志，2017，26（5）：503-507.

[16]盛蕾，祝聰聰，羅松輝，等.血清硫氧還蛋白結(jié)合蛋白在冠心病中臨床意義[J].中西醫(yī)結(jié)合心腦血管病雜志，2016，14（17）：2046-2048.

[17]張效林，梁振洋，孫瑩，等.血清CX3CL1水平對冠心病的臨床意義探討[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學進展，2017，7（3）：27-30.