藥用植物中具有抗真菌活性的內(nèi)生真菌及其次級(jí)代謝產(chǎn)物的研究

武艷霜,陸 悅,朱作斌,陳 瑩,李 穎*

(1徐州醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院， 徐州221004；2徐州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院遺傳學(xué)教研室， 徐州221004)

近年來(lái)，隨著廣譜抗生素的大量使用，以及器官移植、放化療、血液透析等治療方法的廣泛應(yīng)用，全球艾滋病人數(shù)量的增加，使得臨床免疫缺陷患者的數(shù)量急劇增加，真菌感染的發(fā)病率和死亡率逐漸上升，真菌感染已成為臨床重要的感染病癥之一[1]。在眾多的致病真菌中，念珠菌屬(Candidaspecies)是最常引起臨床真菌感染的病原菌，其中白色念珠菌(C. albicans)占比最高[2]。目前雖有大量的抗真菌藥物用于臨床真菌感染的治療，但隨著藥物劑量的提高以及作用時(shí)間的延長(zhǎng)，真菌耐藥性會(huì)迅速出現(xiàn)并逐漸蔓延。耐藥性的出現(xiàn)增加了真菌感染的治療難度和治療費(fèi)用，同時(shí)，抗真菌藥物本身的毒副作用也限制了其臨床應(yīng)用，因此亟需尋找并開(kāi)發(fā)高效低毒且不易耐藥的新型的抗真菌藥物[3]。

天然產(chǎn)物是新藥研發(fā)的重要資源。據(jù)統(tǒng)計(jì)，自1981年至2012年間，美國(guó)FDA批準(zhǔn)的新藥中，超過(guò)一半以上的抗感染藥物(69%)和抗腫瘤藥物(75%)都與天然產(chǎn)物有關(guān)。

植物內(nèi)生菌(endophyte)是指存活于健康植物組織中，卻不會(huì)使宿主植物表現(xiàn)出明顯感染癥狀的微生物[4-5]，它是植物微生態(tài)系統(tǒng)的重要組成部分。內(nèi)生菌與宿主植物之間長(zhǎng)期協(xié)同進(jìn)化，兩者間呈互利共生關(guān)系[6]：植物把光合作用產(chǎn)物、水和礦物質(zhì)提供給內(nèi)生菌，并給予內(nèi)生菌以保護(hù)；同時(shí)內(nèi)生菌代謝產(chǎn)物能刺激植物生長(zhǎng)發(fā)育，參與植物活性成分和次生代謝產(chǎn)物的合成，使宿主對(duì)外界環(huán)境的脅迫有很強(qiáng)的抗逆性，因此植物內(nèi)生菌中更易產(chǎn)生具有生物活性的次級(jí)代謝產(chǎn)物。

天然產(chǎn)物雖然是新藥研發(fā)的重要資源，但由于其化學(xué)結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性或特殊性，往往不能通過(guò)化學(xué)方法直接合成，需要通過(guò)提取分離方法獲取，因此，尤其對(duì)于植物來(lái)源的活性天然產(chǎn)物，存在資源短缺的問(wèn)題。對(duì)植物內(nèi)生真菌的研究是解決植物資源緊缺問(wèn)題的重要手段。紫杉醇是一種重要的抗腫瘤藥物，廣泛應(yīng)用于臨床癌癥的治療。紫杉醇化學(xué)結(jié)構(gòu)特殊，不易人工合成，主要依靠從紅豆杉樹(shù)皮中直接提取分離。隨著對(duì)植物內(nèi)生菌研究的深入，人們從紅豆杉、紫杉、水松、榛樹(shù)等植物中分離得到了多株能夠代謝產(chǎn)生紫杉醇的內(nèi)生真菌，為紫杉醇的制備提供了一個(gè)新的資源[7-9]。

中藥是中華民族的瑰寶，人們可利用植物、動(dòng)物、礦物等來(lái)治療各種疾病，其中，藥物植物是重要的組成部分。近代研究發(fā)現(xiàn)，藥物植物之所以能夠治療疾病，與其中含有的活性成分密不可分。人們?cè)谒幱弥参镏邪l(fā)現(xiàn)了大量的具有抗真菌活性的天然產(chǎn)物，而這些藥物植物的內(nèi)生真菌同樣能夠代謝出多種具有抗真菌活性的天然產(chǎn)物。本文對(duì)目前已發(fā)現(xiàn)的幾種藥用植物內(nèi)生真菌次級(jí)代謝產(chǎn)物的抗真菌活性的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，為從藥用植物內(nèi)生真菌中尋找先導(dǎo)化合物，開(kāi)發(fā)新型抗真菌藥物提供參考。

1 黃芩

圖1 黃芩苷分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)

黃芩(Scutellaria baicalensisGeorgi)，別名山茶根、土金茶根，是唇形科黃芩屬多年生草本植物。具有清熱燥熱、瀉火解毒、止血、安胎等功效。研究表明, 黃芩的活性成分黃芩苷(圖1)在抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗感染、抗氧化和治療心血管疾病等方面具有一定的作用，并具有較好的抗真菌活性[10]。李青連等[11]從野生黃芩的組織中分離出97株內(nèi)生真菌，其中 33 株來(lái)自生長(zhǎng)期植株, 64 株來(lái)自成熟期植株，并將其中95株內(nèi)生真菌對(duì)白色念珠菌等14種指示菌進(jìn)行抗菌活性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：其中91 株內(nèi)生真菌對(duì)一種或多種指示菌具有抑菌活性, 占分離菌株總數(shù)的 95.8%，說(shuō)明其有廣泛的抗菌活性。從成熟期黃芩中分離到的 62 株內(nèi)生真菌菌株對(duì)白色念珠菌有較高的拮抗作用，有拮抗活性的菌株為14株，占總數(shù)的22.58%。從成熟期黃芩中分離得到菌株的部位看：葉子中分離出來(lái)的內(nèi)生真菌菌株對(duì)白色念珠菌沒(méi)有拮抗活性；從莖中分離出來(lái)的內(nèi)生真菌菌株有兩株有抗念珠菌活性，為Arbuscula屬，抑菌圈直徑分別是d ≤ 10 mm、10 mm ＜ d ＜ 15 mm，抑菌效果較好；從根中分離出來(lái)的內(nèi)生真菌菌株有四株有抗念珠菌活性，為Mucor、Alternaria、Trichosporiella、Minimedusa屬，前三個(gè)抑菌圈直徑均是10 mm ＜ d ＜ 15 mm，最后一個(gè)抑菌圈直徑是d ≤ 10 mm，抑菌效果較好。總的來(lái)說(shuō)，從成熟期黃芩根中分離得到的內(nèi)生真菌菌株有抗白色念珠菌活性的較多，抗菌活性較好，因此，我們可以重點(diǎn)對(duì)這些菌株中的抗菌活性成分進(jìn)行研究，以擴(kuò)大藥用資源。

張黎光等[12]采用常規(guī)微生物分離純化方法從表面消毒的黃芩各個(gè)組織中分離出17株內(nèi)生真菌。利用薄層層析分析法和高效液相色譜法從分離出的17株內(nèi)生真菌中篩選能產(chǎn)生黃芩苷的內(nèi)生真菌菌株。結(jié)果表明：J1及H3兩株內(nèi)生真菌可以在人工培養(yǎng)基中產(chǎn)生與宿主相同或相似的活性成分黃芩苷。采用形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方法對(duì)產(chǎn)黃芩苷菌株進(jìn)行鑒定，可以確定產(chǎn)黃芩苷的內(nèi)生真菌J1及H3均屬于青霉菌屬。

熊英等[13]研究發(fā)現(xiàn)黃芩苷對(duì)白色念珠菌有較好的抗菌活性，其最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度( MFC) 均為1. 0～2. 0 μg/mL。同位素前體摻入試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，黃芩苷對(duì)[3H]-TdR，[3H]-UdR 和[3H]-亮氨酸參入白色念珠菌過(guò)程有抑制作用，推測(cè)黃芩苷的抑菌作用是通過(guò)抑制白色念珠菌的DNA、蛋白質(zhì)生物合成完成的。

張美玲等[14]研究了黃芩中能有效抗白色念珠菌的活性成分，她們從黃芩中提取了黃芩苷、黃芩苷元，并將黃芩苷與NaOH反應(yīng)生成黃芩苷鹽。研究將這3種物質(zhì)對(duì)臨床深部真菌感染分離的3株白色念珠菌進(jìn)行抗菌活性研究，觀察其抑菌圈直徑大小。結(jié)果表明：黃芩苷無(wú)抗白色念珠菌活性，黃芩苷鹽有一定的抗白色念珠菌活性，而黃芩苷元的抗白色念株菌活性最好。黃芩苷鹽藥粉、黃芩苷元、黃芩苷對(duì) 3 株白色念珠菌抑菌環(huán)直徑分別為( 18.7 ± 2.9) mm、( 12.8 ± 1.5) mm、0 mm。張美玲等[15]又進(jìn)一步從甘肅黃芩中提取黃芩苷，并利用強(qiáng)酸對(duì)黃芩苷加熱水解，獲取有效活性成分黃芩苷元，制成黃芩苷元制劑。并對(duì)臨床收集分離的假絲酵母菌進(jìn)行抑菌活性研究，測(cè)定黃芩苷元制劑的MIC。結(jié)果表明：黃芩苷元制劑對(duì)白色念珠菌有最強(qiáng)的抑菌活性，藥物用量為0.50 ～ 0.55 mL，MIC為0.956 μg/mL，其中標(biāo)準(zhǔn)菌株MIC為0.956 μg/mL。可見(jiàn)，黃芩苷的活性成分黃芩苷元抗念珠菌活性極強(qiáng)。而黃芩中分離出來(lái)的內(nèi)生真菌能產(chǎn)生黃芩苷，黃芩苷中能獲取黃芩苷元，所以對(duì)黃芩內(nèi)生真菌的有效利用能擴(kuò)大藥用資源，為我們提供更多的藥物來(lái)源。研究發(fā)現(xiàn)[16-17]一定濃度的黃芩苷對(duì)白色念珠菌芽管的形成及粘附性有較強(qiáng)的抑制作用。100 μg/mL 的黃芩苷對(duì)芽管抑制作用與兩性霉素 B 的作用相當(dāng)，而單味藥黃芩對(duì)體外白色念珠菌的生物膜也具有明顯的抑制作用。

周智興等[18-19]運(yùn)用分光光度法檢測(cè)黃芩苷對(duì)白色念珠菌中琥珀酸脫氫酶 (SDH)、細(xì)胞色素C氧化酶 (CCO)、Ca2+-Mg2+-ATPase3種酶活性的影響，并研究了黃芩苷對(duì)白色念珠菌細(xì)胞周期的影響。研究表明：黃芩苷抗白色念珠菌作用明顯，并可降低白色念珠菌SDH酶 、白色念珠菌 Ca2+-Mg2+-ATPase的活力。生化實(shí)驗(yàn)表明，黃芩苷能使白色念珠菌線粒體SDH酶的活力降低，黃芩苷濃度越高, SDH酶活力越低。

Wu等[20]研究表明，SDH活性發(fā)生變化時(shí)線粒體的損傷也同時(shí)出現(xiàn)，并與線粒體的升降數(shù)目一致, 直接影響氧化磷酸化過(guò)程。他們推測(cè)：黃芩苷可能通過(guò)降低SDH酶的活力來(lái)?yè)p傷白色念珠菌線粒體, 從而達(dá)到抑制白色念珠菌生長(zhǎng)的作用。而且黃芩苷可使白色念珠菌處于S /G2 /M 細(xì)胞周期的細(xì)胞數(shù)目下降，提示其生長(zhǎng)受到了抑制，從而抑制白色念珠菌增殖，進(jìn)一步體現(xiàn)抗白色念珠菌活性。

馮鑫等[21]研究了黃芩苷對(duì)白色念珠菌凋亡的影響，結(jié)果表明：黃芩苷可以通過(guò)降低細(xì)胞線粒體膜電位MMP和促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)的累積即線粒體途徑而誘導(dǎo)白念珠菌凋亡。

吳秀珍等[22]探討黃芩苷對(duì)白色念珠菌超微結(jié)構(gòu)的影響，電鏡下發(fā)現(xiàn)：黃芩苷作用白色念珠菌后細(xì)胞壁和細(xì)胞膜先發(fā)生變化, 接著出現(xiàn)細(xì)胞器和細(xì)胞核的損傷，直至細(xì)胞出現(xiàn)壞死崩裂性變化。由此推測(cè)黃芩苷是通過(guò)破壞真菌細(xì)胞壁發(fā)揮抗白色念珠菌活性。

2 黃連

黃連(Coptis chinensisFranch.)，又名味連、川連、雞爪連，屬毛茛科、黃連屬多年生草本植物。有清熱燥濕，瀉火解毒之功效。小檗堿，又名黃連素，是從黃連等中草藥中提取分離到的一種異喹啉類生物堿物質(zhì)[23]。其作為療效確切的廣譜抗菌藥物，對(duì)多種細(xì)菌、真菌、霉菌、病毒等有抑制和殺滅作用[24]。并且有研究表明，其有較好的抗白色念珠菌的功效[25]。厲秀秀[26]從黃連中分離出10株內(nèi)生真菌，并測(cè)得其中4株可以產(chǎn)生小檗堿(圖2)，他們分別是：內(nèi)生真菌 HL-A，BC，C，D，產(chǎn)量分別為 1.83、0.63 、1.19 、1.28μg/mL。通過(guò)形態(tài)學(xué)以及分子生物學(xué)方法將 HL-A，BC，D 確定為擬星衣屬(Arthopyreniaceae)，擬莖點(diǎn)霉屬(Phomopsis)和擬隱孢殼屬(Cryptosporiopsis)，而HL-C尚不能確定。

向建輝[27]從黃連中分離出15株內(nèi)生真菌，并采用色譜法對(duì)菌株 HL-Y-3 的菌絲進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)其能產(chǎn)生小檗堿，同時(shí)利用核磁共振分析和質(zhì)譜分析驗(yàn)證菌絲中的小檗堿與鹽酸小檗堿對(duì)照品的結(jié)構(gòu)一致，其含量9.313 μg/g(小檗堿/菌絲干重)。

張峰華等[28]對(duì)產(chǎn)小檗堿的黃連內(nèi)生真菌HL-Y-3菌株做了深入的研究，發(fā)現(xiàn)HL-BC菌株比HL-Y-3菌株產(chǎn)小檗堿產(chǎn)率低，產(chǎn)量分別為0. 664μg/mL、9.313μg/g。因此可以重點(diǎn)培養(yǎng)和研究HL-Y-3菌株，以擴(kuò)大小檗堿來(lái)源，最終擴(kuò)大抗白色念珠菌制劑的來(lái)源。

圖2 小檗堿分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)

Freile 等[29]的研究發(fā)現(xiàn)，小檗堿在體外對(duì)多種分離于人體的白色念珠菌有較好的抑制作用。姜遠(yuǎn)英等[30]研究表明小檗堿與氟康唑在體外聯(lián)用有很好的協(xié)同抗氟康唑耐藥的白念珠菌作用。孔德道等[31]研究表明小檗堿與克霉唑在體外聯(lián)用有很好的協(xié)同抗氟康唑耐藥的白念珠菌作用。傅子晉[32]的研究表明，小檗堿與咪康唑體外聯(lián)用能夠協(xié)同對(duì)抗耐藥白色念珠菌。并推測(cè)二者聯(lián)合作用時(shí)，小檗堿通過(guò)增加真菌細(xì)胞不可逆轉(zhuǎn)的慢性損傷，從而體現(xiàn)其持久穩(wěn)定的對(duì)真菌細(xì)胞的殺傷作用。

Xu等[33]認(rèn)為小檗堿協(xié)同氟康唑?qū)鼓退幇咨钪榫臋C(jī)制是升高白色念珠菌胞內(nèi)的活性氧以及加強(qiáng)了線粒體有氧呼吸作用，從而抑制白色念珠菌，達(dá)到更好的抗菌效果。吳玲等[34]研究表明耐唑類藥物白色念珠菌能過(guò)度表達(dá)耐藥基因 CDR1，CDR1 通過(guò)轉(zhuǎn)錄因子 Tac1p 結(jié)合到啟動(dòng)子的順式藥物反應(yīng)元件(DRE)上進(jìn)行性轉(zhuǎn)錄激活而使白色念珠菌耐藥。小檗堿協(xié)同氟康唑抗耐藥白色念珠菌的機(jī)制是，二者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，小檗堿能夠抑制Cdr1p的運(yùn)輸功能和CDR1mRNA上調(diào)，干擾蛋白-DRE 轉(zhuǎn)錄激活復(fù)合物，并結(jié)合到 CDR1 的 DRE 上。從而阻止耐唑類藥物白色念珠菌過(guò)度表達(dá)基因CDR1而耐藥。梁蓉梅等[35]研究小檗堿作用于白色念珠菌的靶位是劑量依賴性非競(jìng)爭(zhēng)抑制24-甲基轉(zhuǎn)移酶(24-M ST)，小檗堿對(duì)此酶的抑制作用顯著，在真菌合成麥角甾醇的過(guò)程中，小檗堿阻止了真菌對(duì)合成麥角甾醇的必需物質(zhì)L-甲基-蛋氨酸的利用，最終導(dǎo)致24-二烯-3β醇、麥角甾烷-8的堆積和麥角甾醇的缺乏，從而抑制白色念珠菌增殖。

3 銀杏

銀杏(Ginkgo bilobaL.)，為銀杏科、銀杏屬落葉喬木，具有活化石之稱。具有抑菌殺菌、清熱解毒等功效，是珍貴的藥用資源。其組織內(nèi)含有豐富的內(nèi)生菌，研究人員從中分離出500余株內(nèi)生真菌，郭建新等[36]采用菌絲生長(zhǎng)抑制法測(cè)定了分離出來(lái)的內(nèi)生真菌對(duì)7種植物病原真菌的抑制作用。結(jié)果表明302株具有抗菌活性，所占比例較高。因此，銀杏內(nèi)生真菌是一個(gè)潛在而又豐富的抗菌新藥資源庫(kù)。

于洪升等[37]采用微量稀釋法測(cè)試銀杏內(nèi)生真菌粗提物抗病原真菌活性，結(jié)果發(fā)現(xiàn)共計(jì)5株內(nèi)生真菌粗提物的抗白色念珠菌活性較為顯著，分別為：T-1, T-16,T-33, T-35,T-1-2-1, T-3-8-1，主要屬于擬莖點(diǎn)霉屬，毛殼屬，曲霉屬及青霉屬內(nèi)生真菌。而青霉屬的T-1-2-1內(nèi)生真菌抗白色念珠菌活性最為顯著，MIC80為8 μg/mL。李虎強(qiáng)等[38]從浙江天目山分離出56株銀杏內(nèi)生真菌，發(fā)現(xiàn)其中有9株內(nèi)生真菌的粗提物有較好的抗白色念珠菌活性，他們同樣發(fā)現(xiàn)編號(hào)為T(mén)-1-2-1青霉屬的內(nèi)生真菌粗提物抗菌效果最好。因此，我們可以重點(diǎn)對(duì)T-1-2-1菌株的內(nèi)生真菌粗提物成分進(jìn)行研究，以期待能夠找到有效的抗白色念珠菌的天然產(chǎn)物。

李涵等[39]對(duì)銀杏內(nèi)生真菌進(jìn)行抗菌活性篩選，發(fā)現(xiàn)其內(nèi)生真菌菌株L43的抗菌譜最廣，對(duì)白色酵母菌有較強(qiáng)的抗菌效果，最小抑菌濃度 ≤ 12.5%，其發(fā)酵液萃取組分的抗白假絲酵母菌活性檢測(cè)結(jié)果是無(wú)水乙醇、乙酸乙酯及二氯甲烷萃取粗提取具有抗菌活性，其 MIC 分別為1mg/mL、1mg/mL及0.25mg/mL。其中二氯甲烷組分的抗菌活性最高。因此，重點(diǎn)對(duì)二氯甲烷萃取粗提物組分進(jìn)行研究，有利于發(fā)現(xiàn)抗白色念珠菌的天然產(chǎn)物，擴(kuò)大藥用資源。

4 虎杖

虎杖(Reynoutria japonicaHoutt.)，具有利濕退黃，清熱解毒，散瘀止痛，止咳化痰的功效。用于濕熱黃疸，淋濁，帶下，風(fēng)濕痹痛等。曾松榮等[40]從虎杖中分離出3株具有抑制白色念珠菌作用的內(nèi)生真菌，它們分別屬于無(wú)孢菌類、青霉屬和曲霉屬。這3株內(nèi)生真菌的抗白色念珠菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果：抑菌圈直徑大小分別為9、12、19 mm，其中曲霉屬的內(nèi)生真菌抑菌效果最好。張渝華等[41]在虎杖根中提取出白藜蘆醇(圖3)，并測(cè)得其對(duì)白色念珠菌有一定的抑菌作用。劉蕓等[42]從虎杖中分離得到的15株內(nèi)生真菌中有5株能產(chǎn)生白藜蘆醇，產(chǎn)量最高菌株可產(chǎn)生1.528 μg/mL的白藜蘆醇。董倩[43]從虎杖中篩選出12株能產(chǎn)白藜蘆醇的內(nèi)生真菌，最高產(chǎn)量可達(dá)1.440 mg/mL。彭浩[44]從虎杖中提取了116株內(nèi)生真菌，發(fā)現(xiàn)其中有兩株內(nèi)生真菌產(chǎn)白藜蘆醇(苷)，其中一株白藜蘆醇的產(chǎn)量為4.812 mg/mL。這說(shuō)明虎杖內(nèi)生真菌可以產(chǎn)生與虎杖活性成分相同生物活性物質(zhì)。 張瑞[45]研究出白藜蘆醇能抑制白色酵母菌可能是通過(guò)改變真菌細(xì)胞自身作用和與生物膜黏附的表面之間的疏水性、化學(xué)鍵等，來(lái)改變二者配體和受體的特異性結(jié)合，最終導(dǎo)致真菌生物膜細(xì)胞的脫落；或是白藜蘆醇直接作用于白色酵母菌生物膜分泌的甘露糖蛋白，改變細(xì)胞的疏水性，使細(xì)胞之間不能粘附；或是藥物滲入生物膜后吸附于白色酵母菌細(xì)胞壁上，干擾其合成，使細(xì)胞壁破損并進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部，抑制細(xì)胞的生長(zhǎng)繁殖，導(dǎo)致真菌死亡。

圖3 白藜蘆醇分子的化學(xué)結(jié)構(gòu)

5 雷公藤

雷公藤(Tripterygium wilfordiiHook. f.)為衛(wèi)矛科雷公藤屬，又名黃藤、斷腸草，有清熱解毒、消腫止痛、祛風(fēng)除濕等功效。內(nèi)生真菌在雷公藤中普遍存在，宋萍等[46]利用組織塊法對(duì)雷公藤植物內(nèi)生真菌進(jìn)行了分離，獲得了22株形態(tài)型不同的內(nèi)生真菌。他們發(fā)現(xiàn)雷公藤內(nèi)生真菌的菌絲體和發(fā)酵液的提取物有較好的抗白色念珠菌活性。其中菌株1#、3#、6#、7#、13#、14#、17#、18#、21#、23#、24#的菌絲體提取物有抗白色念珠菌活性。菌株1#、5#、6#、7#、8#、13#、15#、16#、17#、18#、19#、20#、21#、24#的發(fā)酵液提取物有抗白色念珠菌活性?？偟膩?lái)說(shuō)，雷公藤內(nèi)生真菌普遍有抗白色念珠菌活性。

Li等[47]從雷公藤中篩選獲得了一株對(duì)白假絲酵母菌有一定的抑制作用的內(nèi)生真菌，其能代謝產(chǎn)生一種與肺炎球菌素和棘白霉素化學(xué)性質(zhì)相似的新型的環(huán)肽類化合物(圖4)，并證明這個(gè)新型的環(huán)肽類抗生素是對(duì)抗白假絲酵母菌的活性成分。

6 越南槐

越南槐(Sophora tonkinensis Gagnep.)是豆科，槐屬灌木，具有清熱解毒，消炎止痛之效。 姚裕群等[48]對(duì)238株越南槐內(nèi)生真菌進(jìn)行抗白色念珠菌活性篩選，結(jié)果顯示，3株內(nèi)生真菌有抑菌圈產(chǎn)生，其中內(nèi)生真菌GRPH-0活菌塊對(duì)白色念珠菌的抑菌圈直徑最大，且對(duì)其他念珠菌屬具有不同程度的抑制作用。

7 展望

圖4 環(huán)肽類化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)

藥用植物內(nèi)寄生有豐富的內(nèi)生真菌，且這些內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物活性與植物本身有一定的相似性，雖然兩者的具體關(guān)系、次生代謝產(chǎn)物的合成機(jī)制等方面還需要更加深入的研究，但可以推測(cè)，藥用植物起功效的成分不一定都是植物本身，也有可能是其內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物。同種菌在不同的宿主植物中，或是在相同的宿主植物中但改變其培養(yǎng)條件，其次生代謝產(chǎn)物便具有化學(xué)多樣性。次生代謝產(chǎn)物是天然產(chǎn)物的重要來(lái)源，這使得藥用活性物質(zhì)的來(lái)源變得更為廣泛[49-51]。據(jù)資料統(tǒng)計(jì)，新的生物活性物質(zhì)中51%是內(nèi)生菌的新品種[52]。因此，相關(guān)研究將有利于我國(guó)藥物的開(kāi)發(fā)和藥用植物資源的保護(hù)與利用，也有利于利用植物內(nèi)生菌篩選結(jié)構(gòu)新穎且活性顯著的抗菌活性物質(zhì)。并且，大部分內(nèi)生真菌均可在人工培養(yǎng)條件下相對(duì)快速大量繁殖，通過(guò)基因改造等方法，可使特定成分在改造菌株中高產(chǎn)出，為某些活性藥物成分如紫杉醇的獲取提供新的資源。

然而，目前對(duì)內(nèi)生菌資源利用較少，內(nèi)生菌的相關(guān)研究仍然處于早期水平，植物類群的研究不過(guò)數(shù)百種，僅涉及了數(shù)量龐大的內(nèi)生菌種類中的很小一部分。內(nèi)生菌的次生代謝產(chǎn)物雖然種類多，但復(fù)雜多樣又不穩(wěn)定，所以相關(guān)研究也應(yīng)該關(guān)注這一方面。內(nèi)生菌暫時(shí)無(wú)法大規(guī)模推廣也是開(kāi)發(fā)內(nèi)生真菌資源的瓶頸。