免疫奶牛群布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)室診斷經(jīng)驗(yàn)分析

阿米娜·買買提

摘 要 現(xiàn)階段市場(chǎng)對(duì)于牛奶制品的需求量非常大，所以我國很多地方的奶牛養(yǎng)殖戶投入了大量的資金和技術(shù)進(jìn)行奶牛養(yǎng)殖，以期牛奶制品進(jìn)入市場(chǎng)后獲得高額的經(jīng)濟(jì)收益，但是受到多種因素影響，當(dāng)前奶牛養(yǎng)殖期間奶牛有著較高發(fā)生布魯氏菌病的風(fēng)險(xiǎn)，該疾病具有較高的傳染性、死亡率等特點(diǎn)，一旦出現(xiàn)，給養(yǎng)殖戶造成的經(jīng)濟(jì)損失較多，所以需要養(yǎng)殖戶對(duì)于免疫奶牛群布魯氏菌病的實(shí)驗(yàn)室檢查診斷工作加強(qiáng)關(guān)注并予以積極配合，以此降低牛群患病風(fēng)險(xiǎn)?；诖吮疚膶?duì)養(yǎng)殖場(chǎng)免疫奶牛群布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室診斷工作基本情況進(jìn)行了分析，探究了提升診斷結(jié)果準(zhǔn)確性的有效診斷方法。

關(guān)鍵詞 免疫；奶牛群；布魯氏菌?。粚?shí)驗(yàn)室；診斷

布魯氏菌病屬于奶牛養(yǎng)殖期間的常見疾病，病原體為革蘭氏陰性菌，好發(fā)于春季、冬季，屬于人畜共患傳染疾病，臨床癥狀主要為潛伏時(shí)間非常長、母牛流產(chǎn)、精神狀態(tài)不佳、關(guān)節(jié)炎、體重下降、乳房炎、睪丸炎、奶品質(zhì)差等，發(fā)病之后的治療、根治難度非常大，所以奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)的奶?；加性摷膊『?，養(yǎng)殖戶面臨的經(jīng)濟(jì)風(fēng)險(xiǎn)非常高。

1 材料與方法

1.1 材料

選擇本地區(qū)多處奶牛養(yǎng)殖場(chǎng)、散戶的奶牛為研究對(duì)象，采集其中300頭奶牛（月齡在13月以上、不超過16個(gè)月，均經(jīng)過布魯氏菌病免疫疫苗接種）的血液，應(yīng)用離心機(jī)作以血液血清樣本制作。結(jié)合本次實(shí)驗(yàn)室診斷的需要，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)試劑的準(zhǔn)備，包括布氏桿菌抗體競(jìng)爭(zhēng)監(jiān)測(cè)試劑、虎紅平板凝集試劑、聚合酶鏈反應(yīng)試劑。

1.2 實(shí)驗(yàn)室診斷方法

本次研究中選擇三種方法來診斷奶牛疾病免疫后的轉(zhuǎn)陽率，即酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法、虎紅平板凝集試驗(yàn)法、聚合酶鏈反應(yīng)法。

2 結(jié)果

（1）酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定：取出100份布魯氏菌病免疫奶牛血液血清進(jìn)行試驗(yàn)，研究奶牛該疾病抗體轉(zhuǎn)陽率，其中陽性奶牛例數(shù)為12頭（12.00%）；（2）虎紅平板凝集試驗(yàn)：100份免疫奶牛血液血清經(jīng)過該法檢測(cè)轉(zhuǎn)陽例數(shù)后，共檢出15例轉(zhuǎn)陽奶牛（15.00%）；（3）聚合酶鏈反應(yīng)：100份免疫奶牛血清的轉(zhuǎn)陽率通過該法檢測(cè)后，檢出陽性奶牛頭數(shù)為8頭（8.00%）；因此綜合分析上述免疫奶牛布魯氏菌病轉(zhuǎn)陽情況，發(fā)現(xiàn)虎紅平板凝集試驗(yàn)用于該指標(biāo)檢測(cè)時(shí)，結(jié)果準(zhǔn)確率高，與實(shí)際轉(zhuǎn)陽奶牛頭數(shù)保持一致，其中檢測(cè)對(duì)象的免疫期在半年或超過該時(shí)間的條件下，可以得到準(zhǔn)確的檢測(cè)結(jié)果，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法、聚合酶鏈反應(yīng)法作用于布魯氏菌病免疫奶牛轉(zhuǎn)陽檢測(cè)診斷中，也有著較好的檢查結(jié)果，其中酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法應(yīng)用后檢查出來的陽性免疫奶牛中有 7頭屬于流產(chǎn)奶牛，之后再次利用聚合酶聯(lián)反應(yīng)法對(duì)這7頭流產(chǎn)奶牛進(jìn)行疾病轉(zhuǎn)陽的檢測(cè)，結(jié)果驗(yàn)證了這一點(diǎn)，說明這兩種方法同樣在免疫奶牛群疾病陽性檢測(cè)中有著一定的檢查診斷作用。

3 結(jié)論

現(xiàn)階段進(jìn)行免疫奶牛群布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室診斷時(shí)使用的方法較多，不同方法的應(yīng)用條件與效果存在較大差異，所以需要實(shí)驗(yàn)室工作人員結(jié)合受檢奶牛群的身體基本情況，選擇最佳的診斷手段進(jìn)行應(yīng)用，以期奶牛群罹患布魯氏菌病的奶?？梢员患皶r(shí)檢查出與處理，避免病原體在養(yǎng)殖場(chǎng)所內(nèi)大規(guī)模傳染所致的嚴(yán)重后果發(fā)生。

首先虎紅平板凝集試驗(yàn)，利用該實(shí)驗(yàn)室診斷方法對(duì)于布魯氏菌病免疫奶牛進(jìn)行陽性率轉(zhuǎn)變檢查時(shí)，適用于免疫期（豬型2號(hào)布病疫苗）在6個(gè)月或以上的奶牛群體，究其原因是奶牛犢牛在娩出后至生長到8個(gè)月時(shí)進(jìn)行布魯氏菌疾病疫苗接種，之后在半個(gè)月左右時(shí)奶牛身體內(nèi)會(huì)出現(xiàn)抗體，在總抗體比例中的占比約為40%，待免疫期到3個(gè)月時(shí)，抗體比例會(huì)達(dá)到最高峰，然后免疫期到4個(gè)月-9個(gè)月時(shí)抗體會(huì)逐漸下降直至消失，因此可以選擇在免疫期處于6個(gè)月時(shí)對(duì)免疫奶牛進(jìn)行布魯氏菌病轉(zhuǎn)陽情況的檢查，可準(zhǔn)確檢出免疫奶牛群中轉(zhuǎn)陽的奶牛只數(shù)，使得養(yǎng)殖戶可及時(shí)對(duì)這部分奶牛進(jìn)行疾病發(fā)生檢查確診與治療、無害化處理，防止布魯氏菌病在養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)繼續(xù)擴(kuò)散發(fā)展[1]。其次，酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法，應(yīng)用該方法檢測(cè)疾病免疫奶牛轉(zhuǎn)陽情況時(shí)，與虎紅平板凝集試驗(yàn)法檢測(cè)條件一致，即對(duì)疾病免疫時(shí)間超過半年的豬型布病疫苗免疫奶牛進(jìn)行檢測(cè)，可得到較為理想的檢測(cè)結(jié)果，或者奶牛接種了19菌株疫苗，待免疫期在半年時(shí)檢測(cè)轉(zhuǎn)陽情況，此時(shí)奶牛身體內(nèi)疫苗抗體殘留量較少，最終檢查出的結(jié)果可以準(zhǔn)確反映出免疫奶牛是否轉(zhuǎn)陽的結(jié)果。最后聚合酶聯(lián)反應(yīng)法，該檢測(cè)方法在布魯氏菌病免疫奶牛轉(zhuǎn)陽率實(shí)驗(yàn)室診斷期間，存在敏感性差的問題，所以檢測(cè)得出的結(jié)果顯示陰性率較高，如果檢測(cè)對(duì)象應(yīng)用此法檢測(cè)分析了轉(zhuǎn)陽情況，那么基本上要在檢測(cè)結(jié)果出來后等待一個(gè)月，再次對(duì)檢測(cè)對(duì)象進(jìn)行轉(zhuǎn)陽率檢測(cè)，以此綜合兩次結(jié)果才可以得出最終的陽性率檢出結(jié)果，最后該結(jié)果仍不能將檢測(cè)對(duì)象中屬于疾病轉(zhuǎn)陽的奶牛完全檢出，因此提示在對(duì)奶牛場(chǎng)的布病奶牛接種疫苗之后進(jìn)行轉(zhuǎn)陽診斷時(shí)，盡量不要用聚合酶聯(lián)反應(yīng)法進(jìn)行陽性檢測(cè)，如果應(yīng)用了該檢測(cè)法，那么僅對(duì)免疫奶牛發(fā)生早期感染之后的乳品樣本進(jìn)行病原學(xué)的檢測(cè)即可，不可進(jìn)行血清樣本的布病轉(zhuǎn)陽檢測(cè)[2]。

4 結(jié)束語

綜上所述，布魯氏菌病對(duì)于奶牛場(chǎng)養(yǎng)殖奶牛的身體健康、生命安全造成的威脅較大， 需要養(yǎng)殖戶對(duì)于奶牛該疾病涉及的相關(guān)內(nèi)容進(jìn)行深入的研究學(xué)習(xí)，準(zhǔn)確把握奶牛發(fā)病后的臨床癥狀表現(xiàn)，每年在適當(dāng)?shù)臅r(shí)候聯(lián)系防疫人員來為全部適齡奶牛接種布病疫苗，以此降低該牛病發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)，與此同時(shí)養(yǎng)殖戶需要對(duì)免疫期奶牛的疾病轉(zhuǎn)陽情況加以關(guān)注，委托防疫中心工作人員在適當(dāng)?shù)拿庖咂谙迌?nèi)，來對(duì)全部奶牛作以疾病轉(zhuǎn)陽率的實(shí)驗(yàn)室診斷檢查，以便了解與準(zhǔn)確把握該養(yǎng)殖場(chǎng)免疫奶牛布病發(fā)生情況，盡快制定有效措施進(jìn)行疾病防控，減輕奶牛該傳染病發(fā)生后所致的嚴(yán)重危害，其中虎紅平板凝集試驗(yàn)法及酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法要多進(jìn)行應(yīng)用，依托這兩種檢測(cè)方法可以對(duì)接種了疫苗的奶牛發(fā)病情況做出準(zhǔn)確的判斷，為奶牛場(chǎng)該牛病的良好防控提供數(shù)據(jù)依據(jù)，所以這兩種實(shí)驗(yàn)室檢查診斷方法需要在后續(xù)的免疫奶牛布魯氏菌病的臨床檢測(cè)中多進(jìn)行應(yīng)用與推廣，助推本地區(qū)奶牛養(yǎng)殖產(chǎn)業(yè)可以長遠(yuǎn)穩(wěn)健發(fā)展。

參考文獻(xiàn)：

[1]武燕. 靖邊縣奶牛結(jié)核病和布魯氏菌病檢測(cè)與分析[D].西北農(nóng)林科技大學(xué)，2015.

[2]高明春，王君偉.布魯氏菌病實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)及其適用性評(píng)析[J].中國奶牛，2012（04）：35-38.