不同規(guī)格的河川沙塘鱧夏花生長及生理生化研究

遲美麗 賈永義 王雨辰

摘要：為深入了解不同規(guī)格河川沙塘鱧幼魚的生長狀態(tài)、減少沙塘鱧夏花在魚蝦混養(yǎng)池塘內(nèi)種間和種內(nèi)殘食，通過在車間內(nèi)建立模擬池塘的生態(tài)系統(tǒng)，測定了不同規(guī)格沙塘鱧夏花在養(yǎng)殖37 d后生長及生理生化指標的變化情況。結果表明，試驗中沙塘鱧魚苗總存活率為83%，中魚組的體質量變異系數(shù)與其他2組相比增加明顯。小魚組的特定生長率最快，且小魚組的超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性、雌二醇（E2）含量、睪酮（T）含量、生長激素（GH）含量和甲狀腺激素（T4）含量都顯著高于中魚組和大魚組。另外，小魚組存在50%的小規(guī)格魚不能很好地捕食青蝦的現(xiàn)象。綜合幼魚存活率、生長狀態(tài)和產(chǎn)量，建議初始放養(yǎng)時沙塘鱧體長在32 mm以上且沙塘鱧體質量/青蝦體質量的平均值在2.6以上。

關鍵詞：河川沙塘鱧;魚蝦混養(yǎng);生長差異;氧化還原酶;激素

中圖分類號： S965.199 ?文獻標志碼： A ?文章編號：1002-1302（2019）07-0179-04

河川沙塘鱧（Odontobutis potamophila）隸屬于鱸形目（Perciformes）沙塘鱧科（Odontobutidae）沙塘鱧屬（Odontobutis），俗稱土布魚、虎頭鯊、虎頭呆子等，為淡水底棲巢穴產(chǎn)卵型肉食性魚類，該魚肉質細嫩、營養(yǎng)豐富，是深受廣大消費者喜歡的名貴魚類。但隨生態(tài)環(huán)境的惡化和過度捕撈，天然資源量不斷下降。因此，急須通過開展種質保存及選育技術研究來改善其資源衰退的現(xiàn)狀。近年來，浙江省淡水水產(chǎn)研究所沙塘鱧團隊與很多學者都開展了河川沙塘鱧的繁殖方法研究[1-3]，通過不斷優(yōu)化，該團隊已攻克沙塘鱧大批量繁育過程中諸如孵化時間長、受精卵易發(fā)霉等瓶頸，每年可以為養(yǎng)殖戶提供大量優(yōu)質的沙塘鱧苗種。但在大規(guī)格苗種的池塘培育過程中發(fā)現(xiàn)，幼魚存在自殘率高、生長差異顯著以及回捕率低等情況，進而影響了大規(guī)格夏花的產(chǎn)量。室內(nèi)短期精細培育可以提高幼魚期的存活率，但目前報道的沙塘鱧夏花主要培育方式為外塘大規(guī)模養(yǎng)殖[4-6]，未見有對其幼魚進行室內(nèi)較高密度養(yǎng)殖的報道。

已有學者對沙塘鱧的形態(tài)學和繁殖力、不同群體多樣性以及早期發(fā)育學等領域進行過研究[7-9]，但很少研究魚體內(nèi)氧化還原酶、繁殖相關激素以及生長相關激素含量的綜合變化。另外，沙塘鱧和青蝦套養(yǎng)是當前沙塘鱧的主要養(yǎng)殖模式，效益較高[10]，但是放養(yǎng)時沙塘鱧夏花和青蝦的規(guī)格、放養(yǎng)時間、放養(yǎng)密度都沒有明確的標準，導致沙塘鱧和青蝦種間和種內(nèi)的殘食現(xiàn)象明顯。因此，本研究的目的是通過在車間內(nèi)建立模擬池塘的生態(tài)系統(tǒng)，深入了解池塘內(nèi)沙塘鱧幼魚的生長狀態(tài)，通過氧化還原酶、繁殖相關激素以及生長相關激素含量的變化，從而對放養(yǎng)時沙塘鱧夏花和青蝦的規(guī)格進行控制，減少沙塘鱧和青蝦種間和種內(nèi)的殘食，為池塘放養(yǎng)提供參考，進而提高綜合養(yǎng)殖效益。

1 材料與方法

1.1 試驗條件

試驗于2016年8月23日至9月28日進行，養(yǎng)殖時間 37 d。在浙江省淡水水產(chǎn)研究所綜合試驗基地的車間內(nèi)玻璃鋼養(yǎng)殖池內(nèi)開展試驗，養(yǎng)殖池規(guī)格為190 cm×160 cm×100 cm，配備有充氧和給排水系統(tǒng)，養(yǎng)殖用水為多次凈化的池塘水，溶解氧含量>6 mg/L，氨氮<0.1 mg/L，亞硝態(tài)氮<0.01 mg/L，pH值在7～8之間。

1.2 沙塘鱧幼魚放養(yǎng)

2016年8月12日，從夏花培育池塘內(nèi)選擇體質健壯沙塘鱧幼魚500尾左右，經(jīng)過10 d的暫養(yǎng)后，于8月23日逐一進行體長和體質量的測量，根據(jù)幼魚體長分為3組，分別為大魚組（體長35～45 mm）、中魚組（體長30～35 mm）和小魚組（體長25～30 mm），每組設置2個平行。在保證單位水體內(nèi)體質量一致（22.2±1.48） g/m3的前提下，選取了30尾大魚苗（體長平均41 mm，體質量平均1.62 g）、62尾中等魚苗（體長平均32 mm，體質量平均0.75 g）和87尾小魚苗（體長平均26.67 mm，體質量平均0.47 g）。水深保持在60 cm左右。

1.3 餌料蝦的放養(yǎng)

于試驗開始當日捕撈約1萬尾小青蝦（體長平均 25.17 mm，體質量平均為0.29 g）作為后備餌料蝦，試驗開始時分別投喂200 g的小青蝦于每個養(yǎng)殖池內(nèi)，在試驗結束后每個養(yǎng)殖池內(nèi)測量20尾蝦的體長、頭胸甲長和體質量，以了解餌料蝦在試驗階段的生長狀態(tài)。

1.4 模擬池塘生態(tài)的建立

在養(yǎng)殖池內(nèi)加入過濾的池塘水后，加入富含小球藻和輪蟲的藻液，由于沙塘鱧和青蝦白天均喜歡在陰暗處活動，因此在水面上種植水花生、水浮蓮和浮萍等水生植物，另外每個池子內(nèi)放入10個長24.0 cm、直徑9.5 cm的圓柱狀塑料管，作為沙塘鱧的棲息場所。

1.5 飼養(yǎng)管理和采樣

每日觀察蝦的數(shù)量和狀態(tài)，保證沙塘鱧有足夠的餌料供應。每天撈出多余的浮萍，使水面覆蓋面積在50%～60%。為合理控制水質，每2 d投喂青蝦飼料1次，每周檢測水質1次，每3 d換水1/3并進行吸污處理。養(yǎng)殖37 d后采樣，測量所有魚的體長、體質量，計算特定生長率SGR[SGR=100%×（lnm末-lnm初）/t（養(yǎng)殖天數(shù)）]和變異系數(shù)[CV=（標準差/平均值）×100%]，每組采集6尾幼魚用于生理生化指標檢測。

1.6 生理生化指標的測定

準確稱取全魚組織質量后，按質量（g） ∶ 體積（mL）=1 ∶ 9 的比例加入9倍的生理鹽水，冰水浴條件下機械勻漿，2 500 r/min，離心10 min，取上清液進行后續(xù)分析。采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定每個樣品超氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性、睪酮（T）含量、雌二醇（E2）含量、生長激素（GH）含量和甲狀腺素（T4）的含量。

1.7 數(shù)據(jù)統(tǒng)計與分析

采用SPSS 13.0軟件中的A-NOVA對所獲得的數(shù)據(jù)集進行方差分析，采用Duncans法進行多重比較，數(shù)據(jù)采用“平均值±標準差”表示，P<0.05表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 總體生長情況分析

試驗開始，投入的沙塘鱧358尾，總質量為243 g，平均體質量0.71 g，平均體長30.81 mm，試驗結束時共298尾魚，總質量為957.02 g，平均體質量為3.21 g，平均體長為 48.23 mm?？偞婊盥蕿?3%，其中大魚組、中魚組和小魚組的存活率分別為80%、87.1%和81.6%?？傮w的特定生長率為4.07%，其中大魚組、中魚組和小魚組的特定生長率分別為3.72%、3.71%、4.78%。由表1可知，試驗開始時大魚組體長和體質量的變異系數(shù)均大于其他2組，試驗結束時各個組的體長和體質量的變異系數(shù)都有所增加，但中魚組的體質量變異系數(shù)增加幅度明顯高于其他2組，達87.6%。

2.2 不同規(guī)格沙塘鱧的生長情況對比

養(yǎng)殖試驗后，每個試驗組中都出現(xiàn)了明顯的生長差異，即大、中、小個體分化明顯，為了更好地分析結果，將最終體長劃分為55 mm魚的以上、 35～55 mm和35 mm以下進行分析。研究發(fā)現(xiàn)，在大魚組中大部分的魚（62.5%）體長為55 mm以上，僅有37.5%的魚仍處于35～55 mm范圍內(nèi)，其平均體長已經(jīng)達到了50 mm左右。雖然體長相差不大，但體長55 mm以上魚的體質量卻是35～55 mm魚的2.5倍。中魚組中體長 35～55 mm 范圍內(nèi)魚所占比例較大（46.3%），而55 mm以上和 35 mm 以下魚所占比例相差不大，但是體長 55 mm 以上魚是35～55、35 mm以下體質量的2.8、11.1倍。在小魚組中，55 mm以上魚所占比例最大（43.1%），體長55 mm以上魚的體質量是35～55 mm的2.3倍、35 mm以下魚體質量的7.4倍。值得注意的是，小魚組中35 mm以下魚平均體長和體質量都比中魚組大（表2）。

2.3 餌料蝦生長狀態(tài)統(tǒng)計

試驗期間共投入青蝦1 500 g，試驗結束后剩余青蝦 760 g，試驗期間青蝦生長狀態(tài)也發(fā)生了變化。試驗前后的平均體長和平均頭胸甲長差別不大，但試驗后青蝦的各項變異系數(shù)明顯增加，尤其是體質量的變異系數(shù)，達到了83.3%（表3）。

2.4 不同規(guī)格的河川沙塘鱧氧化還原酶活性的比較

不同規(guī)格沙塘鱧的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽過氧化物酶活性之間存在明顯差異，小魚組的SOD活性顯著高于大魚組和中魚組（P<0.05），而中魚組與大魚組之間差異不顯著。GSH-PX的活性變化規(guī)律與SOD一致（圖1）。

2.5 不同規(guī)格的河川沙塘鱧繁殖相關激素含量的比較

3組不同規(guī)格的河川沙塘鱧在經(jīng)過37 d的養(yǎng)殖試驗后發(fā)現(xiàn)，雌二醇和睪酮的含量都是隨著魚體的增大而逐漸降低，其中小魚組的雌二醇和睪酮含量都與中魚組和大魚組相比顯著提高（P<0.05），而這2種激素含量在大魚組和中魚組之間無顯著差異（圖2）。

2.6 不同規(guī)格的河川沙塘鱧生長相關激素含量的比較

3組魚的生長激素和甲狀腺激素的含量隨體質量增大逐漸降低，生長激素含量顯著高于大魚組和中魚組（P<0.05），小魚組生長激素含量較大魚組增加171%，較中魚組增加65%。甲狀腺激素含量與生長激素含量變化基本一致，小魚組甲狀腺激素較大魚組增加48%，較中魚組增加29%（圖3）。

3 討論

河川沙塘鱧夏花在22.2 g/m3較高的養(yǎng)殖密度下，水質能夠長時間保持清新，表明室內(nèi)模擬池塘的生態(tài)養(yǎng)殖方式具有一定的凈化能力。試驗中發(fā)現(xiàn)，保證其餌料蝦充足的情況下仍然存在殘食現(xiàn)象，表現(xiàn)在整體存活率為83%左右，其中中魚組的成活率（87.0%）較大魚組（80.0%）和小魚組（81.6%）高，可能是由于大魚組總數(shù)比中魚組少且小魚組中的小魚易被養(yǎng)殖池內(nèi)的大個體魚蝦捕食。特定生長率結果顯示，小魚組的特定生長率4.78%，分別比大魚組和中魚組高出28.00%和29.00%，表明小魚組有更大的生長潛力。

超氧化物歧化酶活性主要反映機體清除氧自由基的能力，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）能將脂質過氧化物還原減少脂類被氧化的機會[11]，兩者都是魚體抗氧化系統(tǒng)的重要組成部分。筆者發(fā)現(xiàn)，小魚組SOD和GSH-PX的活性都顯著高于大魚組，推測其可能是小規(guī)格的幼魚具有更高的抗氧化能力。而生長相關激素和繁殖相關激素的含量也都與特定生長率一致，即小魚組明顯高于其他2組，表現(xiàn)出較大的生長和發(fā)育優(yōu)勢。

投喂青蝦大小不合適會造成小個體沙塘鱧長期處于饑餓狀態(tài)，肥滿度低。筆者觀察發(fā)現(xiàn)，大魚組中的沙塘鱧能很好地捕食青蝦，肥滿度都在2.3以上，而中魚組中約1/4和小魚組中約1/2的體長較小的魚不能很好地捕食青蝦，常緩慢游動于水面上層或趴在養(yǎng)殖池壁上來逃避大規(guī)格魚蝦的捕食，這個結果與肥滿度系數(shù)較低相吻合，后續(xù)對它們進行精細飼養(yǎng)（投喂更小規(guī)格的青蝦），也都不能改善它們的狀態(tài)，推測在餌料不充足或野外狀態(tài)下，這部分魚將會被更大的魚蝦所捕食，從而降低了夏花培育期間的存活率。

變異系數(shù)能夠反映數(shù)據(jù)離散程度，對于研究沙塘鱧和青蝦這種存在種內(nèi)相互殘食現(xiàn)象的生物有很重要的意義[12]。在本試驗中發(fā)現(xiàn)，中魚組體長和體質量的變異系數(shù)在試驗開始前為最低，而在試驗結束后變?yōu)樽罡?，尤其是體質量的離散度達到了87.6%，這種情況可能是由于中魚組中存在很大比例（25.0%）35 mm以下的魚，而小魚組這種現(xiàn)象不如中魚組明顯，可能是因為早期小魚組的魚普遍都較小，各個魚之間的影響較小，前期有較好的生長空間。另外，試驗后青蝦的各項變異系數(shù)明顯增加，尤其是體質量的變異系數(shù)達到了 83.3%，這是因為極大和極小個體所占比例較大所致，隨著青蝦的生長，導致35 mm以下的沙塘鱧的攝食情況受到限制，因此合理控制放養(yǎng)時青蝦和沙塘鱧夏花的大小比例是減輕后期魚蝦種內(nèi)殘食的有效手段。