微生物快檢方法

蘇野　柴景亮　李亮亮

摘 要：隨著當(dāng)今社會(huì)的飛速發(fā)展，越來(lái)越多的家庭已經(jīng)步入小康，人們也從如何“生存”轉(zhuǎn)向了如何“生活”，民眾的目光也漸漸地聚焦在了食品安全問(wèn)題上。那么如何快速準(zhǔn)確地監(jiān)控、檢測(cè)食品安全呢？本文主要在微生物快速檢測(cè)方法中，通過(guò)紙片法和平板培養(yǎng)法的對(duì)比，對(duì)它們的優(yōu)缺點(diǎn)進(jìn)行探究。

關(guān)鍵詞：快檢 紙片法 平板培養(yǎng)法

就食品服務(wù)行業(yè)來(lái)說(shuō)，目前存在著一些不明來(lái)歷的“三無(wú)食品”“黑工廠”“黑作坊”，導(dǎo)致老百姓時(shí)刻都要擔(dān)心吃進(jìn)肚子里的食品到底是不是安全的。由于這些問(wèn)題的存在，擁有高效、便捷的食品安全檢驗(yàn)檢測(cè)方法是迅速發(fā)現(xiàn)并解決食品安全問(wèn)題的關(guān)鍵所在，這也導(dǎo)致了食品檢驗(yàn)檢測(cè)的發(fā)展方向是向著“批量檢測(cè)”和“快速檢測(cè)”兩方面發(fā)展。

一、研究目的及意義

研究目的：

1.研究“紙片法”和“平板培養(yǎng)法”的優(yōu)缺點(diǎn)和特點(diǎn);

2.通過(guò)研究各種食品微生物快速檢驗(yàn)來(lái)對(duì)比“紙片法”和“平板培養(yǎng)法”的優(yōu)勢(shì)。

研究意義：

食品微生物快檢方法的不斷發(fā)展與進(jìn)步是保障民眾的飲食安全和生活質(zhì)量的重要保證之一。食品微生物快檢這項(xiàng)技術(shù)，還能對(duì)食品類(lèi)產(chǎn)品受到的病原微生物污染程度做出一個(gè)十分具有科學(xué)性及準(zhǔn)確性的正確評(píng)價(jià)，從而對(duì)那些被判定為受到污染的食品產(chǎn)品立案調(diào)查，以此作為防治食品安全隱患的重要保障措施 ?，F(xiàn)今食品微生物快檢方法多種多樣，但其中的大部分都需要一定的經(jīng)濟(jì)基礎(chǔ)來(lái)支持檢驗(yàn)項(xiàng)目的順利進(jìn)行，而食品微生物快速檢驗(yàn)則是一種以“預(yù)防”為主的檢控手段，它需要檢驗(yàn)人員和市場(chǎng)監(jiān)管人員大量、定期地進(jìn)行市場(chǎng)產(chǎn)品管理與抽樣檢控，因此，當(dāng)食品微生物快速檢驗(yàn)技術(shù)進(jìn)入了現(xiàn)今的“n=5/AC=0”時(shí)代后，如何做到快速化、批量化、準(zhǔn)確化和經(jīng)濟(jì)化四者兼顧變成了全世界所有檢驗(yàn)人的研究方向與目的。

二、食品微生物快速檢驗(yàn)的常用方法介紹

1.紙片法：在使用快檢紙片時(shí)，確保除樣品外一切與紙片直接接觸的物品、工具都應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理，操作人員進(jìn)行操作時(shí)需佩戴頭套、口罩及無(wú)菌手套，將紙片取出后，以生理鹽水浸泡后，用紙片充分接觸樣品，維持30秒左右，后取下紙片，放入培養(yǎng)箱，以37°恒溫培養(yǎng)，一般18小時(shí)后便可查看結(jié)果。

2.平板培養(yǎng)法 ：取樣25g（液體樣品25mL）左右，將樣品均質(zhì)，之后樣品約1mL進(jìn)行無(wú)菌培養(yǎng)，按要求加入培養(yǎng)基，大約2到5天可查看結(jié)果。

3.MPN計(jì)數(shù)法：只有在大致確定樣品中待測(cè)菌種不多時(shí)可使用，在樣品處理完成后對(duì)其進(jìn)行系列稀釋?zhuān)笕∪齻€(gè)連續(xù)的稀釋度，分別接種三個(gè)培養(yǎng)管，經(jīng)過(guò)2至4天后對(duì)照MPN表查看結(jié)果。

4.VITEK法：需要全自動(dòng)菌落檢定儀，樣品中致病菌經(jīng)過(guò)處理后，用平板劃線培養(yǎng)單個(gè)菌落，之后使用儀器進(jìn)行鑒定，5天左右可查看結(jié)果，所需經(jīng)費(fèi)高昂。

5.PCR法：使用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)儀，樣品經(jīng)處理后上機(jī)檢驗(yàn)，直至找到目標(biāo)基因，本方法有著極高的靈敏度，但對(duì)操作環(huán)境、操作人員的要求很高，而且儀器價(jià)格不菲，檢驗(yàn)費(fèi)用同樣不低。

6.VIDAS法：同樣是一種快速便捷但對(duì)資金要求較高的檢驗(yàn)方法，VIDAS法要求使用全自動(dòng)酶聯(lián)免疫分析儀，在增菌培養(yǎng)后即可直接進(jìn)入儀器進(jìn)行檢驗(yàn)，且短時(shí)間內(nèi)便可以獲知結(jié)果。

本文主要介紹紙片法和平板培養(yǎng)法，這兩種方法是筆者實(shí)際操作過(guò)的方法，也是筆者較為喜歡的兩種方法，而且各自都有可以說(shuō)作為標(biāo)志性的特點(diǎn)。

三、紙片法和平板培養(yǎng)法的對(duì)比

在檢驗(yàn)方面，雙方都屬于是快速檢驗(yàn)方法，都具有快速、批量化的特點(diǎn)，能夠在短時(shí)間內(nèi)得到結(jié)果并出具報(bào)告，并且都具有相當(dāng)?shù)臏?zhǔn)確性;在技術(shù)方面，對(duì)檢驗(yàn)人員技術(shù)要求不高，耗材價(jià)格不高。但就紙片法和平板培養(yǎng)法來(lái)對(duì)比，它們之間的各自的特點(diǎn)和優(yōu)劣勢(shì)是顯而易見(jiàn)的。一般而言，紙片法具有極高的適應(yīng)性，在大多數(shù)惡劣環(huán)境下都可進(jìn)行采樣檢驗(yàn)，對(duì)檢驗(yàn)人員技術(shù)要求低于平板培養(yǎng)法，培養(yǎng)時(shí)間也比較短，耗材更易攜帶。而平板培養(yǎng)法經(jīng)過(guò)系列稀釋?zhuān)古囵B(yǎng)成功率更高，結(jié)果更為準(zhǔn)確，并能觀察到菌落形成的過(guò)程及它們各自的特征，還可以對(duì)混合菌種進(jìn)行分離操作，不受菌落多少的因素影響，可檢驗(yàn)菌種遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于紙片法，結(jié)果更為穩(wěn)定。

由對(duì)比結(jié)果來(lái)看：紙片法更適合對(duì)單項(xiàng)菌種（需在該紙片檢驗(yàn)范圍內(nèi)）進(jìn)行檢驗(yàn)，可以用于戶(hù)外抽檢，紙片法方便快捷，也可大批量處理樣品，實(shí)用性更強(qiáng)。而平板培養(yǎng)法則更適合于實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部，對(duì)菌種進(jìn)行研究向培養(yǎng)，用來(lái)觀察菌種生成過(guò)程和特征。雖然平板培養(yǎng)法適用范圍更廣，但就抽樣檢驗(yàn)、食品質(zhì)保等實(shí)用方面，相比紙片法它還是有些欠缺。

四、小結(jié)

現(xiàn)今社會(huì)從未忽視對(duì)食品安全的重視，保證食品安全是保障民生最重要的一點(diǎn)。在這一大背景下，食品微生物檢驗(yàn)技術(shù)也迅速發(fā)展起來(lái)，向快速化、批量化發(fā)展，一系列食品微生物快速檢驗(yàn)技術(shù)的出現(xiàn)和發(fā)展壯大成了必然之勢(shì)。通過(guò)對(duì)比兩種方法，筆者認(rèn)為在使用方法和檢測(cè)過(guò)程中都存在很多不同，甚至在結(jié)果的記錄上也有差異。但這兩種方法卻在原理上有很多共通之處，它們完全可互為參考、互為檢驗(yàn)。我們應(yīng)該積極地為保障我國(guó)食品安全刻苦鉆研，為讓老百姓吃上放心食品而努力。