回顧分析血型紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查及鑒定結(jié)果

徐勇結(jié) 邱東飚

福建醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院輸血科，福建省福州市 350005

不規(guī)則抗體產(chǎn)生于除了ABO血型系統(tǒng)外的其他血型系統(tǒng)中，也稱意外抗體。不規(guī)則抗體的產(chǎn)生給臨床輸血帶來了許多困擾，輕者引起寒戰(zhàn)、發(fā)熱，影響治療效果，重者產(chǎn)生溶血性輸血反應(yīng)，危及生命[1]。因此，在臨床輸血前進(jìn)行血型不規(guī)則抗體篩查意義重大，不可免之。本文對我院28 554例入院患者血型紅細(xì)胞進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年1—12月收治于我院的28 554例患者的血型標(biāo)本作為觀察對象，其中男15 733例,女12 821例,年齡1～85歲,平均年齡(47.7±4.5)歲，入院前有輸血史6 089例，無輸血史22 465例；女性中有妊娠史9 738例，無妊娠史3 083例。

1.2 檢測方法

1.2.1 血型不規(guī)則抗體篩查： 所有患者在入院后(輸血治療前)第2天晨起空腹采集靜脈血5ml置于EDTA-K2抗凝管中, 室溫下離心、分離血漿。用生理鹽水將篩選紅細(xì)胞懸液配制成0.8%～1%的紅細(xì)胞懸液(10μl壓積紅細(xì)胞懸浮于1ml生理鹽水中)。取抗人球蛋白凝膠卡，每份待檢樣本標(biāo)記3孔，分別標(biāo)記為“Ⅰ”“Ⅱ”“Ⅲ”。每孔按照標(biāo)記加入相應(yīng)的0.8%～1%不規(guī)則抗體篩選紅細(xì)胞懸液各50μl。向標(biāo)記的每孔中分別加入待檢者的血漿25μl，將微柱凝膠檢測卡垂直豎立，輕敲混勻加樣槽中的血漿與紅細(xì)胞懸液。置于免疫微柱孵育器中37℃孵育15min。置于專用離心機(jī)離心。離心結(jié)束后，取出觀察判定結(jié)果并記錄。結(jié)果判斷：篩選紅細(xì)胞產(chǎn)生凝集或溶血，即為陽性；整個過程既無溶血又無凝集，表明被檢血漿中不存在與試劑紅細(xì)胞上抗原相應(yīng)的抗體，即為陰性。

1.2.2 血型不規(guī)則抗體鑒定：對于抗體篩查陽性標(biāo)本進(jìn)行鑒定實驗，取小試管10支，分別做1～10標(biāo)記，分別加入被檢者血清2滴，然后加入1～10號譜細(xì)胞試劑各1滴。將上述混勻后，根據(jù)需要(4℃，室溫，37℃)放置數(shù)分鐘，以1 000rpm離心1min，肉眼觀察凝集度，對照細(xì)胞譜反應(yīng)格局表判別抗體特異性。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析, 計數(shù)資料以率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 28 554例入院患者血型不規(guī)則抗體篩檢結(jié)果 28 554例入院患者(輸血治療前)中檢出不規(guī)則抗體陽性96例，抗體陽性率0.34%，其中特異性抗體以Rh血型系統(tǒng)抗體最為多見，其余為MNs、Kidd、Duffy、Lewis血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體。特異性抗體84例占87.5%(84/96),主要為抗-E、抗-c、抗-M；非特異性抗體12例占12.5%(12/96)，主要為自身抗體。84例特異性抗體分布情況見表1。

表1 84例特異性抗體分布情況

2.2 不規(guī)則抗體在不同人群中的分布情況 本次調(diào)查中發(fā)現(xiàn)女性不規(guī)則抗體陽性率高于男性，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)；不規(guī)則抗體篩查陽性者與既往是否有妊娠和輸血史密切相關(guān)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。具體見表2。

表2 不規(guī)則抗體在不同人群中的分布情況

3 討論

輸血安全是臨床醫(yī)療安全的重要組成部分。隨著輸血醫(yī)學(xué)的發(fā)展和進(jìn)步，臨床輸血治療前必須進(jìn)行患者與獻(xiàn)血員的血液配對實驗，即交叉配血，配血合格的才能給患者輸注。由于不規(guī)則抗體的產(chǎn)生，會對血型鑒定和交叉配血產(chǎn)生干擾，往往需要花一定的時間才能選擇出合適的血液，這對急診搶救患者是非常不利的，錯誤的輸注含有不規(guī)則抗體的血液還有可能帶來輸血反應(yīng)的風(fēng)險。 為避免可能出現(xiàn)的輸血和醫(yī)療安全隱患，迫切需要發(fā)現(xiàn)血型紅細(xì)胞不規(guī)則抗體并且對其特異性做出準(zhǔn)確鑒定，以避免因不規(guī)則抗體所引起輸血不良反應(yīng), 確保輸血安全有效。

本文結(jié)果顯示，在28 554例入院患者血型標(biāo)本中檢出的不規(guī)則抗體96例，陽性率為0.34%，與朱偉彥等[2]報道的0.36%基本相符；低于姚瑞英等[3]報道的0.49%。從表1可以看出，檢出的特異性抗體中，主要為Rh血型系統(tǒng)，這主要是因為除了ABO血型系統(tǒng)之外，最具有臨床意義的就是Rh血型系統(tǒng)。Rh系統(tǒng)中抗原性最強(qiáng)的是RhD抗原，僅次于抗原A和抗原B，但是本研究不規(guī)則抗體中Rh血型系統(tǒng)卻是抗-E抗體占的比例最高，達(dá)到了73.33%(44/60)，這是因為在人血清中不存在抗Rh的天然抗體，只有當(dāng)Rh陰性者在接受Rh陽性的血液后，才可能產(chǎn)生抗Rh的抗體。而目前Rh D抗原已經(jīng)成為輸血前的常規(guī)檢查項目，Rh D陰性患者很大程度上輸注的都是Rh D陰性的紅細(xì)胞，減少了產(chǎn)生抗-D的機(jī)會。此外，由于我國漢族人群中Rh E陽性率為47%[4]，Rh E陰性患者輸入Rh E陽性血液的概率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于Rh D，多次輸血的患者易產(chǎn)生抗-E抗體。由于血型鑒定中未把抗原E、c、C、e列入常規(guī)檢測項目，抗原E、c、C、e的輸血產(chǎn)生抗體的概率就大大提高，對于已產(chǎn)生抗體的患者再次輸入含有該抗原的血液有可能誘發(fā)溶血性輸血反應(yīng)。因此，對于在臨床上多次輸血的患者需要更加重視。

此外，本研究還檢出非特異性抗體12例占12.5%，為自身抗體。自身抗體是免疫疾病的重要標(biāo)志，常見于系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫性溶血性貧血、重癥肌無力、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等疾病。由于自身抗體對自身紅細(xì)胞有自凝效應(yīng)，臨床上需要先排除自身抗體的干擾才能進(jìn)行血型鑒定和交叉配血。本文還檢出了MNs、Kidd、Duffy、Lewis血型系統(tǒng)的不規(guī)則抗體，在臨床輸血過程中也需要引起重視，選擇該抗體對應(yīng)抗原陰性血液輸注，保證輸血安全。

表2顯示不規(guī)則抗體在不同人群中分布是有差異的，女性患者陽性率明顯高于男性；有輸血史和妊娠史的患者陽性率高于無輸血史和妊娠史者。輸血和妊娠的共同點就是給人體帶來了外來免疫刺激，而女性患者帶來的刺激是雙重的(既有輸血的免疫又有妊娠的免疫)，說明不規(guī)則抗體的產(chǎn)生主要跟免疫刺激有關(guān)。因此，輸血前了解患者臨床資料極為重要，特別是有過輸血史的妊娠女性，進(jìn)行不規(guī)則抗體篩查時需提高篩查力度和篩查級別，以免漏檢，以便指導(dǎo)臨床用血[5]。筆者建議輸血科醫(yī)生在患者每次需要輸血時，必須重新抽取血液標(biāo)本進(jìn)行不規(guī)則抗體復(fù)查，當(dāng)篩查到陽性時，必須鑒定出抗體特異性，進(jìn)而針對抗體特異性篩選出對應(yīng)抗原陰性血液，做出正確的血液選擇，才能保證輸血安全有效；同時抗體篩查陽性結(jié)果必須記錄檔案并且永久保存，以方便查閱。

綜上所述，通過對入院患者血型標(biāo)本進(jìn)行常規(guī)紅細(xì)胞不規(guī)則抗體篩查，從而防止因為輸注含有某抗體相應(yīng)抗原的血液而引起溶血性輸血反應(yīng)，提高輸血安全性，具有臨床推廣應(yīng)用的價值。