豬瘟防制研究進(jìn)展

譚萍，張清均

（重慶開(kāi)縣鎮(zhèn)安鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站，重慶開(kāi)縣 405416）

近年來(lái)，豬瘟在美洲、亞洲、歐洲等國(guó)家和地區(qū)呈現(xiàn)復(fù)發(fā)的趨勢(shì)，一些宣布已消滅豬瘟的國(guó)家(如法國(guó)、荷蘭、德國(guó)、比利時(shí)等)又見(jiàn)豬瘟復(fù)發(fā)的報(bào)道。在我國(guó)，豬瘟流行呈現(xiàn)典型豬瘟和非典型豬瘟共存、持續(xù)感染與隱性感染共存、免疫耐受和帶毒綜合征共存等現(xiàn)象。豬瘟新的流行形式給全世界養(yǎng)豬業(yè)提出了新的挑戰(zhàn)，免疫接種仍是防制豬瘟的重要措施，疫苗對(duì)預(yù)防豬瘟起重大作用。因而通過(guò)加大免疫力度防控豬瘟的發(fā)生，為了檢測(cè)豬瘟免疫效果，制定合理的免疫程序，為各級(jí)動(dòng)物防疫主管部門(mén)和養(yǎng)豬場(chǎng)場(chǎng)主制定豬瘟免疫計(jì)劃提供依據(jù)。

一、防治措施

(一)預(yù)防為主是控制豬瘟的主導(dǎo)思想豬瘟的預(yù)防必須是在加強(qiáng)飼養(yǎng)管理的基礎(chǔ)上建立健全衛(wèi)生防疫制度。要嚴(yán)格執(zhí)行各項(xiàng)預(yù)防措施，定期消毒，嚴(yán)防病原傳入。要購(gòu)買(mǎi)質(zhì)量可靠的疫苗，注意運(yùn)輸過(guò)程和使用前疫苗的保存，因?yàn)楦邷睾蜏夭钭兓笠资挂呙缡?，已過(guò)期或已失效的疫苗不要使用；防疫注射要做到頭頭免疫，在疫情流行的豬場(chǎng)最好能做到“一豬一針”，如不能，至少得做到“一欄一針”。

（二）做好偽狂犬病等的控制與凈化豬場(chǎng)存在免疫抑制性病原如偽狂犬病病毒、豬呼吸與繁殖綜合征病毒等時(shí)，容易造成豬瘟免疫的失敗。如要在豬群中進(jìn)行偽狂犬病免疫接種時(shí)，注意豬瘟免疫在前，偽狂犬病免疫在后，一般采用豬瘟免疫至少1周以后再進(jìn)行偽狂犬病的免疫。

（三）緊急免疫一旦發(fā)生豬瘟，為減少損失可用加倍劑量的活苗進(jìn)行緊急接種。

（四）隔離或淘汰帶毒母豬可用豬瘟診斷試劑盒或活體扁桃體熒光抗體等方法檢出豬瘟帶毒母豬。對(duì)檢出的帶毒母豬進(jìn)行隔離，加強(qiáng)免疫或淘汰。在豬群中開(kāi)展免疫監(jiān)測(cè)時(shí)，如發(fā)現(xiàn)經(jīng)準(zhǔn)確免疫或多次免疫而抗體水平仍然低下的母豬，應(yīng)予以撲殺。

（五）防止混合感染或繼發(fā)感染豬瘟的發(fā)生常會(huì)混合感染或繼發(fā)感染其他疾病，在臨床上應(yīng)全面考慮，特別是細(xì)菌性疾病，常增加豬群的死亡率?？捎每股赜枰苑乐?，有條件的可做藥敏試驗(yàn)篩選有效的抗生素，如不能，應(yīng)輪換用藥，常用的有環(huán)丙沙星和恩諾沙星等廣譜抗菌藥物。

二、免疫失敗原因

在我國(guó)，由于庭院式飼養(yǎng)還占有很大比例，規(guī)?；i場(chǎng)規(guī)范程度差，各豬場(chǎng)技術(shù)水平不高和防疫設(shè)施不健全，長(zhǎng)此以往便形成了CSF帶毒母豬持續(xù)感染，為CSF的水平傳播和垂直傳播提供了前提條件，而CSF帶毒母豬持續(xù)感染，可以產(chǎn)下經(jīng)胎盤(pán)感染的仔豬，這種豬如果存活則成為持續(xù)感染者，并對(duì)豬瘟疫苗的免疫形成免疫耐受。

（一）免疫程序不合理隨著生產(chǎn)的發(fā)展和集約化程度的提高，原有的豬瘟免疫程序已不能解決生產(chǎn)問(wèn)題。往往加大免疫劑量而沒(méi)有根據(jù)豬群抗體水平制定免疫程序，造成母源抗體干擾等免疫失敗。

（二）免疫劑量不足豬瘟疫苗的劑量與疫苗的保護(hù)性密切相關(guān)，當(dāng)接種疫苗劑量少、疫苗抗原含量不足時(shí)，可造成豬瘟免疫不足，給免疫不足豬攻擊豬瘟強(qiáng)毒，強(qiáng)毒能在豬體內(nèi)繁殖，成為帶毒豬，呈現(xiàn)亞臨床感染。

（三）疫苗質(zhì)量與操作不正確生產(chǎn)中應(yīng)用的豬瘟凍干疫苗是經(jīng)過(guò)效檢合格后出廠的，但運(yùn)輸和保存溫度過(guò)高，疫苗失真空，疫苗超過(guò)有效期，稀釋液不合格及疫苗稀釋后不能盡快用完，常常影響疫苗的質(zhì)量。另外，注射疫苗時(shí)消毒不嚴(yán)格，接種劑量不準(zhǔn)確，接種部位和方法不當(dāng)，都會(huì)造成疫苗免疫效果降低。

（四）母豬持續(xù)感染帶毒妊娠母豬感染豬瘟病毒以后，常不表現(xiàn)臨床癥狀，可經(jīng)胎盤(pán)感染仔豬，造成這些仔豬持續(xù)感染，產(chǎn)生免疫耐受性，往往出現(xiàn)免疫失敗的現(xiàn)象。

（五）其他疾病等因素的免疫干擾 當(dāng)豬群中存在偽狂犬病、豬呼吸與繁殖綜合征等免疫抑制病原以及飼料霉變時(shí)，均可造成豬群免疫抑制，從而造成豬瘟的免疫失敗。

（六）毒株變異與疫苗保護(hù)性盡管豬瘟病毒只有一個(gè)血清型，但豬瘟兔化弱毒與流行毒株在保護(hù)性抗原上有程度不同的差異，這種差異影響豬瘟兔化弱毒疫苗的免疫保護(hù)力，但加大免疫劑量可獲得免疫保護(hù)。

對(duì)豬瘟抗體產(chǎn)生影響的因素很多，包括疫苗種類(lèi)、免疫劑量、免疫抑制性疾病、環(huán)境因素個(gè)體差異等，其中免疫劑量和疫苗類(lèi)型尤其重要。

三、豬瘟疫苗的發(fā)展

目前，在我國(guó)由于制造工藝的不同，利用豬瘟兔化弱毒株生產(chǎn)的常用豬瘟疫苗有：豬瘟淋脾苗、豬瘟細(xì)胞苗以及新型疫苗。

1.豬瘟淋脾苗，是豬瘟兔化弱毒株接種成年家兔，無(wú)菌收獲含毒量高的淋巴結(jié)、脾臟制備而成的疫苗。其特點(diǎn)是免疫原性強(qiáng)，免疫效果最好；免疫后抗體產(chǎn)生快，持續(xù)時(shí)間長(zhǎng)；淋脾苗中含有某些免疫相關(guān)因子，起到免疫增強(qiáng)作用；可用于緊急預(yù)防接種，效果好于細(xì)胞苗；使用計(jì)量相對(duì)較小，一般是1～2頭份；但由于用活體動(dòng)物生產(chǎn)，生產(chǎn)量非常少，所以成本高。

2.豬瘟細(xì)胞苗，豬瘟兔化弱毒株接種犢牛睪丸細(xì)胞培養(yǎng)，收獲細(xì)胞培養(yǎng)物，冷凍干燥制成的疫苗。其特點(diǎn)是免疫后抗體產(chǎn)生慢于組織苗；一般使用劑量相對(duì)較大，2～4頭份，甚至更多；細(xì)胞生產(chǎn)，生產(chǎn)量大，價(jià)格便宜；可用于超前免疫。乳兔苗禁止與菌苗同時(shí)注射。該疫苗要在-15℃以下避光保存，有效期為12個(gè)月。細(xì)胞苗大小豬都可使用。注射4 d后即可產(chǎn)生免疫力，注射后免疫期可達(dá)12個(gè)月。該疫苗宜在-15℃以下保存，有效期為l8個(gè)月。注射前應(yīng)了解當(dāng)?shù)卮_無(wú)疫病流行。斷奶前仔豬可接種4頭份疫苗，以防母源抗體干擾。

豬瘟脾淋苗稀釋后，應(yīng)放在冷藏容器內(nèi)，嚴(yán)禁結(jié)冰，如氣溫在15℃以下，6 h內(nèi)要用完；如氣溫在15℃～27℃，應(yīng)在3 h內(nèi)用完。豬瘟細(xì)胞苗隨用隨稀釋?zhuān)♂尯蟮囊呙鐟?yīng)放冷暗處。并限2 h內(nèi)用完。以上三種疫苗使用時(shí)按瓶簽注明頭份用無(wú)菌生理鹽水按每頭份1 ml稀釋?zhuān)∪饣蚱は伦⑸洹Ｗ⑸湟陨先N疫苗后，均可能有少數(shù)豬在1～2 d內(nèi)發(fā)生反應(yīng).但3 d后即可恢復(fù)正常。注苗后如出現(xiàn)過(guò)敏反應(yīng)，應(yīng)及時(shí)注射抗過(guò)敏藥物，如腎上腺素等。疫苗注射的時(shí)間最好是進(jìn)食后2 h或進(jìn)食前。豬瘟脾淋苗建議在加強(qiáng)免疫(如商品豬的第二次免疫和母豬的常規(guī)免疫接種)時(shí).或者在緊急接種時(shí)使用。豬瘟細(xì)胞苗建議在首次免疫或乳前免疫(超免)時(shí)使用。豬瘟疫苗與藍(lán)耳病疫苗免疫至少要間隔一周以上時(shí)間。

我國(guó)現(xiàn)用的豬瘟兔化弱毒疫苗對(duì)預(yù)防目前流行的CSFV是完全有效的。用不同劑量的C株苗免疫豬，證實(shí)免疫劑量與保護(hù)水平密切相關(guān)。劑量不足時(shí)，攻毒后不能阻止強(qiáng)毒在體內(nèi)復(fù)制和帶毒。免疫劑量提高到80～ 100PD (約 320～ 400 RID，RID為兔體反應(yīng)量)，攻毒后能制止亞臨床感染，所有耐過(guò)豬均不帶毒。

3.新型的豬瘟疫苗。

（1）豬瘟病毒基因缺失型弱毒疫苗?；蛉笔б呙缡怯没蚬こ碳夹g(shù)將強(qiáng)毒株毒力相關(guān)基因切除構(gòu)建的活疫苗。病毒編碼的基因可以刪除，當(dāng)某些與病毒復(fù)制無(wú)關(guān)的毒力基因缺失突變后，病毒毒力喪失，同時(shí)還保持著良好的免疫原性，該類(lèi)疫苗安全性好，不易返祖；其免疫接種與強(qiáng)毒感染相似，肌體可對(duì)病毒的多種抗原產(chǎn)生免疫應(yīng)答，免疫期長(zhǎng)，免疫力堅(jiān)實(shí)，尤其適用于局部接種，誘導(dǎo)產(chǎn)生黏膜免疫力，因而是較理想的疫苗。

（2）豬瘟病毒亞單位疫苗?；蚬こ讨亟M亞單位疫苗是用DNA重組技術(shù)，將編碼病毒原微生物保護(hù)性抗原的基因?qū)嗽思?xì)胞或真核細(xì)胞，使其在受體細(xì)胞中高效表達(dá)，分泌保護(hù)性抗原肽鏈，然后再提取保護(hù)性抗原肽鏈，加入佐劑而制成的。這種抗原是病毒粒子的一部分，不含有核酸，因此非常安全，但是亞單位疫苗的免疫原性通常較低，需要佐劑合用，或偶聯(lián)到適當(dāng)?shù)妮d體上應(yīng)用，從完整病毒粒子上制備具有免疫原性的亞單位疫苗，往往過(guò)程復(fù)雜，成本較高，而采用基因工程方法，克隆得到編碼病毒保護(hù)性抗原基因，在體外對(duì)其進(jìn)行改造和修飾后，重新轉(zhuǎn)移到異源生物宿主體內(nèi)或培養(yǎng)細(xì)胞中，可使病毒蛋白獲得大量表達(dá)，利用真核細(xì)胞高效表達(dá)系統(tǒng)來(lái)表達(dá)豬瘟病毒免疫原蛋白，并以此作為抗原可獲得豬瘟病毒亞單位疫苗。

（3）豬瘟病毒活載體重組疫苗?；蚬こ讨亟M活載體疫苗是用基因工程技術(shù)將保護(hù)性抗原基因(目的基因)轉(zhuǎn)移到載體中使之表達(dá)的活疫苗。病毒基因組的某一核苷酸序列被切除、突變或在該區(qū)域內(nèi)插入外源性基因片段，而不影響病毒復(fù)制，這一序列稱為病毒的復(fù)制非必須區(qū)。利用基因工程的方法將復(fù)制非必須區(qū)克隆出來(lái)，體外改造后再將異源性病毒的保護(hù)性抗原基因及啟動(dòng)子調(diào)控序列插入其中，通過(guò)體內(nèi)同源重組技術(shù)獲得重組病毒，利用該組病毒接種動(dòng)物，不僅可以誘導(dǎo)肌體產(chǎn)生針對(duì)異源性病毒的特異性免疫反應(yīng)，而且能夠使宿主獲得針對(duì)載體病毒的免疫力。

（4）豬瘟病毒核酸疫苗。核酸疫苗包括DNA疫苗和RNA疫苗，由編碼能引起保護(hù)性免疫反應(yīng)的病原體抗原的基因片段和載體構(gòu)建而成。其被導(dǎo)入機(jī)體的方式主要是直接肌肉注射，或用基因?qū)⑴溆性藦?fù)制組件和真核表達(dá)調(diào)控組件的粒為載體，將免疫原基因插入該質(zhì)粒中，用裸核酸接種動(dòng)物即可產(chǎn)生免疫保護(hù)。

豬瘟病毒核酸疫苗經(jīng)臨床觀察證明，可以抵抗強(qiáng)毒攻擊，但是會(huì)出現(xiàn)40℃以上的高燒，免疫后可以檢測(cè)出輕微的T、B細(xì)胞反應(yīng)。余興龍等分別構(gòu)建了包含豬瘟病毒E2基因的重組表達(dá)質(zhì)粒，并且證明它們對(duì)豬有較好的保護(hù)作用。

（5)豬瘟病毒全長(zhǎng)感染性cDNA標(biāo)記疫苗。全長(zhǎng)cDNA標(biāo)記疫苗是在分子水平上，將具有選擇性標(biāo)記的基因，替換或克隆到致弱病毒全長(zhǎng)cDWA中，獲得了重組病毒，以重組病毒接種動(dòng)物后，可以區(qū)分抗體來(lái)自于自然感染還是標(biāo)記疫苗免疫，從而鑒別出感染豬群和免疫豬群。

四、豬瘟疫苗使用注意事項(xiàng)

1.超前免疫。在進(jìn)行超前免疫時(shí)一定要真正做到仔豬不吃初乳，實(shí)現(xiàn)完全意義上的“超前” 免疫，如果做不到這點(diǎn)，最后的效果還不如20日齡以后免疫。超前免疫一般使用豬瘟弱毒細(xì)胞苗免疫。不建議使用組織苗，但有的淋脾苗上也有超前免疫的說(shuō)明。所以這就要看疫苗使說(shuō)明書(shū)了。

2.豬瘟疫苗的選擇。對(duì)于飼養(yǎng)管理?xiàng)l件較好、無(wú)疫病流行的豬場(chǎng)，使用豬瘟細(xì)胞苗和組織苗的免疫效果相當(dāng)。但對(duì)于一直使用細(xì)胞苗免疫的豬場(chǎng)。如果飼養(yǎng)環(huán)境、管理?xiàng)l件較差，CSF免疫抗體水平參差不齊，效價(jià)不高，又有散發(fā)性CSF存在，可考慮用組織苗替代細(xì)胞苗進(jìn)行CSF免疫。以提高豬群整體CSF抗體水平。

3.豬瘟疫苗的免疫劑量。豬瘟淋脾組織苗免疫劑量應(yīng)以不低于150RID為宜。豬瘟細(xì)胞苗劑量應(yīng)以不低于750RID為宜。不必要盲目的再加大免疫劑量，造成養(yǎng)豬生產(chǎn)上的經(jīng)費(fèi)投入。

4.豬瘟疫苗的免疫時(shí)間最好要通過(guò)對(duì)免疫抗體的監(jiān)測(cè)做出決定，但多數(shù)人們采用：仔豬22～25日齡首免，60～70日齡二免。種母豬在斷奶后配種前免疫，種公豬每年免疫2次。

5.加強(qiáng)疫苗的運(yùn)輸、保存和使用等環(huán)節(jié)上的管理這是確保疫苗使用有效性不可忽視的環(huán)節(jié)。

6.選用信譽(yù)度高的疫苗生產(chǎn)廠家生產(chǎn)的疫苗這是防止CSF免疫失敗的前提。CSF的防治是一項(xiàng)綜合性的系統(tǒng)工程，防治或消滅CSF不僅要堅(jiān)持合理的免疫原則，還要制定對(duì)CSF的定期監(jiān)測(cè)制度。隨時(shí)淘汰CSF持續(xù)感染豬是CSF凈化的有效手段；提高豬的福利待遇， 防止其它疫病的感染也是防止CSF發(fā)生的輔助手段。

五、結(jié)語(yǔ)

無(wú)論是過(guò)去還是現(xiàn)在，豬瘟疫苗對(duì)豬瘟的預(yù)防、控制及凈化起到了不可替代的作用。就疫苗的發(fā)展方向來(lái)說(shuō)，滅活苗的使用已經(jīng)成為歷史，弱毒苗雖然仍在使用，但如果要消滅豬瘟，弱毒苗應(yīng)該禁止使用；重組疫苗雖然已經(jīng)取得了很多成功，但要達(dá)到臨床應(yīng)用還有很多工作要做；亞單位標(biāo)記疫苗因能區(qū)分疫苗接種豬和野毒感染豬有強(qiáng)大的優(yōu)勢(shì)，如在臨床上推廣和應(yīng)用可以對(duì)最終消滅豬瘟助一臂之力，但必須有與之相配套的鑒別診斷方法才能顯示其威力，在臨床上使用和推廣。

（略）