幾種果渣提取物抗氧化能力的比較研究

譚強(qiáng)來 曾臻 武曉麗 徐鋒

摘?要：目的：探究果渣的抗氧化能力，為果渣的開發(fā)提供科學(xué)依據(jù)。方法：以乙醇為提取溶劑，利用超聲輔助提取法提取蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣中的活性成分，通過測定總抗氧化能力，以及對DPPH·、·OH和O?-2·的清除率，探究不同果渣醇提物的抗氧化能力并進(jìn)行對比。結(jié)果：同等質(zhì)量的果渣所獲得的提取物均具有較強(qiáng)的總抗氧化能力，蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣對DPPH· 的清除率分別為76.12%、58.94%、80.56%，對·OH的清除率分別達(dá)到86.73%、64.83%、94.05%，對O?-2· 的清除率分別為73.90%、75.84%、85.40%。結(jié)論：蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣中均含有很好的抗氧化活性成分，其抗氧化能力比較為：獼猴桃果渣>蘋果渣>橘子渣。

關(guān)鍵詞：蘋果渣;橘子渣;獼猴桃果渣;抗氧化能力

和其他國家相比，我國的水果產(chǎn)業(yè)比較發(fā)達(dá)，種類豐富，種植面積廣闊，產(chǎn)量也高，是世界上最大的水果生產(chǎn)國之一[1-2]。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步以及人們對營養(yǎng)需求的變化，水果已從之前只用于鮮食的單一消費(fèi)方式轉(zhuǎn)變?yōu)楣?、果醬、果醋等多種消費(fèi)途徑，這種消費(fèi)方式的轉(zhuǎn)型為社會帶來了更多的經(jīng)濟(jì)利益，但大量的果渣如果沒有合理的處理方式，不僅會造成環(huán)境污染，還會造成資源的浪費(fèi)[3-4]。果渣主要是由果皮、果芯和部分果肉組成，和鮮果相比，雖然已有大量營養(yǎng)組分流失，但其中仍含有較多的纖維素、蛋白質(zhì)、維生素和礦物質(zhì)等營養(yǎng)成分[5-8]。研究表明，從果渣中提取的多酚、黃酮和花青素等活性物質(zhì)具有很好的抗氧化效果[9]。目前關(guān)于果渣抗氧化能力的研究主要分為體內(nèi)實(shí)驗(yàn)和體外實(shí)驗(yàn)兩部分，研究技術(shù)已經(jīng)非常成熟，有很多關(guān)于蘋果果渣、藍(lán)莓果渣、楊梅果渣以及棗果渣在內(nèi)的相關(guān)研究，但很少有關(guān)于橘子渣和獼猴桃果渣的抗氧化活性物質(zhì)研究。本文將以蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣為試驗(yàn)對象，利用超聲輔助提取法得到醇提物后，進(jìn)行總抗氧化能力測定試驗(yàn)，以及清除DPPH·、·OH和O?-2·的試驗(yàn)，探究不同種類果渣的抗氧化能力，并進(jìn)行對比。

1?材料與方法

1.1?材料與試劑

新鮮蘋果、橘子和獼猴桃，華潤萬家超市;總抗氧化能力測定試劑盒，南京建成生物工程研究所;DPPH·?標(biāo)準(zhǔn)品、維生素C標(biāo)準(zhǔn)品，日本東京化成工業(yè)株式會社;其他多用試劑均為分析純。

1.2?儀器與設(shè)備

CH-8606 型微量分析天平，Mettler-Toledo 公司;RE-52CS-2型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，鞏義市予華儀器有限公司;THZ-98A型恒溫振蕩器，上海一恒科學(xué)儀器有限公司;723型可見分光光度計(jì)，上海光譜儀器有限公司。

1.3?方法

1.3.1?果渣醇提物的制備?用榨汁機(jī)對鮮果進(jìn)行榨汁，得到的果渣進(jìn)行晾干，粉碎并過50目篩。分別稱取等量的蘋果果渣、橘子果渣和獼猴桃果渣，以70%的乙醇為提取溶劑，按料液比1∶20的比例放入超聲儀中進(jìn)行超聲提取。超聲條件：超聲功率320w、超聲溫度40℃、超聲時(shí)間40min。超聲完成后利用真空泵進(jìn)行抽濾，濾渣再超聲提取2次，合并濾液后用旋蒸儀濃縮。濃縮液轉(zhuǎn)移至蒸發(fā)皿中，進(jìn)行真空干燥，所得3種干燥物做好標(biāo)記并于冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.3.2?果渣總抗氧化能力的測定?將蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣的提取物用蒸餾水定容至25mL，冷藏備用。用試劑盒測定幾種果渣提取物的總抗氧化能力，總抗氧化能力的計(jì)算公式為式（1）：

總抗氧化能力=（OD測定管?-OD對照管?）÷0.01÷30×f稀釋倍數(shù)?÷C待測溶液濃度?（1）

1.3.3?果渣對DPPH·的清除率測定[10] 制備DPPH·?標(biāo)準(zhǔn)工作液：用甲醇配制濃度為0.1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品儲備液，放入4℃條件避光保存，用時(shí)稀釋至0.05mg/mL的濃度。向10mL比色管中加入2.0mL之前準(zhǔn)備好的樣品溶液和2.0mL的DPPH· 標(biāo)準(zhǔn)工作液，混勻后蒸餾水定容至刻度。于室溫條件下避光反應(yīng)30min，然后用可見分光光度計(jì)在517nm處測定吸光值?？瞻兹芤翰患覦PPH· 標(biāo)準(zhǔn)工作液，空樣則用蒸餾水代替樣品，同時(shí)用維生素C溶液做陽性對照。樣品對DPPH· 的清除率計(jì)算公式為式（2）：

DPPH·清除率（%）=[1-（A樣品?-A空白?）/A空樣?]×100%（2）

1.3.4?果渣對·OH的清除率測定[11-12] 向10mL比色管中加入5.0mmol/L鄰二氮菲溶液0.5mL和pH=7.4的磷酸鹽緩沖液2.0mL，充分混勻后加入2.5mmol/L的FeSO4溶液1.0mL，再加入0.1%的雙氧水溶液0.5mL，用水定容至5mL。使整個(gè)反應(yīng)體系在37℃的水浴鍋中恒溫反應(yīng)60min，用分光光度計(jì)測定在536nm處的吸光度。上述反應(yīng)體系記為損傷管，不加雙氧水的記為未損傷管，加入樣品的記為樣品管。維生素C溶液做陽性對照，果渣對·OH的清除率計(jì)算公式為式（3）：

·OH清除率（%）=（A樣品管?-A損傷管?）/（A未損傷管?-A損傷管?）×100%（3）

1.3.5?果渣對O?-2·的清除率測定?測定方法采用鄰苯三酚自氧化法[13]。向反應(yīng)試管中加入3.0mL pH=8.20的Tris-HCl緩沖液，1.0mL樣品溶液，混勻后在25℃水浴鍋中恒溫反應(yīng)25min，然后加入40μL 30mmo/L的鄰苯三酚溶液，迅速混勻并用分光光度計(jì)測定在325nm處的吸光度，反應(yīng)5min后再次記錄吸光度值?？瞻坠苡谜麴s水代替樣品溶液，并用維生素C溶液做陽性對照。分別得出樣品管和空白管每分鐘吸光度值的變化率，然后用式（4）計(jì)算果渣對O?-2·的清除率：

O?-2·清除率（%）=（ΔA樣品管?-ΔA空白管?）/ΔA空白管?×100%（4）

1.4?數(shù)據(jù)分析

采用SPSS Statistics 19.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行顯著性分析，P<0.05為差別顯著。測定結(jié)果用±s表示。

2?結(jié)果與分析

2.1?果渣的總抗氧化能力

水果是一種富含抗氧化活性成分的食物[14-15]。從表1中可以看出，蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣均具有一定的抗氧化能力，但和維生素C對照組相比，3種種類水果的果渣總抗氧化力均顯著低于維生素C組（P<0.05）。3種果渣之間比較，發(fā)現(xiàn)總抗氧化力大小順序?yàn)椋韩J猴桃果渣>蘋果果渣>橘子果渣，但獼猴桃果渣和蘋果渣之間沒有顯著差異（P>0.05），兩者和橘子渣之間則有顯著性（P<0.05）。

2.2?果渣對DPPH· 的清除率

對DPPH· 的清除能力是評價(jià)體外抗氧化作用的一個(gè)重要指標(biāo)[16]。從表2中可以看出，蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣都能夠清除DPPH·自由基。和維生素C對照組相比，3種種類水果的果渣對DPPH·的清除率顯著低于維生素C組（P<0.05）。3種果渣之間比較，發(fā)現(xiàn)抑制DPPH·?能力的大小順序?yàn)椋韩J猴桃果渣>蘋果果渣>橘子果渣，且三者之間均具有顯著性（P<0.05）。

2.3?果渣對·OH的清除率

·OH抑制率試驗(yàn)是體外抗氧化評價(jià)體系中的重要一環(huán)[17]。從表3可以看出，蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣都能夠清除·OH自由基。和維生素C對照組相比，獼猴桃果渣對·OH的清除率與維生素C組相當(dāng)（P>0.05），蘋果果渣和橘子果渣對·OH的清除率顯著低于維生素C組（P<0.05）。3種果渣之間比較，發(fā)現(xiàn)抑制·?OH能力的大小順序?yàn)椋韩J猴桃果渣>蘋果果渣>橘子果渣，三者之間均具有顯著性（P<0.05）。

2.4?果渣對O?-2·的清除率

O?-2·清除率試驗(yàn)是體外抗氧化實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)重要方法[18]。從表4中可以看出，蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣對O?-2·自由基均有很好的清除能力。和維生素C對照組相比，獼猴桃果渣對O?-2·的清除率低于維生素C組，但沒有顯著差異（P>0.05），而蘋果果渣和橘子果渣對O?-2·的清除率要顯著低于維生素C組（P<0.05）。3種果渣之間比較，發(fā)現(xiàn)抑制O?-2·能力的大小順序?yàn)椋韩J猴桃果渣>橘子果渣>蘋果果渣，其中獼猴桃組清除能力顯著高于蘋果和橘子組（P<0.05），橘子組和蘋果組之間不存在顯著差異（P>0.05）。

3?結(jié)論

水果中通常富含維生素、膳食纖維、多糖、黃酮和多酚等具有生物活性的成分，常吃水果能夠預(yù)防機(jī)體衰老、增強(qiáng)機(jī)體免疫力、減少多種疾病發(fā)生率[19-22]。為了提升水果再加工過程中產(chǎn)生的果渣的使用價(jià)值，本試驗(yàn)探究了蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣的抗氧化效果，結(jié)果表明，3種果渣均具備一定的抗氧化能力，對DPPH·?、·OH和O?-2·自由基都有較好的清除效果，可見果渣中仍含有豐富的活性物質(zhì)，能夠發(fā)揮清除自由基的能力。多酚、多糖、黃酮和維生素均有很好的抗氧化效果[23-24]，果渣的抗氧化力來源可能正是這些物質(zhì)。比較3種果渣的抗氧化力可知：獼猴桃果渣>蘋果渣>橘子渣。但和同等濃度的維生素C相比，3種果渣的抗氧化效果較低，可能是因?yàn)楣崛∥锛兌炔粔?，含有其他不具備抗氧化能力的雜質(zhì)[25-26]。

綜上所述，蘋果渣、橘子渣和獼猴桃果渣中均含有較豐富的抗氧化活性成分，其中，獼猴桃果渣的抗氧化能力最好。但是果渣中具體發(fā)揮抗氧化能力的成分究竟是哪些，以及各種成分功效的占比是多少，還需后續(xù)的進(jìn)一步探究?！?/p>

參考文獻(xiàn)

[1]左麗麗.狗棗獼猴桃多酚的抗氧化與抗腫瘤效應(yīng)研究[J].哈爾濱：哈爾濱工業(yè)大學(xué)，2013.

[2]王岸娜，徐山寶，吳立根.獼猴桃多酚組分及穩(wěn)定性研究[J].河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2008，29（2）：43-46.

[3]王岸娜，徐山寶，劉小彥，等.福林法測定獼猴桃多酚含量的研究[J].食品科學(xué)，2008，29（7）：398-401.

[4]陳瑋琦，郭玉蓉，竇嬌，等.蘋果幼果中酚類物質(zhì)抗氧化活性研究[J].食品工業(yè)科技，2015，36（1）：115-118.

[5]周越勇，王岸娜，吳立根.大孔吸附樹脂分離純化獼猴桃中多酚的優(yōu)選研究[J].河南工業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2007，28（5）：32-36.

[6]周勸娥，田呈瑞，關(guān)為，等.陜西苦菜葉黃酮的提取及抗氧化活性的測定[J].食品工業(yè)科技，2013，34（9）：97-102.

[7]趙金梅，高貴田，薛敏，等.不同品種獼猴桃果實(shí)的品質(zhì)及抗氧化活性[J].食品科學(xué)，2014，35（9）：108-122.

[8]Hyejin Yang，Young-Chul Lee，Kyoung-Sik Han，et al.?Green and gold kiwifruit peel ethanol extracts potentiate pentobarbital-induced sleep in mice via a GABAergic mechanism[J].Food Chemistry，2013（136）：160-163.

[9]焦巖，常影，余世鋒，等.超聲波輔助提取獼猴桃皮黃酮及其抑菌作用研究[J].食品科技，2013，38（4）：228-231.

[10]左麗麗，王振宇，盧靜，等.獼猴桃多酚的生理功能研究進(jìn)展[J].食品研究與開發(fā)，2013，34（11）：117-120.

[11]李進(jìn)，李淑珍，馮文娟，等.黑果枸杞葉總黃酮的體外抗氧化活性研究[J].食品科學(xué)，2010，31（386）：259-262.

[12]杜國榮.獼猴桃（Actinidia）、柿（Diospyros kaki L）和蘋果（Malus domestica Borkh）果實(shí)的抗氧化能力及其抗氧化活性成分的分析[D].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2009：42-43.

[13]張力平，孫長霞.植物多酚的研究現(xiàn)狀及發(fā)展前景[J].林業(yè)科學(xué)，2005（11）：157-162.

[14]宋立江.植物多酚研究與利用的意義及發(fā)展趨勢[J].化學(xué)進(jìn)展，2000（5）：25-29.

[15]李丹，丁霄霖.蕎麥生物活性成分的研究進(jìn)展（2）——蕎麥多酚的結(jié)構(gòu)特性和生理功能[J].西部糧油科技，2000（6）：38-41.

[16]凌關(guān)庭.有“有底氣類營養(yǎng)素”之稱的多酚類物質(zhì)[J].中國食品添加劑，2000（1）：28-37.

[17]劉莉華，宛曉春，李大祥.黃酮類化合物抗氧化活性構(gòu)效關(guān)系的研究進(jìn)展[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2002，29（3）：265-270.

[18]Atawodi SE，Atawodi JC，Idakwo P，et al.Evaluation of the polyphenol composition and antioxidant activity of african variety of dacryodes edulis（G.Don）H.JLam fruit[J].Journal of Medicinal Food，2009，12（6）：1321-1325.

[19]Kaya A，AydIn O，KolaylI S.Effect of different drying conditions on the vitamin C（Ascorbic Acid）content of hayward kiwifruit（Actinidia Deliciosa Planch）[J].Food and Bioproducts processing，2010，88（2-3）：165-173.

[20]Du GR，Li MJ，Ma FW，et al.Antioxidant capacity and the relationship with polyphenol and vitamin C in actinidia fruit[J].Food Chemistry，2009，113（2）：557-562.

[21]Lu J，Li XW，Gui MY，et al.Studies on chemical constituents of leaves of actinidia kolomikta planch（Ⅱ）[J].Chemical Journal of Chinese Universities-Chinese，2009，30（3）：468-473.

[22]Sun-Waterhouse D，Wen I，Wibisono R，et al.Evaluation of the extraction efficiency for polyphenol extracts from by-products of green kiwifruit juicing[J].International Journal of Food Science and Technology，2009，44（12）：2644-2652.

[23]Bursal E，Gulcin I.Polyphenol contents and in vitro antioxidant activities of lyophilised aqueous extract of kiwifruit（Actinidia Deliciosa）[J].Food Research International，2011，44（5）：1482-1489.

[24]Hirsch AM，Longeon A，Guyot M.Fraxin and esculin：two coumarins specific to actinidia chinensis and a-deliciosa（Kiwifruit）[J].Biochemical Systematics and Ecology，2002，30（1）：55-60.

[25]謝佳，張靜.不同苦瓜多糖的體外抗氧化活性研究[J].廣州化工，2010，38（5）：87-90.

[26]孫瑾，王宗舉，陳崗，等.橄欖中多酚類物質(zhì)體外抗氧化活性研究[J].中國食品添加劑，2010，100（3）：69-73.

[27]黃文靜，周瑞，張嚴(yán)磊，等.黃芪莖葉總黃酮提取工藝及其抗氧化活性研究[J].中國食物與營養(yǎng)，2018，24（8）：32-34.

Antioxidant Activity Comparison of Several Fruit Pomace Extracts

TAN Qiang-lai?1，ZENG Zhen?1，WU Xiao-li?2，XU Feng?3

（?1 Xiamen Medical College，Xiamen 361023，China;?2 School of Basic Medical Science，Jiangxi University of Traditional Chinese Medicine，Nanchang 330004，China;?3 Jiangxi-OAI Joint Research Institute，Nanchang University，Nanchang 330047，China）

Abstract：ObjectiveTo explore the antioxidant ability of fruit pomace is helpful to enhance the application value and ways of fruit pomace.MethodUsing ethanol as extraction solvent，the active components in apple pomace，orange pomace and kiwifruit pomace were extracted by ultrasound-assisted extraction.The antioxidant capacity of different ethanol extracts from apple pomace，orange pomace and kiwifruit pomace was investigated and compared by measuring the total antioxidant capacity and the scavenging rates of DPPH·，·OH and O?-2· .ResultThe extracts from the same quality pomace had strong total antioxidant activity.The scavenging rates of apple pomace，orange pomace and kiwifruit pomace on DPPH· were 76.12%，58.94% and 80.56% respectively，the scavenging rates of ·OH were 86.73%，64.83% and 94.05% respectively，and the scavenging rates of O?-2·were 73.90%，75.84% and 85.40% respectively.ConclusionThe apple pomace，orange pomace and kiwifruit pomace contained rich antioxidant components，and the antioxidant activity of the three components was kiwifruit pomace >apple pomace >orange pomace.

Keywords：apple pomace;orange pomace;kiwifruit pomace;antioxidant activity

（責(zé)任編輯?唐建敏）