關(guān)于食品微生物快速檢測技術(shù)的研究進(jìn)展

呂曉晶

摘 要：近年來，國內(nèi)外的食品安全事件層出不窮，不僅嚴(yán)重影響了市場秩序，而且還給公眾帶來了無處不在的恐慌。因此，建立食品病原微生物的快速檢測方法對于食品安全及人類健康有著重要的意義。本文筆者來談一談就對食品微生物快速檢測技術(shù)的研究進(jìn)展。

關(guān)鍵詞：食品微生物;快速檢測;食品安全;研究進(jìn)展

隨著食品工業(yè)的迅速發(fā)展和人們生活水平的不斷提高，食品安全問題越來越受到人們的重視，而食品的污染大多數(shù)是因?yàn)椴≡⑸镆鸬?，這就迫切要求建立和研究食品病原微生物快速檢測方法以加強(qiáng)對食品衛(wèi)生安全的監(jiān)測。近年來，由于新技術(shù)新方法在食品微生物檢驗(yàn)領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用，有效的提高了檢測效率和檢驗(yàn)速度。下面介紹幾種食品微生物快速檢測方法。

一、免疫學(xué)技術(shù)

1、免疫熒光技術(shù)：免疫熒光技術(shù)（Immunofluorescence techIIique就是通常所說的熒光抗體技術(shù)，在該抗體或者抗原上加人含有熒光的物質(zhì)，該物質(zhì)不會(huì)影響機(jī)體的特性，通過顯微鏡下的觀察，就會(huì)找到熒光標(biāo)記的抗原或抗體，實(shí)現(xiàn)監(jiān)督和鑒別的功能。1）從待檢樣本中分離出抗體或者抗原，然后將樣本跟抗體結(jié)合，讓固相載體與其發(fā)生反應(yīng)。2）利用洗滌的方式將抗原抗體從固相載體中分離出來，以一定的比例讓固相載體跟待檢樣本混合。添加一些酶，與其發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生可以辨別的有色物質(zhì)，根據(jù)有色物質(zhì)的深淺來分析和判定待見樣本中的微生物狀況等。該檢測方式耗費(fèi)時(shí)間短，靈敏度較高。

2、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)：酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)中涵蓋了熒光技術(shù)跟免疫技術(shù)，主要是通過抗體和抗原受固相載體的吸附作用而產(chǎn)生的免疫酶染色，如果底物出現(xiàn)顏色，定量的有色產(chǎn)物就會(huì)很容易從待檢樣本中脫離出來。該方式特點(diǎn)為應(yīng)用分為廣、便捷操作、靈敏度高、定量分析、檢測的速度快，且耗費(fèi)較少的成本費(fèi)用。

3、免疫層析技術(shù)：免疫層系技術(shù)可以有效的實(shí)現(xiàn)對金黃色葡萄糖球菌、霍亂桿菌、沙門氏菌、布氏桿菌和大腸桿菌的檢測和鑒定，檢測速度快、準(zhǔn)確，方便快捷，無污染。其主要原理是通過固相免疫測定技術(shù)來將抗體和抗原完成結(jié)合后固化，然后在移動(dòng)中被分離出來。另外還可以采用免疫磁珠技術(shù)來檢測，該技術(shù)可以利用抗體跟磁珠連接。將增菌液捕捉在平板上，然后可以觀察目的菌種的狀況。

二、分子生物學(xué)

1、阻抗法

阻抗法的原理是微生物在生長時(shí)培養(yǎng)基中的碘惰性底物經(jīng)過代謝成為活性底物，這時(shí)培養(yǎng)基中的電導(dǎo)性就會(huì)增加以降低培養(yǎng)基中的阻抗，這對培養(yǎng)基中的電阻抗的具體變化情況進(jìn)行檢查分析就會(huì)完成對被檢測樣本微生物的檢測鑒定。該種檢測方法適用的范圍廣，在很多領(lǐng)域都得到了廣泛的應(yīng)用，其具有很多優(yōu)點(diǎn)，比如特異性、高敏感性以及反映快速等。

2、放射法

該種檢測方法是將多種物理和化學(xué)診斷方法結(jié)合在一起的新的檢測技術(shù)，其原理是在細(xì)菌生長的過程中通過培養(yǎng)基中的鹽類底物或者是有碳標(biāo)記的碳水化合物經(jīng)過代謝之后產(chǎn)生一氧化碳，這時(shí)對產(chǎn)生的一氧化碳量進(jìn)行測量分析，其量在原有碳水化合物的基礎(chǔ)上一氧化碳量有沒有增加來實(shí)現(xiàn)對被檢測樣本中的某種微生物細(xì)菌進(jìn)行分析。該種檢測方法具有很多優(yōu)點(diǎn)，比如準(zhǔn)確度高、速度快，更重要的是可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測。該種檢測技術(shù)對各類物品的無菌檢測都是非常適用的。

三、代謝法

1、阻抗法：該方式可以在多個(gè)領(lǐng)域應(yīng)用，具有敏感性強(qiáng)、反應(yīng)快等特點(diǎn)。阻抗法的主要技術(shù)原理是通過將微生物中所處培養(yǎng)基中的惰性物質(zhì)轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚晕镔|(zhì)，如此就會(huì)增加導(dǎo)電性，阻抗降低，通過查看電阻抗的變化狀況，進(jìn)一步就可以實(shí)現(xiàn)微生物的檢測和分析。

2、放射法：通過放射法進(jìn)行微生物的測定具有速度快、準(zhǔn)確度高的特點(diǎn)，并且可以實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化檢測，省時(shí)省力。其主要工作原理是融合了化學(xué)診斷和物理方式等技術(shù)，培養(yǎng)微生物培養(yǎng)基的鹽類底物和的、碳水化合物代謝后的一氧化碳等。測定一氧化碳的含量，從而分析細(xì)菌的狀況等。

四、酶聯(lián)免疫吸附測定法

此法廣泛用于細(xì)菌、霉菌的檢測及其他許多領(lǐng)域，如用于大腸菌群的快速測定，在4小時(shí)之內(nèi)即可獲得結(jié)果。測定時(shí)，將酶分子與抗體（或抗原）分子聯(lián)接成酶標(biāo)分子，當(dāng)它與固相免疫吸附劑中相應(yīng)抗原、抗體或抗抗體相遇時(shí)，形成酶—抗原—抗體復(fù)合物，加入酶的相應(yīng)底物，在酶的催化作用下發(fā)生生化反應(yīng)，生成有色物質(zhì)，根據(jù)顏色的深度，即可測定溶液中抗原或抗體的量。該方法具有可定量、反應(yīng)敏感、特異性高、標(biāo)記物穩(wěn)定、結(jié)果判斷客觀、簡便完全等優(yōu)點(diǎn)，而且可同時(shí)進(jìn)行上千份樣品的分析，與常規(guī)檢測法的相關(guān)性在0.95 以上。

五、快速測試片法

快速測試片是指以紙片、紙膜、膠片等作為培養(yǎng)基載體，將特定的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附著在上面，通過微生物在上面的生長、顯色來測定食品中微生物的方法。這是一種集化學(xué)、高分子學(xué)和微生物學(xué)于一體的檢測方法。3M公司的perrifilmTMPlate系列微生物測試片還加入了染色劑、顯色劑，增強(qiáng)了菌落的目視效果，而且避免了熱瓊脂法不適宜受損細(xì)菌恢復(fù)的缺陷。應(yīng)用于食品檢驗(yàn)中的霉菌快速檢驗(yàn)紙片具有操作簡便，僅需36 ℃培養(yǎng)，不需要低溫設(shè)備;快速，僅需2d就可觀察結(jié)果，比現(xiàn)在的國家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)方法縮短3d～5d?？煞謩e檢測菌落總數(shù)、大腸菌群計(jì)數(shù)、霉菌和酵母計(jì)數(shù)

結(jié)束語

隨著我國食品安全問題受到政府和老百姓的廣泛關(guān)注，食品微生物的快速檢測方法在食品衛(wèi)生學(xué)檢驗(yàn)方面也起著越來越重要的作用，在分子生物學(xué)技術(shù)、免疫學(xué)技術(shù)以及自動(dòng)化和計(jì)算機(jī)技術(shù)高速發(fā)展的情況下對食品微生物的快速檢驗(yàn)都起到了極大的推動(dòng)作用。

參考文獻(xiàn)

[1]張玉梅，孫學(xué)斌，高旭年，紫外分光光度法測定大豆總異黃酮的含量【J】中國食品衛(wèi)生雜志，2004（4）：7-9

[2]李薇.食品微生物中致病菌檢測技術(shù)淺談【J】.中國高新技術(shù)企業(yè)，2010，（31）：35—36.