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    嘉寶果藥理學(xué)功效研究進展

    2019-09-10 07:22:44林寶妹邱珊蓮鄭開斌
    福建農(nóng)業(yè)科技 2019年1期
    關(guān)鍵詞:藥理學(xué)功效

    林寶妹 邱珊蓮 鄭開斌

    摘 要:桃金娘科擬香桃木屬嘉寶果果實富含花青素、沒食子酸和蘆丁等多酚類物質(zhì),具有抗氧化、降血脂、抗菌、降血糖、抗癌等多種藥理學(xué)作用,其他植株部位如根、莖、葉等也表現(xiàn)出一定的抗氧化和體外降糖功效。查閱國內(nèi)外文獻,對嘉寶果的藥理學(xué)功效進行綜述,并簡要探討了嘉寶果當(dāng)前研究的不足之處及今后的研究方向,為嘉寶果的開發(fā)利用提供參考。

    關(guān)鍵詞:嘉寶果;藥理學(xué);功效

    DOI: 10.13651/j.cnki.fjnykj.2019.01.016

    Abstract: Myrciaria Cauliflora Berg is rich in anthocyanin, gallic acid, rutin and other polyphenols, belonging to the Myrtaceae family.It has many pharmacological effects, such as antioxidation, hypolipidemic, antibacterial, hypoglycemic, anticancer and so on. Other parts of the plant, such as roots, stems, leaves, also show certain antioxidant and in vitro hypoglycemic effects. The pharmacological efficacy of Myrciaria Cauliflora Berg was summarized by consulting domestic and foreign literature. The deficiencies of current research and future research directions of Myrciaria Cauliflora Berg were briefly discussed, which provided reference for the development and utilization of Myrciaria Cauliflora Berg.

    Key words: Myrciaria Cauliflora Berg; pharmacological; efficacy

    嘉寶果Jaboticaba又名樹葡萄、珍寶果,為桃金娘科擬香桃木屬常綠灌木或小喬木,原產(chǎn)于巴西南部,常見品種為莎芭拉Myrciaria cauliflora,在當(dāng)?shù)氐姆N植歷史超過400年[1-2]。嘉寶果1年可多次開花結(jié)果,花果直接著生于枝干上,觀賞性強,果實呈深紫色,汁多味甜,營養(yǎng)成分豐富,其蛋白質(zhì)、糖類、脂肪、纖維的含量豐富,VB2、Vc 含量分別為0.0019、0.2167 mg·g-1,在常見瓜果中屬于較高水平,礦物質(zhì)含量高達2.8%~3.8%(以干質(zhì)量計),與20種常見瓜果相比,其鋅含量為0.0033 mg·g-1,處于較高水平。嘉寶果的外觀、大小、形狀與葡萄相似,經(jīng)對比,其營養(yǎng)成分也與葡萄最為接近[3-5]。研究表明,多酚類化合物具有抗氧化、降血糖、降血脂等功能[6-7]。經(jīng)檢測,嘉寶果果實含有40多種芳香成分如萜烯類、酯類、醇類等,且富含多酚類化合物如花青素、槲皮素、蘆丁、沒食子酸、鞣質(zhì)等[8-9],具有廣泛的生物學(xué)活性。本文綜述了國內(nèi)外嘉寶果藥理學(xué)功效研究進展,旨在為嘉寶果今后的開發(fā)利用提供參考。

    1 抗氧化作用

    人體細胞內(nèi)多種氧化還原反應(yīng)不斷產(chǎn)生和清除活性氧自由基,當(dāng)機體的抗氧化能力降低或者受到內(nèi)外源性的損傷后自由基產(chǎn)生增多,體內(nèi)的氧化與抗氧化能力失去平衡,氧化反應(yīng)超過抗氧化的清除能力時,機體便處于氧化應(yīng)激狀態(tài)[10]。氧化應(yīng)激可引起機體組織氧化損傷和蛋白質(zhì)的表達異常,使機體處于易損狀態(tài),從而與多種疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。提高機體的抗氧化能力對于疾病的預(yù)防和治療具有重要的意義[11]。許多研究表明,嘉寶果具有很強的體內(nèi)外抗氧化作用,具體表現(xiàn)在清除自由基、抗脂質(zhì)過氧化、提高抗氧化酶活性等方面。

    1.1 自由基清除能力

    嘉寶果可清除DPPH、ABTS+、OH·等自由基,阻斷自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。Souza等[12]將去籽的成熟嘉寶果果實經(jīng)過干燥、粉碎、55%乙醇浸提、過濾、旋蒸等操作得到果實提取物,DPPH自由基清除試驗結(jié)果表明,嘉寶果提取物清除DPPH自由基的能力相當(dāng)于沒食子酸的7.08倍,并通過差分脈沖伏安法測定提取液的電活性,再次驗證嘉寶果提取物的抗氧化能力。將嘉寶果果皮烘干粉碎過篩后,先用50%甲醇提取,殘渣用70%丙酮提取,二者合并,除去溶劑后用甲醇復(fù)溶,得到的嘉寶果果皮甲醇提取物對DPPH自由基的半數(shù)清除濃度(EC50)為3.18 g·g-1 (以清除每克DPPH所需樣品計),清除DPPH自由基的能力高于葡萄柚Citrus paradise果皮、檸檬Citrus limon果皮和青檸Citrus aurantiifolia果皮;其對ABTS+自由基的清除能力為1.017 mmoL·g-1(以每克樣品相當(dāng)于抗氧化劑trolox的摩爾量計,下同),高于10多種水果對ABTS+自由基的清除能力,但低于卡姆果Myrciaria dubia對ABTS+自由基的清除能力(1.237 mmoL·g-1)[13]。按照嘉寶果果皮顏色,將嘉寶果果實分為綠果期、紅果期和紫果期,分離不同時期果實的皮和籽,測定其70%乙醇皮/籽提取物對DPPH、ABTS+、OH·這3種自由基的清除能力發(fā)現(xiàn),以上提取物清除DPPH、ABTS+自由基的能力弱于抗壞血酸,而清除OH·自由基的能力強于抗壞血酸[14]。Leite等[15]采用ORAC及TEAC等2種不同方法研究嘉寶果果皮對大鼠血漿抗氧化能力的影響,結(jié)果表明,嘉寶果果皮凍干粉添加量為2.0%和2.3%時,大鼠血漿的抗氧化能力分別提高1.3倍(TEAC)和1.7倍(ORAC)。

    1.2 抗脂質(zhì)過氧化

    機體內(nèi)的不飽和脂肪酸在自由基和一些氧化劑的作用下生成自由基中間產(chǎn)物,進一步氧化形成脂質(zhì)過氧化物,脂質(zhì)過氧化物的最終產(chǎn)物是丙二醛(MDA)[16-17]。MDA有較強的細胞毒性,可抑制體內(nèi)抗氧化酶的活性,進而減弱體內(nèi)抗氧化能力[18]。Batista等[19]將嘉寶果果皮制成凍干粉后按不同比例添加到高脂飼料中喂養(yǎng)高脂飼料誘導(dǎo)的高血脂模型大鼠,6周后檢測發(fā)現(xiàn),大鼠血清中總飽和脂肪酸含量下降,單不飽和脂肪酸含量上升;與模型組相比,所有試驗組肝組織脂質(zhì)過氧化減少;隨著高脂飼料中果皮凍干粉添加比例增加,腦組織中的脂質(zhì)過氧化也逐漸減少。將不同濃度的嘉寶果皮提取液加入香腸中,儲存35 d時采用TBARS方法檢測香腸中脂質(zhì)過氧化終產(chǎn)物MDA的含量,結(jié)果發(fā)現(xiàn)當(dāng)嘉寶果果皮提取液添加比例≥5%時,果皮提取液添加組的MDA含量顯著低于對照組,說明果皮提取物可以延緩脂質(zhì)氧化,具有保鮮作用[20]。

    1.3 抗氧化酶活性

    機體在正常生理狀態(tài)下,體內(nèi)的抗氧化酶系統(tǒng)會分泌如超氧化歧化酶(SOD)、谷胱甘肽氧化酶(GSHPx)、過氧化氫酶(CAT)等抗氧化酶,及時清除機體在生理狀態(tài)下產(chǎn)生的自由基,以此來保持正常的氧化平衡狀態(tài),保護機體不受氧化損傷[18]。采用STZ注射建立糖尿病大鼠模型,以不同劑量嘉寶果果皮凍干粉(1.0、2.0 g·kg-1)飼養(yǎng)大鼠40 d并檢測其血漿和肝、腎、腦等組織中的抗氧化酶活性,結(jié)果表明嘉寶果果皮飼養(yǎng)組大鼠腦組織中的超氧化歧化酶(SOD)增加明顯,與對照組相比增加了約55%;肝臟與腎臟中的過氧化氫酶(CAT)和谷胱甘肽過氧化物酶(GPX)活性與對照組相比顯著升高;嘉寶果果皮高劑量組(2.0 g·kg-1)大鼠血漿中的谷胱甘肽過氧化物酶活性與對照組相比升高了25%[21]。Hsu 等[22]將嘉寶果果實提取物按照0.1%、0.5%和1.0%的比例添加到高脂飼料中連續(xù)飼養(yǎng)Ⅱ型糖尿病小鼠8周后發(fā)現(xiàn),模型組小鼠腎臟GSH活性下降、抗氧化酶活性降低,隨著嘉寶果提取物添加比例的增加,小鼠腎臟抗氧化酶如SOD、GPX以及GSH活性均逐漸增加,至1.0%果實提取物添加組,以上測定的指標(biāo)值已接近正常小鼠。

    2 抗糖尿病作用

    Ⅱ型糖尿病通常由胰島素抵抗和胰島β細胞功能受損導(dǎo)致,隨著糖尿病病情的進展,將伴隨著嚴重的并發(fā)癥包括心血管病變、糖尿病腎病和視網(wǎng)膜病變等[23]?;ㄇ嗨卮嬖谟谏钌参镏?,大量的細胞、動物、臨床試驗表明花青素可通過多種途徑如提高組織對胰島素的敏感性、保護胰島β細胞、促進胰島素分泌以及減少小腸糖類吸收等達到抗糖尿病的效果[24]。嘉寶果果皮富含以矢車菊素葡萄糖苷和飛燕草素葡萄糖苷為主的花青素[25],體外降糖試驗結(jié)果表明,嘉寶果根、莖、葉、果皮與種子醇提取物均能有效抑制α葡萄糖苷酶活性,其抑制作用遠超阿卡波糖[26]。Dragano等[27]研究發(fā)現(xiàn),在高脂飼養(yǎng)誘導(dǎo)的高血脂小鼠飼料中添加1%、2%、4%的嘉寶果果皮凍干粉可以提高肝臟以及脂肪組織對胰島素的敏感性,并在分子水平上發(fā)現(xiàn)攝入嘉寶果果皮的小鼠和模型小鼠相比,肝臟和脂肪組織中胰島素相關(guān)信號通路IR/IRS1/Akt/FoxO信號轉(zhuǎn)導(dǎo)更為活躍,進一步證實嘉寶果果皮改善胰島素抵抗。Lenquiste等[28]研究結(jié)果也表明,在高血脂小鼠高脂飼料中添加嘉寶果果皮后可減少胰島素抵抗達50%以上。

    糖尿病腎病是由糖尿病引起的腎臟損傷,是糖尿病最常見的并發(fā)癥之一,也是導(dǎo)致末期腎衰竭的最主要原因。PI3K/AKT信號通路是糖尿病腎病炎癥機制中一條重要的信號通路,與系膜基質(zhì)增生、基底膜增厚及腎小管上皮細胞轉(zhuǎn)分化等過程密切相關(guān)[29]。Wu等[30]研究發(fā)現(xiàn),嘉寶果果皮提取物可劑量依賴性的抑制高血糖誘導(dǎo)的腎小球系膜細胞增殖,改善腎小球系膜增生,減少細胞外基質(zhì)在腎小球系膜的沉積,減緩腎小球萎縮、硬化進程并通過免疫組化分析方法檢測腎臟組織中Ras信號通路相關(guān)蛋白的表達情況,證實嘉寶果果皮提取物可通過抑制Ras/PI3K/Akt信號通路達到緩解糖尿病腎病的作用。

    3 抗肥胖作用

    肥胖癥是一種體內(nèi)脂肪過度蓄積或異常分布的狀態(tài),大量研究證實肥胖增加糖尿病、高血脂及心腦血管病等多種疾病的患病風(fēng)險[31],對肥胖癥的干預(yù)主要從降脂減重方面著手。哺乳動物的脂肪組織包括白色脂肪組織和棕色脂肪組織,而兩者的生理功能卻完全相反。棕色脂肪組織在解鏈蛋白1(UCP1)的參與下消耗機體能量產(chǎn)熱以適應(yīng)寒冷的環(huán)境,與預(yù)防肥胖相關(guān)[32]。白色脂肪組織是能量倉庫,可將多余的能量以脂肪的形式儲藏起來,是促進體質(zhì)量增加的重要原因,與肥胖的發(fā)生有著密切的關(guān)系[33]。

    嘉寶果果皮可通過減少自噬蛋白Beclin1和LC3BII的表達,增加選擇性自噬接頭蛋白SQSTMp62的表達,調(diào)節(jié)小鼠附睪和腹股溝部位白色脂肪組織細胞自噬標(biāo)志,達到抑制白色脂肪組織肥大、降低體重的效果;此外,嘉寶果果皮還可以增加短鏈脂肪酸合成,降低血清甘油三酯含量、體脂率以及減少肝臟脂肪堆積,從而縮小肝臟脂肪變性區(qū)域并下調(diào)附睪白色脂肪組織促炎因子IL6、IL1β和TNF 的表達[34-35]。而在脂肪組織中促炎因子的過表達可引起慢性低度炎癥反應(yīng),導(dǎo)致脂肪組織肥大、免疫細胞浸潤、血管生成和細胞外間質(zhì)增生,誘發(fā)胰島素抵抗,促進肥胖的發(fā)生發(fā)展[36]。據(jù)報道,攝入嘉寶果果皮凍干粉可以降低高血脂大鼠血漿中的總膽固醇(TCL)含量達32%,同時降低甘油三酯含量達50%,而嘉寶果果皮具有降血脂作用可能與其抑制胰脂肪酶的活性相關(guān)[21]。

    4 抗菌活性

    嘉寶果的果實和葉子提取物均能夠有效抑制包括革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌在內(nèi)的多種細菌,嘉寶果葉子提取物的抑菌率為64%,果實提取物的抑菌率為79%[37]。嘉寶果葉片80%乙醇提取物能有效抑制從牙菌斑上分離的鏈脲菌屬細菌,分別為變形鏈球菌、遠緣鏈球菌和血鏈球菌,原濃度提取液及提取液稀釋至1∶2、1∶4時對以上3種菌的抑菌圈直徑為12~16 mm[38]。Hacke等[39]采用瓊脂擴散的方法檢測了嘉寶果種子40%丙酮提取物對包括大腸桿菌、綠膿桿菌和金黃色葡萄球菌等8種細菌的抑制活性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)嘉寶果種子提取物能有效抑制綠膿桿菌、蠟狀芽孢桿菌、單核細胞增多性李斯特氏菌、鼠傷寒沙門菌以及金黃色葡萄球菌,抑菌圈直徑范圍5~20 mm,而對其余3種試驗涉及的細菌則沒有明顯抑制作用。在慢性創(chuàng)面上常伴隨嚴重感染,有多種需氧菌和厭氧菌繁殖,形成多聚糖蛋白質(zhì)復(fù)合物的生物膜,成為細菌的保護膜,從而加重感染、延緩愈合[40]。Machado 等[41]檢測了嘉寶果果皮4種不同溶劑(水、乙醇、甲醇、丙酮)提取物對慢性創(chuàng)面上常見細菌(金黃色葡萄球菌、綠膿桿菌、單核細胞增多性李斯特氏菌)的抑制作用,結(jié)果發(fā)現(xiàn)水提取物對以上細菌沒有抑制作用,而乙醇、甲醇、丙酮提取物均能有效抑制以上細菌。嘉寶果葉片及莖的外皮提取液能有效抑制念珠菌屬常見致病真菌如白色念珠菌、吉利蒙念珠菌及克魯斯假絲酵母菌生長[42]。

    5 抗炎活性

    炎性反應(yīng)是人體重要的生理病理過程,與許多疾病的發(fā)生發(fā)展有重要的關(guān)系。研究表明,外周血中COX2高表達可造成胰島的炎性浸潤,胰島β細胞受損,觸發(fā)胰島素抵抗和胰島功能減退;PPARγ作為一個免疫反應(yīng)與細胞增殖的調(diào)節(jié)劑,可調(diào)節(jié)炎癥基因的表達,抑制單核-巨噬細胞活化,減輕炎性細胞浸潤,減少炎性因子釋放而發(fā)揮強大的抗炎作用[43-44]。相關(guān)研究表明,添加不同劑量(2.9、5.8 g·kg-1)的嘉寶果果皮提取物到高脂飼料中喂養(yǎng)小鼠60 d后,嘉寶果果皮提取液能夠通過降低炎癥相關(guān)因子COX2的水平,提高抗炎因子PPARγ含量,減輕體內(nèi)炎癥反應(yīng);其次,嘉寶果果皮提取物能夠有效抑制小鼠體重增長,調(diào)節(jié)血脂紊亂,降低空腹血糖,上調(diào)胰島素受體底物1(IRS1)的磷酸化水平緩解胰島素抵抗[45-46]。嘉寶果果實提取物也能通過下調(diào)其他與炎癥相關(guān)的因子如ICAM1、VCAM1、MCP1、CSF1等因子的表達水平發(fā)揮對伴有腎炎的糖尿病小鼠的抗炎作用[22]。嘉寶果果皮乙醇提取物可以促進人為創(chuàng)傷造成的大鼠頸背部皮膚慢性創(chuàng)傷傷口愈合,減輕炎癥反應(yīng),減少炎性滲出,具有良好的抗炎效果[41]。

    6 舒張血管作用

    調(diào)節(jié)血管張力是治療高血壓的一個重要手段。據(jù)報道,多種藥用植物能通過作用于血管內(nèi)皮達到舒張血管、降低血壓的目的[47]。Andrade等[48]研究了嘉寶果果皮提取物對大鼠離體動脈血管張力的影響以及靜脈灌注該提取物后大鼠血流量及心率的影響,結(jié)果表明嘉寶果果皮提取物靜脈灌注后,大鼠血流量以及心率沒有明顯變化,但提取物對離體動脈具有舒張作用且該作用可被環(huán)氧化酶(COX)抑制劑、腺苷酸環(huán)化酶(AC)抑制劑、鳥苷酸環(huán)化酶(sGC)抑制劑和NO合酶抑制劑所減弱,而阿托品和普萘洛爾則對果皮提取物的血管舒張作用沒有影響,推測嘉寶果果皮舒張血管作用是通過血管內(nèi)皮細胞中的NO/sGC/cGMP信號通路實現(xiàn)。Souza等[12]也研究了嘉寶果去籽果實提取物對高血壓模型大鼠離體動脈的作用,結(jié)果表明連續(xù)每日灌胃給藥(100、300 mg·kg-1)4周后,嘉寶果果實提取物能提高高血壓大鼠離體動脈對血管依賴性和非血管依賴性血管擴張劑如乙酰膽堿和硝普鈉的敏感性;其次,嘉寶果提取物處理組能夠顯著降低血管收縮壓并能緩解高血壓引起的代償性心率加快,改善高血壓大鼠的心臟及腎臟肥大,表現(xiàn)出良好的心血管疾病改善作用。血管的收縮與舒張最終是通過血管平滑肌細胞中K+、Ca2+濃度變化來實現(xiàn)。Andrade等[49]研究發(fā)現(xiàn),嘉寶果果實提取物預(yù)處理過的大鼠離體動脈,再用血管收縮劑去氧腎上腺素處理,離體動脈血管不再收縮;該提取物對大鼠離體血管的舒張作用可被鉀離子通道阻滯劑阻斷,但不受肌漿網(wǎng)Ca2+ATP酶抑制劑的影響,說明嘉寶果果實提取物可以通過激活K+通道、促進K+外流,誘導(dǎo)內(nèi)皮依賴性血管舒張。此外,嘉寶果果實釀制而成的飲料也具有抗氧化和血管舒張活性[50]。

    7 抗細胞增殖作用

    生存素Survivin是凋亡抑制蛋白家族中的成員,能抑制細胞凋亡,促進細胞增殖,調(diào)節(jié)細胞有絲分裂。抑制生存素表達能顯著促進腫瘤細胞凋亡,成為腫瘤治療的新靶點[51]。嘉寶果種子水提取物呈劑量依賴性的抑制人口腔鱗癌細胞HSC3增殖,IC50約為15 μg·mL-1,對HSC細胞的增殖作用高于嘉寶果種子醇提取物、果皮醇提取物及莖醇提取物;流式細胞術(shù)及蛋白免疫印跡試驗結(jié)果表明,嘉寶果種子水提取物能下調(diào)生存素表達量,增加促凋亡相關(guān)蛋白(Bid)活化,從而抑制HSC3細胞增殖[52]。 Leiteegatti等[53]采用MTT比色法測定嘉寶果果皮極性提取物(乙醇提取物)和非極性提取物(二氯甲烷提取物)的細胞毒性發(fā)現(xiàn),果皮非極性提取物能有效抑制人前列腺癌細胞PC3增殖(GI50=13.8 μg·mL-1),果皮極性提取物對人髓性白血病細胞K562的增殖有顯著抑制作用(GI50=1.9 μg·mL-1),但極性和非極性兩種提取物對結(jié)腸癌細胞HT29抑制作用均不明顯,半數(shù) 抑 制濃度分別為144.0 μg·mL-1和180.9 μg·mL-1。而從嘉寶果果實提取物中分離純化的得到的縮酚酸卻能有效抑制結(jié)腸癌細胞HT29(IC50=65 μmol·L-1)和HCT116(IC50=30 μmol·L-1)的增殖[54]。

    8 其他作用

    Silva等[55]通過小鼠骨髓微核試驗以及彗星試驗證實,在該試驗條件下,嘉寶果種子提取物不僅沒有遺傳毒性,還具有保護DNA及加快DNA損傷修復(fù)的功能。嘉寶果果皮制成茶制品后,茶水中富含花青素、沒食子酸和蘆丁等多酚類化合物,可作為一味傳統(tǒng)中藥用于治療哮喘、咽炎、痢疾和丹毒等疾病[1,56]。在大鼠懸尾試驗中,果實水提取物(400、800 mg·kg-1, p.o.)和氟西?。?2 mg·kg-1, i.p.)均能夠顯著減少大鼠懸尾不動時間,推測與嘉寶果抗抑郁活性相關(guān)[57]。

    9 結(jié)語與展望

    近幾年來國內(nèi)對嘉寶果的研究多數(shù)是關(guān)于栽培技術(shù)以及觀察引種表現(xiàn),探索合適的嘉寶果種植條件以及快速繁殖的方法。國外雖然對嘉寶果多酚類化合物成分、有效成分提取和抗氧化、抗糖尿病及肥胖癥等功效進行了廣泛的研究,但仍存在以下問題,首先是研究對象集中在嘉寶果果實或者果皮上,而對嘉寶果的其他部位如根、莖、葉等部位研究較少;其次是在嘉寶果果實前處理方面,對嘉寶果果實或者果皮的處理方式多數(shù)是制成凍干粉直接添加或者簡單采用溶劑提取獲得總提取物,少有其他應(yīng)用形式;最后是對嘉寶果的功效評價方面,鑒于嘉寶果富含多酚類物質(zhì),因而對嘉寶果抗氧化和抗糖尿病等方面的功效進行了較為大量的研究,研究內(nèi)容較為相似和局限,研究手段主要是體外物理化學(xué)試驗和動物病理模型試驗,對嘉寶果有效成分的體內(nèi)穩(wěn)定性及生物利用度的研究較為缺乏。建議今后一方面繼續(xù)深入地研究嘉寶果的藥理學(xué)功效,將物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機制以及臨床研究有效結(jié)合,另一方面開展嘉寶果的藥動學(xué)研究,摸索嘉寶果適當(dāng)?shù)睦眯问剑岣呱镉行?,為研發(fā)具有保健作用的食品或具有治療作用的藥物提供更多的科學(xué)依據(jù)。

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    (責(zé)任編輯:柯文輝)

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