牛結(jié)核病診斷方法與防治

摘要：該文重點(diǎn)講述了牛結(jié)核病的診斷方法與防治，希望能促進(jìn)牛羊養(yǎng)殖的產(chǎn)業(yè)發(fā)展，減少養(yǎng)殖損失，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

關(guān)鍵詞：牛結(jié)核病;牛型結(jié)核分枝桿菌;診斷方法;防治

中圖分類號：S858.23 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2019.16.096

0 引言

牛結(jié)核病（Bovine Tuberculosis）是一種能在人畜間進(jìn)行傳播的傳染病，由牛型結(jié)核分枝桿菌（Mycobacteriumbovis）引起，世界衛(wèi)生組織將其列為B類疫病，在國內(nèi)被列為二類疫病。牛型結(jié)核分枝桿菌可在多種環(huán)境下生存并傳播，如空氣、塵埃以及水源等人們?nèi)粘５纳瞽h(huán)境中，牛只發(fā)病后會出現(xiàn)咳嗽、日漸消瘦等癥狀，不僅對牛的健康造成危害，同時，由于該疫病可交叉感染，進(jìn)而危害人類健康，因此，該結(jié)核病為養(yǎng)牛行業(yè)中危害較大的疾病之一，人們對該疫病越發(fā)地重視。

1 臨床癥狀與病理變化

結(jié)核病由結(jié)核分枝桿菌引起，結(jié)核分枝桿菌大小中等，周身不產(chǎn)生芽孢和莢膜，不同類型的結(jié)核桿菌，形態(tài)均有差異，牛型結(jié)核菌著色不均勻，較短粗;人型結(jié)核菌形態(tài)不一，有直的，有彎的，相比牛型結(jié)核菌身形細(xì)長，有些單獨(dú)排列，有些平行排列;禽型結(jié)核菌相對短小，呈多形性。結(jié)核分枝桿菌可主要分為3個型，分別為牛分枝桿菌（牛型）、禽分枝桿菌（禽型）及結(jié)核分枝桿菌（人型），其中牛型致病力最強(qiáng)，尤其是奶牛，最易感染該菌[1]。

牛結(jié)核病的潛伏期少則幾十天，多則至幾月，甚者長達(dá)數(shù)年，潛伏時間長短不一。牛結(jié)核病主要在動物淋巴結(jié)處形成病灶，常見于肺門淋巴結(jié)、縱隔淋巴結(jié)，形狀為突起的結(jié)節(jié)，呈現(xiàn)鈣化的現(xiàn)象，有的呈現(xiàn)空洞的形狀。結(jié)核在不同地方時呈現(xiàn)不同的形狀，腸結(jié)核多會出現(xiàn)大小不一樣的結(jié)節(jié)和呈堤狀的潰瘍在小腸或盲腸上;當(dāng)肺結(jié)核時，肺部病變，會出現(xiàn)粟粒性病體。牛結(jié)核病沒有地域和季節(jié)限制，一年四季均有發(fā)生的可能性，過度勞役，飼養(yǎng)環(huán)境不潔均有可能導(dǎo)致該疫病的發(fā)生。

2 診斷技術(shù)

牛結(jié)核病沒有明顯的癥狀，難以簡單地通過觀察判斷牛是否感染疫病，目前國內(nèi)外大多采用以下3種方法診斷牛結(jié)核?。杭?xì)菌學(xué)檢查法、采用分子生物學(xué)方法、免疫學(xué)方法。

2.1細(xì)菌學(xué)檢查法

細(xì)菌學(xué)檢查法是比較傳統(tǒng)的診斷方法，這種方法有利于確定開放性結(jié)核病。診斷前，需對病料進(jìn)行以下處理：向病牛的痰液中加入2倍安替佛尼液，放置溫箱中，1～2h后進(jìn)行遠(yuǎn)心沉淀，再將痰液用濃度為3%醋酸溶液中和沉淀物，用蒸餾水洗滌幾次;向病牛氣管內(nèi)的黏液加入2倍濃度為6%的硫酸溶液后沉淀約20min，再加入少量濃度為3%的苛性鈉溶液進(jìn)行中和;取病牛的糞便30g，加入安替佛尼液15mL和蒸餾水55mL，放置2～3h后再進(jìn)行遠(yuǎn)心沉淀30min，向沉淀物中加10mL點(diǎn)眼反應(yīng)。上述病料處理完畢后，用棉拭蘸取任意病料進(jìn)行細(xì)菌檢查。細(xì)菌學(xué)檢查法耗時長，工序多，檢測率低目前已逐步被先進(jìn)的檢測方法取代[2]。

2.2分子生物學(xué)方法

分子生物學(xué)的發(fā)展也影響牛結(jié)核病的診斷，迄今為止，國內(nèi)外研究人員越來越多地用分子生物學(xué)原理對牛結(jié)核病進(jìn)行診斷，目前分子生物學(xué)診斷方法有如下3種方法。

2.2.1DNA探針檢測

DNA探針檢測可以快速檢測出牛結(jié)核病的病原菌，也可檢測出其菌株。只需要檢測樣品DNA中已經(jīng)標(biāo)記好的基因序列，將取得的病牛的樣品DNA與已知的標(biāo)記好的DNA片段探針進(jìn)行分子雜交。

2.2.2PCR檢測

PCR檢測是近年應(yīng)用較為廣泛的檢測方法，研發(fā)人員利用牛分枝桿菌的pnca基因序列形成特定引物，擴(kuò)展出較長的目的片段，提高PCR檢測的變異性，這種方法檢測快且檢測正確率高，但對儀器的要求高，對檢測人員的技術(shù)要求更高，目前的檢測制度尚未標(biāo)準(zhǔn)化規(guī)范化，對檢測結(jié)果的可靠性有一定影響[3]。

2.3免疫學(xué)方法

2.3.1結(jié)核菌素試驗(yàn)

結(jié)核菌素試驗(yàn)是目前應(yīng)用最為廣泛的檢驗(yàn)方法，尚未有可以替代的診斷方法，大多數(shù)研發(fā)人員常用的為純化蛋白質(zhì)衍生物，又稱PPD皮內(nèi)試驗(yàn)。該試驗(yàn)方法的優(yōu)缺點(diǎn)非常明顯，優(yōu)點(diǎn)是檢測率高，不足的地方是對試驗(yàn)的影響因素多，物理性的化學(xué)性的都有，尤其是結(jié)核菌素的使用量、質(zhì)量等都會對試驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響。

2.3.2間接酶聯(lián)免疫吸附法

測定抗體最常用的方法是間接酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)，這是一種酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）方法，其原理是利用相應(yīng)抗原形成抗體反應(yīng)的技術(shù)，屬非競爭結(jié)合試驗(yàn)。該試驗(yàn)方法已經(jīng)廣泛用于檢測牛結(jié)核病，操作簡單快捷是其優(yōu)勢，但使用該方法時，原本就抗原性較弱的病原菌在共同的抗原決定簇作用下，會對試驗(yàn)的結(jié)果產(chǎn)生影響，檢測準(zhǔn)確率受到影響[4]。

3 防治

3.1預(yù)防措施

要從根源上減少牛結(jié)核病的傳播，養(yǎng)殖人員應(yīng)提前做好預(yù)防措施，以防疫病感染至牛群。養(yǎng)殖人員應(yīng)對牛羊進(jìn)行定期疫苗注射，并定期對牛羊舍進(jìn)行消毒。只有先做好預(yù)防工作，才能從源頭上減少細(xì)菌的傳播，降低牛羊感染疾病的概率。

養(yǎng)殖戶應(yīng)定期對牛群進(jìn)行檢查，至少于每年春秋進(jìn)行一次檢疫。對疑似感染牛群，先進(jìn)行隔離觀察，再對牛群進(jìn)行診斷后再將健康牛群人群，對感染牛群及時撲殺，并嚴(yán)格按照國家要求進(jìn)行處理。因牛結(jié)核病能在牛與人之間進(jìn)行交互感染，除對牛群進(jìn)行檢查外，也應(yīng)對飼養(yǎng)人員定期檢查，確診為結(jié)核的病人不能再飼養(yǎng)牛群。養(yǎng)殖戶還需保持牛舍整潔干凈，至少應(yīng)于每季度對牛舍進(jìn)行消毒，嚴(yán)格執(zhí)行防疫制度，防止細(xì)菌對環(huán)境造成感染。

3.2藥物治療

按照獸醫(yī)治療要求，及時給牛群服用異煙肼、慶大霉素、利福平等具有較強(qiáng)殺菌性的藥物，殺菌藥物副作用小，并不會對牛群健康造成影響。

3.3組織措施

政府應(yīng)認(rèn)真組織宣傳防疫的重要性，嚴(yán)格要求養(yǎng)殖戶按照規(guī)定實(shí)時對疫病進(jìn)行監(jiān)測、檢疫并在政策允許的情況下對養(yǎng)殖戶防疫產(chǎn)生的費(fèi)用進(jìn)行補(bǔ)助，這樣有利于養(yǎng)殖戶積極參與防疫的行動中。

3.4科研力度

目前對牛結(jié)核病的診斷方法有很多種，但尚沒有一種可以在基層養(yǎng)殖戶中大力推廣的有效方法，且沒有研發(fā)卅有效的預(yù)防疫苗，使養(yǎng)殖戶的產(chǎn)業(yè)受到一定的限制。因此，各方研發(fā)人員應(yīng)大力推進(jìn)研發(fā)力度，爭取早日研發(fā)出可以提高診斷的技術(shù)及有效的預(yù)防疫苗。

4 結(jié)束語

對牛結(jié)核病的診斷及防治方法的研究對養(yǎng)殖業(yè)有積極的影響，各方應(yīng)排除一切干擾，提高對牛結(jié)核病的診斷研發(fā)，促進(jìn)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展。

參考文獻(xiàn)

[1]鄭群，何述輝.淺談牛結(jié)核病診斷方法研究進(jìn)展[J].獸醫(yī)導(dǎo)刊，2015（12）：72-73.

[2]張松柏，邱美珍，周望平.牛結(jié)核病診斷方法研究進(jìn)展[J].中國奶牛，2010（1）：13-14.

[3]王金果，劉愛林，周向梅.牛結(jié)核病診斷方法的研究進(jìn)展[J].中國畜牧獸醫(yī)，2010，37（7）：194-198.

[4]付建，王敏蘭，溫榮輝.牛結(jié)核病研究進(jìn)展[J].畜牧與飼料科學(xué)，2007（12）：117-119.

作者簡介：任利強(qiáng)（1987-），男，河北承德人，本科，獸醫(yī)師，研究方向：動物疫病診斷與實(shí)驗(yàn)室檢測。