芹菜素對雌性小鼠性激素的劑量效應(yīng)研究

龍昌權(quán)　劉倩　楊琴　羅斌　楊綱

【摘? 要】初步研究劑量濃度不同的芹菜素對雌性小鼠性激素中雌二醇含量的影響，對進一步發(fā)掘其劑量效應(yīng)提供一定的實驗科學依據(jù)。將48只4～6周齡的雌性小鼠分為4組，即低、中、高劑量組以及空白對照組，每組12只，對照組給予0.01ml/g生理鹽水灌胃，實驗組給予0.01 ml/g 不同劑量（低劑量組252mg/L，中劑量組504mg/L，高劑量組1008mg/L）的芹菜素懸濁液進行灌胃。實驗人員通過連續(xù)分批的7d、14d、21d進行芹菜素以及生理鹽水灌胃后將小鼠分批次處死進行眥靜脈叢取血。采用ELISA檢測試劑盒進行血清中雌二醇（Estradiol，E2）的測定。將獲取數(shù)據(jù)錄入SPSS17.0軟件，利用x±s多組間比較采用方差齊性檢驗和單因素方差分析;檢驗水平α= 0.05。結(jié)果為P<0.05，再經(jīng)過圖表分析可知，芹菜素對雌二醇的分泌有促進作用，成正相關(guān)關(guān)系。

【關(guān)鍵詞】芹菜素;雌性小鼠;雌二醇;性激素

【中圖分類號】R249???? 【文獻標識碼】A?? ????【文章編號】1004-7484（2019）10-0026-02

Dose Effect of Apigenin on Sex Hormones in Female Mice

LONG Chang-quan LIU-Qian YANG-Qin LUO-Bin TAN-Yi Yang-Gang*

college of basic medical sciences， changsha medical university，Hunan Changsha410219，China

Abstract：Preliminary study on the effect of apigenin with different dose concentration on estradiol content in female mice sex hormones provides certain experimental scientific basis for further exploring its dose effect. Forty-eight 4-to 6-week-old female mice were divided into 4 groups， i.e. low， medium， high dose group and blank control group， with 12 mice in each group. the control group was given 0.01ml/g normal saline and the experimental group was given 0.01 ml/g apigenin suspension of different doses （252mg/L in low dose group， 504mg/L in medium dose group and 1008mg/L in high dose group） for gastric perfusion. The researchers administered apigenin and normal saline to mice for 7 days， 14 days and 21 days， and then executed the mice in batches to collect blood from canthus venous plexus. Estradiol （E2） in serum was determined by ELISA kit. The acquired data were entered into SPSS17.0 software， and the homogeneity of variance test and one-way analysis of variance were used for comparison among groups. Test level α= 0.05. The result was p < 0.05， and the chart analysis showed that apigenin had a positive correlation with estradiol secretion.

Key words：apigenin;female mice;estradiol;sex hormone

芹菜素，又名芹黃素，是地中海沼澤區(qū)域馴化而來的一種半天然生成素，它的蛋白成分遠遠高于栽培的芹菜[1]。經(jīng)研究，芹菜素有抑制癌細胞活性生長的功能，且能作為抗HIV和其他抗病毒藥物，還具有抗炎癥、老化、帕金森綜合征，活性血管等作用[2]。

目前，據(jù)以往的研究資料來看，有關(guān)于芹菜素對生殖系統(tǒng)作用的研究資料較少，而近年來科學研究參與了對女性雌激素分泌的調(diào)節(jié)作用的研究。Zand RS等研究了72種黃酮類化合物及其結(jié)構(gòu)相似的化合物，發(fā)現(xiàn)芹菜素具有較強的孕前激素樣活性[3]。芹菜素單獨作為用藥價值時體現(xiàn)出雌激素的性質(zhì)，但是它與其它化學物質(zhì)如乙炔共同用藥時，表現(xiàn)出抗雌激素分泌的性質(zhì)[4]。田原等推測芹菜素對雌二醇及孕酮分泌的抑制是通過抑制芳香化酶的活性實現(xiàn)的，并且有一定的量效關(guān)系[5]。936mg/kg.bwAP降低大鼠精子質(zhì)量，降低精子運動速度，升高精子畸形率，損傷睪丸組織結(jié)構(gòu)和精子尾部線粒體超微結(jié)構(gòu)。AP可引起血清性激素水平變化[7]。芹菜素能夠明顯干擾雌性大鼠的生殖內(nèi)分泌， 縮短其性周期[11]。本研究進行體內(nèi)實驗，通過對發(fā)情期大鼠進行分組，分別用不同濃度的芹菜素進行處理，再檢測血清中雌二醇含量變化，研究其劑量效應(yīng)。不同濃度的芹菜素和血清中雌二醇之間的相關(guān)性。為臨床上女性不孕不育的治療提供新方向。同時以期能夠進一步發(fā)掘芹菜素的藥用價值。

1 材料和方法

1.1? 實驗動物：成年6-8周齡的雌性小鼠48只，體重（平均30.19g）g，周齡6～8周（長沙市天勤生物科技有限公司）。

每天定時給予對照組0.01ml/g生理鹽水灌胃，，實驗組給予0.01 ml/g 不同劑量（低劑量組252mg/L，中劑量組504mg/L，高劑量組1008mg/L）的芹菜素混懸液灌胃。實驗人員通過連續(xù)分批的7d、14d、21d進行芹菜素以及生理鹽水灌胃后將小鼠分批次處死進行眥靜脈叢取血。采用ELISA檢測試劑盒進行血清中雌二醇（Estradiol，E2）的測定。

1.2儀器與材料：JA3003N電子秤（上海精密科學儀器有限公司）;三用恒溫水浴箱（上海精宏實驗設(shè)備有限公司）。芹菜素購于西安玉泉生物科技有限公司，純度為98%，灌胃之前用蒸餾水配置成最高濃度混懸液并進行同比稀釋成濃度混懸液。ELISA檢測血清中雌二醇（Estradiol，E2）試劑盒（武漢純度生物有限公司）。

1.3分組與方法：將48只6-8周齡的雌性小鼠分為4組：空白對照組（生理鹽水），低劑量組，中劑量組和高劑量組，每組各12只。動物飼養(yǎng)在長沙醫(yī)學院動物中心實驗室的二級實驗室內(nèi)。每天定時給予對照組0.01ml/g生理鹽水灌胃，，實驗組給予0.01 ml/g 不同劑量（低劑量組252mg/L，中劑量組504mg/L，高劑量組1008mg/L）的芹菜素懸濁液灌胃。實驗人員通過連續(xù)分批的7d、14d、21d進行芹菜素以及生理鹽水灌胃后將小鼠分批次處死進行眥靜脈叢取血，所取血液放入離心管采用差速離心機（3000rpm，5～6min），靜置分層，取上清液采用ELISA檢測試劑盒進行血清中雌二醇（Estradiol，E2）的測定。

1.4統(tǒng)計學處理：將獲取數(shù)據(jù)錄入SPSS17.0軟件，利用x±s多組間比較采用方差齊性檢驗和單因素方差分析，檢驗水平α= 0.05。

2實驗結(jié)果

3討論

本實驗我們應(yīng)用形態(tài)學、統(tǒng)計學、分子生物學等技術(shù)全方面檢測不同濃度的芹菜素處理下，發(fā)情期雌性小鼠血清中雌二醇的變化，乳腺導(dǎo)管發(fā)育是否增生，觀察子宮內(nèi)膜的變化。旨在初步探索芹菜素對雌性小鼠血清中雌二醇的劑量效應(yīng)，進一步發(fā)掘其劑量效應(yīng)。國內(nèi)外芹菜素對小鼠性激素影響的研究不多。本研究針對芹菜素一方面具有雌激素樣作用，另一方面又具有拮抗雌激素作用，檢測不同濃度的芹菜素對雌性大鼠血清雌二醇含量的影響，來研究芹菜素對雌性小鼠性激素的影響。通過對發(fā)情期雌性小鼠灌胃已提純的芹菜素來建立動物模型，通過采用ELISA檢測試劑盒進行血清中雌二醇的含量，為臨床上女性不孕不育的治療提供新的方向。

實驗結(jié)果表明， 芹菜素對雌二醇的分泌有促進作用，成正相關(guān)關(guān)系。Shivayogi P.等研究發(fā)現(xiàn)芹菜素對雌性大鼠有雌激素和抗雌激素的作用，本次實驗結(jié)果表明雌性小鼠與芹菜素濃度呈正相關(guān)。

參考文獻

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通訊作者：楊綱，職稱：講師;

論文為校級課題論文，項目編號：長醫(yī)教〔2019〕61號-131