中藥制劑“婦科洗”體外抑菌作用及臨床效果觀察

吳敏 王瑩 龐芹

（廣西柳州市中醫(yī)醫(yī)院1醫(yī)務(wù)部 2藥學部 3婦科 廣西 柳州 545001）

近年來，隨著抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，使耐藥細菌不斷增加，其耐藥性也隨之增強，導致感染性疾病例數(shù)增多，嚴重威脅到人類的生命健康，許多天然藥物具有抗病、低毒、不易產(chǎn)生耐藥性等特點與優(yōu)勢［1］，開展中藥抗菌的應(yīng)用和研究，對于細菌性疾病的防治具有重要意義［2］。婦科洗是我院根據(jù)臨床驗方研制的中藥制劑，主要由苦參、苦樹皮、千里光、銀花藤、魚腥草、野菊花、關(guān)黃柏、蛇床子等中藥組成。霉菌性陰道炎是一種常見的婦科疾病，又稱外陰陰道念珠菌病（VVC），是由白色念珠菌引起的陰道炎癥。3/4的婦女一生中至少患1次VVC［3］。霉菌性陰道炎以陰道分泌物增多、分泌物腥臭、外陰陰道瘙癢、紅腫熱痛、性交痛等癥狀困擾患者[4]。近年來隨著感染因素增多，該病發(fā)病率呈明顯上升趨勢。2016 年6 月－2017年12月，在柳州市中醫(yī)醫(yī)院婦科，根據(jù)隨機對照原則，采用婦科洗、婦科洗1：1稀釋兩個濃度（生產(chǎn)批號：20130518）治療RVVC 感染引起的陰道炎60例，并以硝呋太爾制霉素軟膠囊作為對照，進行組間比較，取得滿意療效。

1.體外抑菌試驗

1.1 實驗材料

1.1.1 受試菌株 標準菌：金黃色葡萄球菌（ATCC25923）、大腸埃希菌（ATCC25922）、白色念珠菌，由廣西柳州市中醫(yī)醫(yī)院微生物室分離鑒定。

1.1.2 藥物與試劑 婦科洗制劑（柳州市中醫(yī)醫(yī)院制劑室，批準文號：桂藥制字Z02060095，批號：20160811）；氯化三苯四氮唑（triphenyltetrazoliumchloride，TTC，中國華東師范大學化工廠，批號：20101026）；無水乙醇（成都市科龍化工試劑廠，批號：2016042801）；氯化鈉注射液（浙江國鏡藥業(yè)有限公司，批號：C116080303）；沙氏葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號：3104864）；沙氏葡萄糖液體培養(yǎng)基（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號：3104833）；營養(yǎng)瓊脂（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號：3103446）；營養(yǎng)肉湯（廣東環(huán)凱微生物科技有限公司，批號：3103278）。

1.1.3 實驗儀器 DH64型電熱恒溫干燥箱（上海市躍進醫(yī)療器械一廠），DNP-9162BS-Ⅲ型電熱恒溫培養(yǎng)箱（上海市新苗醫(yī)療器械有限公司），MJX-100B-2型霉菌培養(yǎng)箱（上海博迅實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠），JA5003N電子天平（上海精密科學儀器有限公司）

1.2 實驗方法與結(jié)果

1.2.1 藥物的配制 取婦科洗1瓶（344mg/ml），文火濃縮至86mL，此時得到藥液濃度為1000mg/mL，對藥液進行滅菌備用。在無菌條件下，將婦科洗藥液用孔徑0.22um無菌濾頭過濾除菌，用生理鹽水按照倍比稀釋法將藥液稀釋成 1000mg/ml、500mg/ml、250mg/ml、125mg/ml、62.5mg/ml、31.25mg/ml、15.625mg/ml、7.813mg/ml、3.906mg/ml、1.953mg/ml的濃度梯度。

1.3 結(jié)果

1.3.1 抑菌圈測定結(jié)果 婦科洗水提液對白色念珠菌的抑制活性最大，屬于極敏感，對金黃色葡萄球菌抑制活性較弱，抑菌圈直徑在14mm以下，屬于中度敏感。對大腸埃希菌的抑菌能力較差，抑菌圈直徑在10mm以下，小于5mm，見表 1。

表1 1000mg/ml婦科洗水提液對不同菌種的抑菌效果

1.3.2 MIC、MBC的測定結(jié)果 實驗結(jié)果顯示，婦科洗對金黃色葡萄球菌的MIC為500mg/ml，MBC＞500 mg/ml；對大腸埃希菌的MIC為1000mg/ml，MBC＞1000mg/ml；對白色念珠菌的MIC為31.25mg/ml，MBC31.25mg/ml。婦科洗對白色念珠菌的MIC和MBC均為31.25mg/ml，沒有出現(xiàn)MIC與MBC分離的情況，表現(xiàn)出較好的抗白色念珠菌活性。見表2。

表2 不同濃度婦科洗對3種病原菌株的最低抑菌、殺菌濃度（mg/mL）

2.臨床效果觀察

2.1 臨床資料

2.1.1 一般資料：60例均為2016年6月－2017年12月在柳州市中醫(yī)醫(yī)院婦科門診中符合納入標準的門診患者。隨機分為兩組：治療組、對照組。治療組40例，分為婦科洗原液組、婦科洗原液按1：1稀釋組，每組20例，平均年齡36.63±10.06 歲，VVC 患者40 例。對照組20 例，單用硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊治療，平均年齡34.49±8.94歲，VVC 患者20例。兩組患者在年齡、感染菌群情況方面比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

2.1.2 診斷標準：參照2015年美國CDC《關(guān)于陰道炎癥的診治規(guī)范》[5]的診斷標準。VVC 符合以下兩項中的任意一項：①陰道分泌物濕片或革蘭染色可見酵母菌、菌絲或假菌絲；②培養(yǎng)或其他方法證實酵母菌陽性。

2.1.3 納入標準：①年齡在18～50 歲之間的婦女；②主訴分泌物增多，有異味或伴外陰瘙癢或灼痛；③經(jīng)臨床和實驗室檢查符合外陰或陰道炎診斷標準；④無嚴重全身性或慢性疾??；⑤了解本研究目的并簽署知情同意書。

2.1.4 排除標準：①處于妊娠期或者哺乳期；②處于月經(jīng)期的婦女；③10 天內(nèi)月經(jīng)來潮者；④患有糖尿病或者其他嚴重慢性疾病急性發(fā)作期；⑤滴蟲性陰道炎或合并滴蟲性陰道炎；⑥不能隨訪者；⑦支原體、衣原體、淋球菌等性傳播疾病引起的陰道炎癥患者。

2.2 治療方法

2.2.1 對照組：每天睡前用清水洗凈外陰，將硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊1粒放入陰道深處，每日1次，連續(xù)用藥7天，在治療期間禁止性生活。

2.2.2 治療組：每天睡前用清水洗凈外陰，將院內(nèi)制劑婦科洗（苦參15g、苦樹皮15g、千里光10g、銀花藤10g、魚腥草10g、野菊花10g、關(guān)黃柏8g、蛇床子8g。）分為兩個濃度，婦科洗原液、原液按1：1的比例稀釋，陰道沖洗，每日一次。連續(xù)用藥7天，在治療期間禁止性生活。所有患者在治療結(jié)束后3 天內(nèi)進行第1次復查，治療結(jié)束1個月后再進行第2次復查。

2.3 治療結(jié)果

2.3.1 療效標準：參照美國疾病控制和預防中心（CDC）《2015年性傳播疾病治療指南》標準判定，陰道分泌物濕片或革蘭染色無酵母菌、菌絲或假菌絲為VVC 痊愈。

2.3.2 治療結(jié)果：分述如下。

治療組與對照組療效比較：治療組治療陰道炎共40例，婦科洗原液、原液按1：1比例稀釋各20例。納入VVC患者40例，酵母菌、菌絲或假菌絲全部陽性，婦科洗原液組第1次復查痊愈率80.0%；第2次復查，痊愈率70.0%，復發(fā)率12.5%。婦科洗原液1：1稀釋組第1次復查痊愈率60.0%；第2次復查，痊愈率50.0%，復發(fā)率16.7%。對照組治療治療陰道炎20例，第1次復查痊愈率65.0%；第2次復查，痊愈率40.0%，復發(fā)率38.5%，見表3。

表3 三組治療效果比較

3.討論

陰道炎是困擾女性身體健康的主要疾病之一，臨床可選擇的抗菌藥物越來越少，而且存在用藥周期長、肝功能損害、復發(fā)率高等弊端?？咕胁菟幍难芯?，尤其是清熱燥濕中藥已成為近年來該領(lǐng)域的研究熱點。中藥制劑婦科洗，是我院婦科幾代中醫(yī)多年的臨床用藥經(jīng)驗結(jié)合現(xiàn)代工藝研制而成的純中藥外用洗劑，更能有效緩解陰道炎引起的帶下增多，外陰瘙癢、紅腫等癥狀。

本研究體外抑菌試驗結(jié)果表明，婦科洗藥液對白色念珠菌表現(xiàn)出較好的抗菌活性，婦科洗從藥性理論上來看，組方藥材性味苦寒，歸膀胱經(jīng)，與腎相表里，功效抗菌、消炎。臨床效果方面，通過假絲酵母菌轉(zhuǎn)陰、有效率、復發(fā)率等多個觀察指標，婦科洗治療組在陰道沖洗的療效上優(yōu)于硝呋太爾制霉素陰道軟膠囊。

本實驗采用三種常見的菌株進行實驗，菌株存在局限性，對細菌、真菌的抑制作用不全面，另婦科洗藥液為中藥組方，下一步將對抑菌活性成分進行分離純化，明確抑菌的物質(zhì)基礎(chǔ)，擴大中藥的臨床藥效價值，對開發(fā)民間中藥資源的臨床應(yīng)用提供參考。