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    豬細小病毒病、偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗保存期試驗

    2019-09-04 12:17:58梁宛楠陳丕坤
    飼料博覽 2019年8期
    關(guān)鍵詞:狂犬病毒二聯(lián)豚鼠

    梁宛楠,陳丕坤

    (哈藥集團生物疫苗有限公司,哈爾濱 150069)

    豬細小病毒病與偽狂犬病是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的三種重要傳染病,分別是由豬細小病毒(PPV)和偽狂犬病毒(PRV)。目前這兩種傳染病在豬場的發(fā)生率較高,給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。因此,為了預防和控制這些疾病,安全、高效的疫苗是最主要的解決途徑。本研究試制的豬細小病毒病、偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗是一種含有豬細小病毒L株抗原和豬偽狂犬病毒H株抗原的油乳劑滅活疫苗。取試制的3批滅活疫苗,制備后立即置于2~8 ℃冰箱保存,分別于保存后的3、6、9、12 和15 個月,按照現(xiàn)行《中國獸藥典》要求進行疫苗的物理性狀及無菌檢驗;按照擬定的質(zhì)量標準進行疫苗的效力檢驗,來確定疫苗的保存期,為養(yǎng)殖戶可以應(yīng)用到安全、高效的疫苗提供保證。

    1 材料和方法

    1.1 試驗材料

    1.1.1 試制疫苗

    豬細小病毒病、豬偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗,批號:201601、201602和201603。

    1.1.2 試驗動物

    體重>350 g、豬細小病毒HI 抗體效價≤1:8 的豚鼠;體重10~20 kg、豬偽狂犬病毒中和抗體陰性的斷奶仔豬,

    1.2 試驗方法

    1.2.1 疫苗物理性狀檢驗

    按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄的規(guī)定進行滅活疫苗的外觀、劑型、黏度和穩(wěn)定性檢驗,應(yīng)符合要求。

    1.2.2 無菌檢驗

    按現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄的規(guī)定進行檢驗,應(yīng)符合規(guī)定。

    1.2.3 效力檢驗

    按照擬定的《豬細小病毒病、偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗(L株+H株)質(zhì)量標準》(草案)的要求進行疫苗的效力檢驗。每批疫苗抽檢3 瓶,經(jīng)充分混合后,對試驗動物進行免疫。

    豬細小病毒:每批疫苗在保存3、6、9 個月時接種豚鼠5 只,在保存12、15 個月時,接種豚鼠10 只,劑量0.5 mL·只-1,觀察28 d,連同條件相同的對照豚鼠3 只,采血,測定血清中HI 抗體效價。

    豬偽狂犬病毒:每批疫苗在保存3、6、9、12、15個月時,接種10~20 kg、豬偽狂犬病毒血清中和抗體陰性的豬5 頭,劑量3 mL·頭-1,觀察28 d,連同條件相同對照豬3 頭,采血,測定豬偽狂犬病毒血清抗體中和指數(shù)。

    1.2.4 研究指標

    按下述標準判定保存的疫苗是否合格。合格:疫苗物理性狀符合擬定的《豬細小病毒病、偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗(L株+H株)質(zhì)量標準》(草案)的規(guī)定;疫苗無細生長;接種豚鼠的豬細小病毒HI 抗體效價≥1:64,接種豬的血清中和指數(shù)≥316。不合格:達不到上述標準的疫苗判為不合格。

    2 試驗結(jié)果

    2.1 物理性狀檢查結(jié)果

    在疫苗于2~8 ℃保存后的3、6、9、12和15個月,檢查保存疫苗物理性狀,檢驗結(jié)果見表1。

    表1 豬細小病毒病、豬偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗保存期試驗物理性狀檢查結(jié)果

    2.2 無菌檢驗結(jié)果

    在疫苗于2~8 ℃保存后的3、6、9、12和15個月,按照現(xiàn)行《中國獸藥典》附錄進行無菌檢驗,結(jié)果見表2。

    2.3 效力檢驗結(jié)果

    2.3.1 豬細小病毒

    以不同保存時間的疫苗,每批疫苗各取3瓶混合后接種豚鼠5只,肌肉注射0.5 mL·只-1,于注射疫苗后28 d,連同4 只對照豚鼠一起采血進行檢測,血清中豬細小病毒HI 抗體效價測定結(jié)果見表3。

    由表3 可知,疫苗經(jīng)不同時間保存后測定,3批疫苗接種豚鼠后,能引起良好的免疫反應(yīng),HI抗體效價均>1:64。

    表2 豬細小病毒病、豬偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗保存期試驗無菌檢驗結(jié)果

    表3 豬細小病毒血清HI抗體效價測定結(jié)果

    2.3.2 豬偽狂犬病毒

    以不同保存時間的疫苗,每批疫苗各取3瓶混合后接種豬5頭,頸部肌肉注射,3 mL·頭-1,于注苗后28 d,連同對照豬10 頭一起采血,檢測血清中和抗體指數(shù),結(jié)果見表4。

    由表4 可知,疫苗在2~8 ℃條件下、經(jīng)過不同時間保存后測定,3批疫苗接種豬后,均能引起良好的免疫反應(yīng),血清中和抗體指數(shù)均>316。

    4 結(jié) 論

    豬細小病毒病、豬偽狂犬病二聯(lián)滅活疫苗在2~8 ℃保存12個月物理性狀及無菌檢驗均未發(fā)生變化,效力檢驗合格。

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