膽囊腺癌中VEGF和Ki67的表達(dá)及意義

李雙標(biāo) 李勝水 田甜

【摘要】目的：對(duì)VEGF和Ki67在膽囊腺癌中的表達(dá)和意義進(jìn)行分析和討論。方法：對(duì)我院切除膽囊腺的患者進(jìn)行研究，利用SP法研究45例患者VEGF和Ki67在膽囊腺癌中的表達(dá)與臨床關(guān)系。結(jié)果：VEGF在膽囊腺癌中的表達(dá)率為53.3%（24/45），Ki67在膽囊腺癌中的表達(dá)率為60%（27/45）。通過(guò)研究分析可以發(fā)現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)深度使得VEGF和Ki67在膽囊腺癌中呈現(xiàn)正相關(guān)的表達(dá)特點(diǎn)。P<0.05。結(jié)論：對(duì)于膽囊腺癌的轉(zhuǎn)移和浸潤(rùn)，VEGF和Ki67有著重要的影響，其在膽囊腺癌中表達(dá)的越高作用越大，通過(guò)對(duì)VEGF和Ki67進(jìn)行檢測(cè)能夠?qū)δ懩蚁侔┑念A(yù)后進(jìn)行判斷。

【關(guān)鍵詞】膽囊腺癌;VEGF;Ki67

【中圖分類號(hào)】R174+.6 ? ? ?【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A ? ? 【文章編號(hào)】2095-6851（2019）08-045-01

引言

膽囊結(jié)石、膽管異常以及膽囊炎對(duì)于膽囊腺有著重要影響，常無(wú)臨床表現(xiàn)。在膽囊癌組織中，膽囊腺癌是一種比較常見(jiàn)的組織類型，在早期就容易發(fā)生轉(zhuǎn)移，而且預(yù)后較差。本文通過(guò)SP法對(duì)VEGF和Ki67在膽囊腺癌中的表達(dá)和意義進(jìn)行研究和分析。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選取時(shí)間為2012年12月至2018年12月的45例在我院進(jìn)行手術(shù)切除患者的膽囊腺癌病理存檔蠟塊。所有患者都被確診是膽囊腺癌，共有26例男性患者和19例女性患者，所有患者的年齡都小于68歲，大于28歲。在膽囊腺癌中有18例一級(jí)患者，有23例二級(jí)患者，其中共有22例無(wú)漿膜侵犯患者;在所有患者中，在膽囊頸和膽總管周圍淋巴結(jié)發(fā)生轉(zhuǎn)移的患者一共18例，此外還有27例患者在研究時(shí)沒(méi)有發(fā)生膽總管周圍淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移。在根據(jù)腺癌分級(jí)時(shí)，能夠分為兩大組，一組是高分化組，共有32例患者，一組是低分化組，共有13例患者。在進(jìn)行手術(shù)之前，所有的患者都沒(méi)有經(jīng)過(guò)化療、放療、生物治療等，所以在其它方面沒(méi)有明顯差距。在選用抗體時(shí)，即用型鼠抗人Ki67單克隆抗體、，即用型鼠抗人VEGF單克隆抗體、超敏免疫組織化學(xué)SP檢測(cè)試劑以及即用型DAB顯色劑。

1.2 方法

1.2.1 免疫組化染色方法

對(duì)腫瘤細(xì)胞中的抗原進(jìn)行檢測(cè)時(shí)利用的是免疫組織化學(xué)SP方法進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。對(duì)于研究的組織手術(shù)標(biāo)本必須經(jīng)過(guò)離體三十分鐘后再在濃度為10%的福爾馬林緩沖液中進(jìn)行固定，對(duì)于時(shí)間上也有一定的要求，必須要達(dá)到二十四小時(shí)以上，但不能超過(guò)四十八小時(shí)。之后在包埋時(shí)利用石蠟的方式來(lái)進(jìn)行，將切片的厚度保持在4μm，再對(duì)切片進(jìn)行脫蠟、水化處理，之后可以利用抗原修復(fù)法進(jìn)行修復(fù)。所謂的抗原修復(fù)法，主要是指EDTA抗原修復(fù)液需要煮沸，在煮沸時(shí)應(yīng)該采用直接煮沸的方式來(lái)進(jìn)行。一抗室溫下六十分鐘或者在溫度為四度的冰箱中進(jìn)行過(guò)夜處理，DBA顯色、蘇木精復(fù)染、封片。

1.2.2 陽(yáng)性結(jié)果判定

觀察VEGF在細(xì)胞質(zhì)中的表達(dá)時(shí)，主要通過(guò)細(xì)胞質(zhì)的顏色來(lái)判定，一般情況下會(huì)發(fā)現(xiàn)顏色呈現(xiàn)棕黃色或者黃色。在進(jìn)行評(píng)分時(shí)，主要根據(jù)大多數(shù)細(xì)胞呈現(xiàn)的顏色來(lái)進(jìn)行判斷，并且要根據(jù)染色體的強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行評(píng)分：當(dāng)細(xì)胞沒(méi)有著色時(shí)為0分;當(dāng)細(xì)胞的顏色為淡黃色時(shí)為1分;2分對(duì)應(yīng)的是呈現(xiàn)棕黃色的細(xì)胞;如果是呈現(xiàn)棕褐色的細(xì)胞那么就是3分。細(xì)胞顏色越深，評(píng)分結(jié)果越高。之后為了計(jì)算在癌細(xì)胞當(dāng)中陽(yáng)性細(xì)胞的占比，需要在高倍視野下觀察癌細(xì)胞，選取的癌細(xì)胞至少應(yīng)該超過(guò)500個(gè)，并采用隨機(jī)計(jì)數(shù)的方式：0分對(duì)應(yīng)的是癌細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞占比為0～5%的;1分對(duì)應(yīng)的是癌細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞占比為6%～25%的;2分對(duì)應(yīng)的是癌細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞占比為26%～50%的;3分對(duì)應(yīng)的是癌細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞占比為51%～75%的;4分對(duì)應(yīng)的是癌細(xì)胞中陽(yáng)性細(xì)胞占比超過(guò)75%的。將上述兩種得分相加，如果總和小于三分，那么結(jié)果就為陰性;相反的，如果兩個(gè)結(jié)果的總和大于或者等于三分，那么結(jié)果就為陽(yáng)性;Ki67定位于細(xì)胞核，觀察細(xì)胞核的顏色，陽(yáng)性表達(dá)對(duì)應(yīng)的顏色是棕黃色或者黃色。利用高倍視野觀察癌細(xì)胞時(shí)，數(shù)量選取500個(gè)以上，并采用隨機(jī)計(jì)數(shù)的方式進(jìn)行觀察。陽(yáng)性病例的判定結(jié)果應(yīng)該依賴于陽(yáng)性細(xì)胞的比例等于或者超過(guò)百分之十五這一條件。

1.3 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

在膽囊腺癌中，VEGF呈現(xiàn)陽(yáng)性的表達(dá)為53.3%，Ki67呈現(xiàn)陽(yáng)性的表達(dá)為60%，研究的病例分別為24例和27例。

2 結(jié)果

3 討論

根據(jù)上述表格可以發(fā)現(xiàn)，對(duì)于膽囊腺癌患者而言，轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)是引起這種病癥的主要原因。在腫瘤間質(zhì)內(nèi)，新生血管的生成能力是引起惡性腫瘤增殖和復(fù)發(fā)的主要基礎(chǔ)。通過(guò)研究可以發(fā)現(xiàn)，VEGF是腫瘤細(xì)胞分泌的，對(duì)腫瘤血管會(huì)起到刺激性作用，而且在一定程度上還能夠?qū)δ[瘤基質(zhì)的形成起到促進(jìn)作用，在惡性腫瘤的轉(zhuǎn)移和侵襲上讓其產(chǎn)生更嚴(yán)重的惡化。人類的染色體有很多條，其中Ki67基因在全部染色體中位于第10號(hào)的位置。Ki67基因的組成中有分子量較大的蛋白質(zhì)，還有兩條肽鏈，其中大分子蛋白質(zhì)的分子量分別為345000和395000。在DNA的合成當(dāng)中，Ki67基因也發(fā)揮著重要的作用，在醫(yī)學(xué)研究中，經(jīng)常用來(lái)當(dāng)做指標(biāo)檢測(cè)惡性腫瘤細(xì)胞增殖活性。

參考文獻(xiàn)：

[1] 王全志，郭艷風(fēng)，韓芳毅，王會(huì)英.p53與DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα在膽囊腺癌中的表達(dá)及臨床意義[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版），2017，（01）：30-34.

[2] 王平凡，張東生，李嵐，邱娜，張晶晶，衛(wèi)隴，拓曉娟.MUC5AC、CDX-2、Ki67在膽囊黏膜腸上皮化生及膽囊腺癌中的表達(dá)及其意義[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)，2016，（21）：3433-3436.