蒲公英中綠原酸提取工藝及其生物活性研究進(jìn)展

趙露 張英 程丹丹 黎林玉 張倩 劉雨馨 賴(lài)寒 重慶第二師范學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院

蒲公英又名婆婆丁、黃花三七等，屬菊科多年生草本植物。其藥用物質(zhì)主要有有機(jī)酸、黃酮等，能夠清熱解毒、保護(hù)胃腸道、提高機(jī)體免疫力。綠原酸作為蒲公英主要活性成分之一，使其能夠取代昂貴的金銀花和杜仲葉成為新的提取對(duì)象。

一、蒲公英的化學(xué)成分及應(yīng)用

（一）化學(xué)成分

目前從蒲公英中可以檢測(cè)出多種微量元素且鐵、錳、鉬、銅和鋅的含量高于鈣、鉀等[1]。研究結(jié)果顯示，國(guó)外研究者從蒲公英中已分離純化出了不同數(shù)量的萜類(lèi)物質(zhì)、甾醇、有機(jī)酸類(lèi)、黃酮、脂肪酸、胡蘿卜素、東莨素和揮發(fā)油等[2]。

（二）蒲公英的應(yīng)用

作為一種食藥兩用的綠色野生植物可補(bǔ)充人體缺乏的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，在食用方面主要起保健作用。且根據(jù)醫(yī)學(xué)研究表明其含有大量的有機(jī)酸、多糖、黃酮物質(zhì)而具有良好的廣譜抗菌和抗氧化作用，常用于皮膚炎癥、青春痘、祛斑等的治療。

二、蒲公英中綠原酸生物活性研究

雙子葉和蕨類(lèi)植物中含有大量綠原酸，且在忍冬科、杜仲科和菊科屬植物中含量較高。

（一）抑菌消炎作用

蒲公英中綠原酸可抑制多數(shù)細(xì)菌的活性。陳娜等人[3]對(duì)蒲公英中的綠原酸進(jìn)行提取，并用綠原酸提取液進(jìn)行體外抗菌實(shí)驗(yàn)。結(jié)果表明，提取液對(duì)金黃色葡萄球菌抑制作用較強(qiáng)。

（二）降低血糖

綠原酸有著“植物黃金”的美譽(yù)，研究顯示綠原酸能夠降低由淀粉導(dǎo)致的高血糖的情況，通過(guò)蒲公英中綠原酸對(duì)α-淀粉酶進(jìn)行抑制觀察血液中血糖濃度的下降情況，為研發(fā)治療高血糖藥物提供新思路。

（三）保護(hù)心血管

心血管疾病主要是因?yàn)樽杂苫拇嬖谑寡鼙诎l(fā)生損傷，蒲公英中綠原酸可以對(duì)體內(nèi)的·OH自由基進(jìn)行清除從而保護(hù)心血管的完整，防止血栓產(chǎn)生，維持機(jī)體正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

（四）抗腫瘤作用

癌癥是人類(lèi)面臨的高死亡率疾病，且目前臨床治療癌癥的方法療效較差。隨著研究的不斷深入發(fā)現(xiàn)植物中綠原酸也可作為治療癌癥的活性物質(zhì)，其抗腫瘤機(jī)制有延緩腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、抑制腫瘤細(xì)胞繁殖、促使腫瘤細(xì)胞快速死亡等[4]。根據(jù)蒲公英中綠原酸的抗癌活性進(jìn)行小鼠實(shí)驗(yàn)，觀察蒲公英綠原酸提取物對(duì)小鼠癌細(xì)胞增殖情況的影響，記錄小鼠癌細(xì)胞的凋亡數(shù)量，探究其對(duì)癌細(xì)胞的抑制作用。

三、蒲公英綠原酸的提取方法

（一）水溶劑提取法

水提法根據(jù)綠原酸溶于水的原理，通過(guò)熱水將綠原酸提取出來(lái)。此方法簡(jiǎn)單，但提取次數(shù)多、產(chǎn)物雜質(zhì)含量高且綠原酸在水中可發(fā)生水解反應(yīng)，導(dǎo)致提取率低。

（二）超臨界流體萃取

采用超臨界CO2為提取溶劑，利用被提取物分子大小、極性以及沸點(diǎn)高低通過(guò)萃取而進(jìn)行分離純化.利用該方法可節(jié)約原料、提取率高且無(wú)污染但所用設(shè)備昂貴，費(fèi)用較高。

（三）超聲波輔助法

超聲波產(chǎn)生的效應(yīng)可增加細(xì)胞的通透性從而加快綠原酸溶出。較溶劑回流提取法相比，提取時(shí)間短、提取率高。馮戲雨等人[5]利用超聲波對(duì)蒲公英中的綠原酸進(jìn)行提取，根據(jù)結(jié)果顯示采用為60-80目的蒲公英粉末，在液料比30ml/g、超聲波功率198W、乙醇濃度60%、在80℃下提取60min時(shí)，得到1.803%的綠原酸提取率。

（四）微波輔助法

微波穿透細(xì)胞內(nèi)極性物質(zhì)，使細(xì)胞內(nèi)溫度升高導(dǎo)致細(xì)胞脹破，提取物質(zhì)能夠與溶劑進(jìn)行混合從而進(jìn)行分離，該方法產(chǎn)物提取率高、耗時(shí)短、所用原料少、環(huán)保無(wú)污染?？的鹊热薣6]利用微波對(duì)菌陳中的綠原酸進(jìn)行提取，發(fā)現(xiàn)在微波功率為500 W，液料比為20 ml/g，乙醇體積分?jǐn)?shù)70%，微波輻射溫度為60℃下輻射30 min時(shí)，綠原酸的提取率高達(dá)7.374%。

（五）酶法提取

依靠酶的專(zhuān)一特性，對(duì)植物細(xì)胞壁和組織進(jìn)行選擇性的破壞，促使組織內(nèi)物質(zhì)不斷溶出。此方法環(huán)保、實(shí)驗(yàn)設(shè)備簡(jiǎn)單且提取效率高。倪悅等人[7]分別通過(guò)酶解醇提、酶解水提以及醇提的方法對(duì)蒲公英中的綠原酸進(jìn)行提取，經(jīng)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，采用酶解醇沉?xí)r，加入酶液3ml，液料比為12ml/g，在45℃時(shí)酶解3h時(shí)，得到的綠原酸的提取量為5.33mg/g。

綜上所述，對(duì)于綠原酸的提取，傳統(tǒng)溶劑提取法實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)單，但產(chǎn)物中雜質(zhì)較多且實(shí)驗(yàn)時(shí)間久；超臨界流體萃取設(shè)備昂貴、反應(yīng)條件嚴(yán)苛；超聲輔助提取法較溶劑提取法能極大減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間、提高提取率，但綠原酸提取物結(jié)構(gòu)易被破壞。與以上提取方法相比，微波輔助法和酶解法實(shí)驗(yàn)耗時(shí)短且不對(duì)提取物結(jié)構(gòu)產(chǎn)生影響、提取效率高，因此可用于蒲公英中綠原酸的提取。

四、結(jié)語(yǔ)

蒲公英是一種常見(jiàn)的食藥兩用的藥材，價(jià)廉易得，因含有大量的活性物質(zhì)綠原酸而使具有藥用價(jià)值。但目前關(guān)于蒲公英中綠原酸的提取以及生物活性探索較為少見(jiàn)，因此需進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)蒲公英中綠原酸的研究，使蒲公英有望替代金銀花和杜仲葉成為綠原酸提取的主要來(lái)源，促使蒲公英綠原酸能夠在醫(yī)藥領(lǐng)域得到廣泛應(yīng)用，為人類(lèi)生命健康提供保障。