萬春梅
摘要:彎曲桿菌病的病原是彎曲桿菌。該菌可引起患病動(dòng)物出現(xiàn)腹瀉,還可造成牛、羊和犬的流產(chǎn)、不孕以及禽類的傳染性肝炎等疾病。人類若食用被該菌污染的肉類,對人的健康將帶來巨大危害。養(yǎng)殖戶需要了解彎曲桿菌病的病原和流行特點(diǎn),通過實(shí)驗(yàn)室診斷可確診該病,并根據(jù)病型采取合理的應(yīng)對措施。
關(guān)鍵詞:家畜;彎曲桿菌病;診斷;防治
中圖分類號(hào):S858.2??? 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):2095-9737(2019)07-0119-02
1 病原和流行特點(diǎn)
彎曲桿菌是革蘭氏陰性彎曲的桿狀菌,與呼吸道疾病和腸道疾病有關(guān)。對于生殖性疾病,通過性接觸(牛胎兒彎曲桿菌性病亞種)或者通過食入(胎兒彎曲桿菌胎兒亞種和空腸彎曲桿菌,常見于綿羊和山羊,牛很少見)感染侵害生殖道的彎曲桿菌。對于腸道疾病,通過直接或間接糞-口腔途徑感染與腸道疾病相關(guān)的彎曲桿菌(空腸彎曲桿菌、大腸彎曲桿菌),并且可能是主要的傳播方式。
2 實(shí)驗(yàn)室診斷
2.1 樣本采集
生殖性疾?。ㄅ#河糜谂囵B(yǎng)和觀察的樣本最好取自公牛的陰莖包皮,通過吸引作用將包皮垢收集到受精管。如果培養(yǎng)母牛樣本,應(yīng)從陰道前面采集樣本。不考慮性別,全群取10%或20頭牛(或更多)用于診斷檢測的采樣。
生殖疾?。ňd羊和山羊):來自肝臟和流產(chǎn)胎兒皺胃的樣本是最佳的,胎盤和流產(chǎn)胎兒的體液通常也大量感染。
腸道疾?。杭倚蠹S便樣品常被用于空腸彎曲桿菌感染的診斷。
2.2 直接檢查
生殖性疾?。ㄅ#荷倭康膹澢鷹U菌與大量的正常菌群混在一起時(shí),在革蘭氏染色的涂片中,很難觀察到彎曲桿菌。已經(jīng)證實(shí),在檢測方面,熒光抗體染色的標(biāo)本是有價(jià)值的。觀察感染材料的濕片,彎曲桿菌呈特征性的“歪斜狀”運(yùn)動(dòng)。
生殖性疾?。ňd羊和山羊):對流產(chǎn)胎兒的胃內(nèi)容物進(jìn)行革蘭氏染色(石碳酸復(fù)紅染色),在樣品中??梢姷皆摼?。這一發(fā)現(xiàn)與有時(shí)在肝臟發(fā)現(xiàn)的油炸圈餅形壞死相結(jié)合,有助于做出診斷。
腸道疾?。捍蠖鄶?shù)病例是由空腸彎曲桿菌引起的腹瀉,在革蘭氏染色結(jié)合石碳酸復(fù)紅染色的糞涂片中,可以觀察到大量柔嫩的彎曲桿菌。
2.3 分離
生殖性疾?。ㄅ#簩す?、陰道分泌物或者胃內(nèi)容物放在含有抗菌劑的培養(yǎng)基中(通常加入萬古霉素、多黏霉素B或C、甲氧芐氨嘧啶,以減少非彎曲桿菌的生長;在某些抑制真菌生長的配方中,加入兩性霉素B)。平皿放在含6%氧氣、5%~10%二氧化碳的環(huán)境中,37℃條件下培養(yǎng),48 h內(nèi)進(jìn)行檢查。
生殖性疾病(綿羊和山羊):將皺胃內(nèi)容物(取自流產(chǎn)胎兒)和肝臟組織放在血瓊脂板上(依據(jù)被污染的程度,決定加入或者不加入抗生素),平皿放在含6%氧氣、5%~10%二氧化碳的環(huán)境中,37℃條件下培養(yǎng),在48 h內(nèi)進(jìn)行檢查。
腸道疾?。鹤詈糜煤锌股氐倪x擇培養(yǎng)基,從感染的腸道樣本中分離空腸彎曲桿菌和大腸彎曲桿菌(彎曲桿菌-CVA含有頭孢哌酮、萬古霉素、兩性霉素B),平皿放在含6%氧氣、5%~10%二氧化碳的環(huán)境中,37℃或42℃孵育。
2.4 鑒定
氧化酶陽性、革蘭氏陰性的彎曲形桿菌是分離到彎曲桿菌屬或弧菌的依據(jù)。盡管已有幾種發(fā)酵反應(yīng)可用于彎曲桿菌的鑒定,但這些方法冗長而費(fèi)時(shí)。以檢測特定DNA序列為基礎(chǔ)的方法可被用于鑒定(如通過PCR反應(yīng),擴(kuò)增特定DNA序列,產(chǎn)生一定大小的片段,或者確定編碼rRNA的基因序列)。同樣,細(xì)胞壁脂肪酸的分析也很有效。
2.5 血清學(xué)診斷
有時(shí)可用血清學(xué)方法對牛與彎曲桿菌相關(guān)的生殖性疾病進(jìn)行診斷,當(dāng)子宮頸、陰道黏液中含有針對彎曲桿菌抗原的抗體時(shí),即可確診該病。將1個(gè)棉球放在子宮頸附近的陰道內(nèi),用于采集樣本,取出后收集黏液并進(jìn)行一系列稀釋。感染后3~80天內(nèi),在子宮頸陰道黏液中出現(xiàn)凝集素(抗體),大約持續(xù)7個(gè)月。家畜在發(fā)情期4~5天后或者發(fā)情前的1~2天收集樣本,由于在發(fā)情期分泌黏液較多,此時(shí)采集的樣本需過度稀釋,血液的存在使檢測失效。也可通過ELISA檢測抗空腸彎曲桿菌的抗體,據(jù)報(bào)道可在發(fā)情期間進(jìn)行該試驗(yàn),并且在感染后18~40天內(nèi)呈現(xiàn)陽性。
3 防治措施
生殖性疾病(牛):可用鏈霉素非腸道注射治療公牛。將青霉素和鏈霉素溶液滴入公牛的陰莖包皮,進(jìn)行局部治療。據(jù)報(bào)道,免疫公牛可以清除帶菌狀態(tài)。最好通過預(yù)防來防止該病發(fā)生,健全的飼養(yǎng)管理方式可降低該菌侵入畜群的機(jī)會(huì)。使用測試結(jié)果為陰性的青年公牛與后備母牛配種,剔除來源不清母牛,是消除彎曲桿菌的有效方式。一旦該菌存在于牛種群中,可以讓牛群休息一個(gè)繁殖季節(jié),并且精選公牛,該法可消除來自母牛的病原,當(dāng)重新交配時(shí)又排除了傳染源。人工授精技術(shù)是提高牛質(zhì)量和控制疾病傳播的一種有效方法。母牛的治療不提倡使用抗生素。該病呈地方性流行的地區(qū),常使用菌苗預(yù)防該病,每年可進(jìn)行1次疫苗接種。
生殖性疾病(綿羊和山羊):注射抗生素可以治療該病,可以防止流產(chǎn)大規(guī)模發(fā)生,注射青霉素最為有效。應(yīng)將流產(chǎn)母羊與那些未被感染的羊分離飼養(yǎng),防止健康羊感染。在羊配種前,注射彎曲桿菌菌苗能夠預(yù)防該病發(fā)生。
腸道疾病:空腸彎曲桿菌引起家畜的腸炎常具有自限性。大環(huán)內(nèi)酯類抗生素(克拉霉素、泰樂菌素)是治療空腸彎曲桿菌性腹瀉的選擇藥物。當(dāng)不能使用大環(huán)內(nèi)酯類藥物時(shí),盡管有四環(huán)素抗性株(R質(zhì)粒為基礎(chǔ))存在,采用四環(huán)素治療仍是有效的。目前,還沒有控制家畜空腸彎曲桿菌性腸炎的免疫制劑。