陳亞運(yùn)
五種不同產(chǎn)地番荔枝果實(shí)的抗氧化活性比較
陳亞運(yùn)
(泰州職業(yè)技術(shù)學(xué)院江蘇泰州225316)
本實(shí)驗(yàn)對5種不同產(chǎn)地的番荔枝果實(shí)的抗氧化作用進(jìn)行研究。采用ABTS+法和DPPH法分別測定番荔枝果實(shí)的抗氧化能力,結(jié)果顯示:5種不同產(chǎn)地的番荔枝果實(shí)均表現(xiàn)出一定的抗氧化作用,其中,廣東產(chǎn)番荔枝果實(shí)抗氧化能力最佳。
番荔枝;抗氧化;ABTS+;DPPH
抗氧化能力是評價水果的重要指標(biāo),熱帶著名水果番荔枝又名釋迦、佛頭果,原產(chǎn)于美洲,現(xiàn)在全球熱帶地區(qū)均有種植。其果實(shí)味道甘美,甜而不膩,營養(yǎng)豐富(含蛋白質(zhì)2.34 %,脂肪0.3 %,糖類20.42 %)[1],深受消費(fèi)者喜愛。然而,有關(guān)番荔枝果實(shí)抗氧化作用研究卻鮮有報道,更沒有對不同產(chǎn)地的果實(shí)抗氧化能力進(jìn)行比較的研究。本實(shí)驗(yàn)選取種植在中國大陸南方5省的番荔枝果實(shí),采用ABTS+法和DPPH法對其體外抗氧化能力進(jìn)行測定。
新鮮的番荔枝果實(shí)分別購自于云南省臨滄市;海南省三亞市;廣西省防城港市;福建省漳州市;廣東省汕頭市。其形均為圓形或橢圓形,黃綠色,直徑5~10 cm,外表無毛,粗糙,被白色粉霜,經(jīng)泰州市藥檢所白鋼鋼研究員鑒定均為番荔枝科植物番荔枝(Linn)的成熟果實(shí)。
電子天平(AY-220 ,SHIMADZU)。
數(shù)控超聲波清洗機(jī)(KQ-500 DE,昆山市超聲儀器有限公司)。
冷凍干燥機(jī)(FD-1-50 ,北京博醫(yī)康生物科技有限公司)。
高速離心機(jī)(H1650 -W,湖南湘儀離心機(jī)儀器有限公司)。
ABTS+法總抗氧化能力檢測試劑盒購自碧云天生物科技公司。
DPPH法試劑盒購自凱基生物科技有限公司。
新鮮的番荔枝果實(shí)經(jīng)低溫干燥后,保存于干燥器中。取五種產(chǎn)地的干燥的番荔枝果實(shí),剪碎后經(jīng)研磨成細(xì)粉,過篩,精密稱定五種不同產(chǎn)地的果實(shí)樣品粉末各1 g,分別加入到含有20 mL水的錐形瓶中,于超聲機(jī)上室溫超聲60 min。靜置稱重,加水補(bǔ)齊損失的溶劑。離心后,取上清液經(jīng)0.22 μm的微孔濾膜過濾,儲存于離心管中,備用。
人體的正常生理反應(yīng)(如呼吸)、外界放射線照射等因素都能在人體體內(nèi)產(chǎn)生自由基[2]。過量自由基與癌癥、衰老或其它疾病都有關(guān)聯(lián)。水果中的抗氧化劑可清除自由基的危害并延緩身體衰老。因此,研究番荔枝果實(shí)的抗氧化能力可為評價番荔枝果實(shí)品質(zhì)以及比較不同產(chǎn)地間差異提供重要參考。
2.2.1 ABTS法測定抗氧化能力
精密稱取3 mgABTS+粉末溶于0.735 mL去離子水中得7.4 mmol/LABTS+儲備液,稱取1 mg過硫酸鉀粉末溶于1.43 mL去離子水中得2.6 mmol/L過硫酸鉀儲備液,分別吸取ABTS+儲備液和過硫酸鉀儲備液0.2 mL混合均勻,于室溫下避光靜置12 h,使用時用無水乙醇稀釋40 倍得ABTS+工作液,注意現(xiàn)配現(xiàn)用。
參照文獻(xiàn)[3],將待測溶液稀釋成不同濃度的稀釋液,每個濃度均移取20 μL樣品加入到96 孔板中,加入130 μLABTS+工作液,并采用酶標(biāo)儀于734 nm處測定工作液的吸光度。為排除樣品和溶劑自身顏色的影響,需同時設(shè)置空白組
(乙醇+ ABTS+)和背景組(乙醇+樣品)。其他產(chǎn)地的樣品溶液同以上操作。ABTS+自由基清除率計算公式如下:
其中,A0表示ABTS+空白吸光度,Ai為給藥后的吸光度,所有測定操作重復(fù)3次,取平均值。
2.2.2 DPPH法測定抗氧化能力
參照文獻(xiàn)[4],配制DPPH溶液:采用9無水乙醇溶解DPPH并定容成50 μg/mL的反應(yīng)液。吸取50 μL無水乙醇,加100 μLDPPH溶液于96 孔板中,混勻后于25 ℃下避光反應(yīng)30 min,于517 nm波長處測定吸光度。清除率的計算公式同2.2.1。
如表1所示,不同產(chǎn)地的番荔枝果實(shí)均具有較好的清除ABTS+自由基的能力,相比之下,廣東產(chǎn)番荔枝果實(shí)清除該自由基能力較強(qiáng),而福建產(chǎn)的番荔枝果實(shí)清除能力相對較弱。
表1 不同產(chǎn)地番荔枝果實(shí)不同濃度下對ABTS+自由基的清除率
與3.1項(xiàng)下清除ABTS+自由基相似,表2中不同產(chǎn)地的番荔枝果實(shí)也均表現(xiàn)出較好的清除DPPH自由基的能力。更類似的是,廣東產(chǎn)番荔枝果實(shí)清除DPPH自由基能力也是最強(qiáng),而福建產(chǎn)的番荔枝果實(shí)清除DPPH自由基能力也相對最弱。
表2 不同產(chǎn)地番荔枝果實(shí)不同濃度下對DPPH自由基的清除率
0.78 μg/mL1.56 μg/mL3.12 μg/mL6.25 μg/mL12.5 μg/mL 海南5.39 %11.39 %20.25 %20.65 %33.69 % 云南9.09 %17.3%23.4%42.17 %50.69 % 福建4.42 %7.25 %13.47 %22.19 %29.46 % 廣西2.83 %6.55 %14.54 %26.07 %30.32 % 廣東66.11 %78.04 %79.1%79.29 %77.37 %
本研究采用三種不同的方法測定了五種不同產(chǎn)地番荔枝果實(shí)的抗氧化能力。結(jié)果顯示,五種番荔枝果實(shí)均具有一定的抗氧化能力,其中廣東產(chǎn)番荔枝果實(shí)抗氧化能力最強(qiáng)。
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10.3969/j.issn.2095-1205.2019.05.18
TS255.1
C
2095-1205(2019)05-32-02