2017-2018年延安市豬瘟免疫抗體檢測

師 園 楊 梅 周 宇 李美文 馮 秀 葛興農(nóng)

（延安市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，陜西延安 716000）

豬瘟（Classical swine fever，CSF）又稱豬霍亂、爛腸瘟，是由豬瘟病毒（Classical swine fever virus，CSFV）引起豬的一種高度接觸性、致死性的傳染病，是危害豬產(chǎn)業(yè)最為嚴(yán)重的傳染病之一，我國將其列為一類動(dòng)物疫病。自2007年起豬瘟的免疫被國家納入重大動(dòng)物疫病強(qiáng)制免疫中，使得豬瘟的免疫更加科學(xué)，更加規(guī)范[1]，經(jīng)過將近10年的不懈努力，我國已基本控制了豬瘟疫情大規(guī)模的爆發(fā)。但是自2017年國家將豬瘟的免疫改為對(duì)符合條件的養(yǎng)殖場實(shí)行“先打后補(bǔ)”的財(cái)政補(bǔ)助政策，從此豬瘟退出了國家強(qiáng)制免疫計(jì)劃。近幾年豬瘟還是以地方性常在病在一些地區(qū)爆發(fā)，對(duì)現(xiàn)代生豬養(yǎng)殖業(yè)依然構(gòu)成現(xiàn)實(shí)的威脅。目前豬瘟的防控主要還是依靠疫苗免疫，而豬瘟的免疫抗體水平監(jiān)測工作無論在豬瘟疫病強(qiáng)制免疫防控中還是疫苗的研究中都發(fā)揮著重要的作用，因此，定時(shí)進(jìn)行豬瘟抗體檢測，不但能實(shí)時(shí)監(jiān)控豬瘟抗體的免疫動(dòng)態(tài)，并且能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)免疫存在的問題和潛在風(fēng)險(xiǎn)，從而優(yōu)化豬瘟免疫程序以便更好地做好豬瘟的防控工作。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 血清樣品。血清樣品2017年春、秋兩季從寶塔區(qū)、安塞區(qū)、吳起縣、志丹縣、子長縣、延川縣、延長縣、甘泉縣、富縣、洛川縣、宜川縣、黃陵縣、黃龍縣13個(gè)縣（區(qū)）共采集豬血清樣品943份，其中中小規(guī)模豬場586份，散養(yǎng)戶357份。2018年春、秋兩季從這13個(gè)縣（區(qū)）共采集豬血清樣品794份，其中中小規(guī)模豬場496份，散養(yǎng)戶298份。樣品采集的方法是將豬保定后，從前腔靜脈或者耳靜脈采集血樣3～5ml，室溫斜面放置，待血液自然凝固析出血清后，吸取上清液放置到1.5ml的離心管中，低溫保存待檢。

1.1.2 主要試劑。豬瘟間接血凝抗體檢測試劑盒。購自中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所。

1.1.3 主要儀器。移液器分為單道和多道（品牌：BRAND）；振蕩器（型號(hào)：ZW-4）；96孔110度有機(jī)反應(yīng)板。

1.2 方法

采用國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16551-2008《豬瘟檢測技術(shù)》，進(jìn)行豬瘟正向間接血凝實(shí)驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 2017年延安市各縣（區(qū)）豬瘟病毒免疫抗體合格率

（1）豬瘟病毒整體免疫抗體合格率。由表1可以看出，從13個(gè)縣（區(qū)）春、秋兩季共采樣943份，其中合格樣品757份，平均合格率為81.95%。其中D、F和K的合格率最高，為96.67%，最低的是G，為58.06%。從表中可以看出有個(gè)別縣區(qū)的抗體合格率未已達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%），各縣之間的抗體水平存在差異。

表1 2017年各縣（區(qū)）豬瘟免疫抗體合格率

（2）各縣（區(qū)）春秋兩季豬瘟免疫抗體合格率在春季采集的399份和秋季采集的544份樣品中，從圖1可以看出，在春、秋季中，不同縣（區(qū)）檢測得到的合格率有所不同，其中E、G、H、M縣區(qū)秋季抗體合格率未達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）；A、G、C縣區(qū)春季抗體合格率未達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）。由此看出有些縣區(qū)的抗體合格率過低，需引起注意。

圖1 2017年延安市各縣（區(qū)）春秋兩季豬瘟免疫抗體合格率

（3）不同采樣地點(diǎn)豬瘟免疫抗體合格率。由表2可以看出，采樣點(diǎn)涉及到的規(guī)?；i場48個(gè)，采樣586份；散養(yǎng)戶42個(gè)，采樣357份；抗體檢測合格率是規(guī)?；i場高于散養(yǎng)戶，說明不同檢測點(diǎn)采集的樣品測得的免疫抗體合格率差異較大。并且散養(yǎng)戶的豬瘟抗體合格率未達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）。

表2 2017年不同采樣點(diǎn)豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果

規(guī)?；B(yǎng)殖場 48 586 498 84.98%78.76%散養(yǎng)戶 42 357 259 72.55%合計(jì) 135 943 757

2.2 2018年延安市各縣（區(qū)）豬瘟病毒免疫抗體合格率

2.2.1 豬瘟病毒整體免疫抗體合格率。由表3可以看出，從13個(gè)縣（區(qū)）春、秋兩季共采樣794份，其中合格樣品640份，平均合格率為80.56%。其中G和L的合格率最高，為95.16%，最低的是C，為60.00%。由表中可以看出有四個(gè)縣未已達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%），并且各縣之間的抗體水平差異明顯。

2.2.2 各縣（區(qū)）春秋兩季豬瘟免疫抗體合格率。從圖2可以看出，在春季采集的395份和秋季采集的399份樣品中，每個(gè)縣（區(qū)）采集的樣品基本上一致，均在30份左右，由下表可以看出在春、秋季中，部分縣（區(qū)）在春秋兩次的抗體合格率還存在明顯差異：只有四個(gè)縣區(qū)A、B、C、F是春秋兩季都達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%），D、H、I、K、L這五個(gè)縣區(qū)是春季達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）而秋季未達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）；G、M這兩個(gè)縣區(qū)是春季未達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）而秋季達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）；E縣區(qū)則是春秋兩季均未達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%）。這一結(jié)果需要各縣引起重視。

表3 2018年各縣（區(qū)）豬瘟免疫抗體合格率

圖2 2018年延安市各縣（區(qū)）春秋兩季豬瘟免疫抗體合格率

2.2.3 不同采樣地點(diǎn)豬瘟免疫抗體合格率。由表4可以看出，采樣點(diǎn)涉及到的規(guī)?；i場44個(gè)，采樣496份；散養(yǎng)戶62個(gè)，采樣298份；抗體檢測合格率是規(guī)?；i場高于散養(yǎng)戶，說明不同檢測點(diǎn)采集的樣品測得的免疫抗體合格率差異較大。但是豬瘟抗體合格率均達(dá)到或者超過國家規(guī)定合格率（70%）。

表4 2018年不同采樣點(diǎn)豬瘟免疫抗體檢測結(jié)果

3 討論

判斷豬瘟疫苗的免疫是否成功主要是檢測豬群內(nèi)的豬瘟抗體是否達(dá)到了一定的水平，使其能夠抵抗外來豬瘟病毒的入侵。豬瘟免疫水平低下是豬瘟流行的主要原因，因此免疫后對(duì)豬群進(jìn)行豬瘟抗體監(jiān)測，掌握豬群的抗體水平對(duì)豬瘟預(yù)防、治療及控制有重要意義。本研究調(diào)查了2017～2018 年延安市13個(gè)縣區(qū)的豬瘟抗體水平進(jìn)行了監(jiān)測分析。

從檢測結(jié)果看，不同的縣區(qū)之間存在較大的差異，17年各縣區(qū)豬瘟抗體合格率58.06～96.67%，18年各縣區(qū)豬瘟抗體合格率是60.00～95.16%，有個(gè)別縣區(qū)的抗體合格率沒有達(dá)到國家規(guī)定合格率（70%），這可能與這兩年豬瘟退出國家強(qiáng)制免疫后，有的地方也放松了對(duì)豬瘟的免疫計(jì)劃有關(guān)。從本檢測結(jié)果可以看出本市部分縣區(qū)還存在潛在的危險(xiǎn)性，需引起重視。

無論是2017年還是2018年，規(guī)?；B(yǎng)殖場的抗體合格率均大于散養(yǎng)戶的，這一結(jié)果可能與飼養(yǎng)管理水平、免疫工作的重視程度等有關(guān)。規(guī)?；B(yǎng)殖場的飼養(yǎng)管理水平較高，并且有相對(duì)較為健全的免疫程序，而散養(yǎng)戶的飼養(yǎng)管理水平低，并且只有春秋兩季進(jìn)行免疫接種，有時(shí)接種不當(dāng)可能導(dǎo)致免疫失敗?？傮w來看，這兩年來延安市的豬瘟抗體平均合格率在80%左右，超出了國家規(guī)定合格率（70%），但是春秋兩季的合格率超過90%不多，并且還有個(gè)別縣區(qū)的合格率沒有上60%?；蛘邉偵?0%。說明延安市存在很大的風(fēng)險(xiǎn)。根據(jù)抗體檢測結(jié)果分析，對(duì)造成這種現(xiàn)象的主要因素提出幾條建議：⑴合理確定豬瘟疫苗的首免時(shí)間，過早免疫由于母源抗體水平較高，會(huì)影響疫苗的免疫效果；⑵根據(jù)豬場的實(shí)際情況制定科學(xué)的免疫程序并嚴(yán)格執(zhí)行，并且定期抽取一定比例的血清樣品進(jìn)行豬瘟抗體檢測，這樣不但能實(shí)時(shí)監(jiān)控豬瘟抗體的免疫動(dòng)態(tài)，而且能夠?qū)ζ涿庖咝ЧM(jìn)行評(píng)估，不斷地優(yōu)化豬瘟免疫程序，取得良好的免疫效果；⑶加強(qiáng)豬場的飼養(yǎng)管理，在飼養(yǎng)管理過程中，保證全價(jià)營養(yǎng)，盡可能地減少生產(chǎn)過程中的應(yīng)激反應(yīng)，合理進(jìn)行藥物保健，尤其要做好其他疫病的免疫檢測工作，全面提高豬只的非特異性和特異性抵抗力。四、加強(qiáng)豬瘟的危害和防控知識(shí)的宣傳，提高養(yǎng)殖戶的預(yù)防意識(shí)，組織養(yǎng)殖戶和村級(jí)獸醫(yī)防治員防控技術(shù)培訓(xùn)。