康痔栓對大鼠肛周潰瘍及小鼠耳腫脹的影響*

職 媛，楊 碩，朱中博，楊小娟，葉 凱，尚榮國，李康樂，竇建衛(wèi)**

(1.西安交通大學(xué) 醫(yī)學(xué)部，陜西 西安 710061;2.甘肅中醫(yī)藥大學(xué) 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，甘肅 蘭州 730000)

痔瘡是由肛周血管墊內(nèi)支持連接結(jié)構(gòu)的斷裂、靜脈叢變大、動靜脈吻合支病變、血栓等，引起的一種常見疾病[1]。根據(jù)痔瘡發(fā)生的部位大致分為外痔、內(nèi)痔、混合痔[2]。痔瘡是一種常見病、多發(fā)病，在整個肛腸類疾病中，痔瘡的發(fā)病率占87.25 %[3]。痔瘡能在任何年齡段發(fā)病，且隨著年齡的增長其發(fā)病率逐漸升高，一般認(rèn)為其高發(fā)年齡段為45歲～65歲，且女性患者數(shù)量略高于男性[4]。痔瘡的治療大致分為手術(shù)治療和非手術(shù)治療，手術(shù)治療包括血栓外痔切除術(shù)、血栓外痔剝離術(shù)、靜脈叢剝離術(shù)等；非手術(shù)治療包括中藥熏蒸、激光、針灸、塞藥、外敷等[5]。中藥栓劑在治療痔瘡方面有獨(dú)到的優(yōu)勢，康痔栓具有消腫止痛、化瘀、燥濕的功效，主要用于濕熱壅滯型痔瘡，前期研究結(jié)果表明，康痔栓對痔瘡引起的肛周腫脹及出血具有明顯的作用[6]。為更加深入地探討康痔栓的藥效學(xué)機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)建立大鼠肛門周圍潰瘍模型及小鼠左耳郭腫脹模型，探討康痔栓對肛周潰瘍及腫脹的影響。

1 材 料

1.1 動物及飼養(yǎng)

60只SPF級SD大鼠，雌雄各半，體質(zhì)量為180 g～220 g；60只SPF級KM小鼠，雄性，體質(zhì)量為18 g～22 g，購于西安交通大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心，生產(chǎn)許可證號：SCXK(陜)2017-003。飼養(yǎng)于西安交通大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心，食水自由，食固體飼料，動物按性別分籠飼養(yǎng)。相對濕度60 %～70 %，室溫18 ℃～20 ℃。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品

康痔栓，院內(nèi)提供，2.5 g/粒，用0.5 % CMC-Na溶液把其分別配制成16.7、6.7、3.3 mg/mL的混懸液，分為康痔栓高、中、低劑量組；痔瘡栓，通藥制藥集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，2 g/粒，用0.5 % CMC-Na溶液把其配制成2.6 mg/mL的混懸液，設(shè)為陽性對照組；醋酸，天津市耀華化學(xué)試劑責(zé)任有限公司生產(chǎn)；硫化鈉，天津天得利化工貿(mào)易有限公司生產(chǎn)；二甲苯，江蘇興華化工有限公司等。

1.3 儀 器

大鼠代謝籠；JA1103N電子天平，上海民橋精密科學(xué)儀器有限公司生產(chǎn)；ACS-H1電子計重秤，浙江凱豐集團(tuán)有限公司生產(chǎn)等。

2 實(shí)驗(yàn)方法

2.1 大鼠肛周潰瘍實(shí)驗(yàn)

取60只大鼠，雌雄各半，用硫化鈉肛周脫毛，脫毛面積1.5 cm×1.5 cm。取一張濾紙，制成內(nèi)徑為6 mm大小相等的濾紙圓片。把濾紙片打開，放入99 % 醋酸溶液中，使濾紙充分浸泡。分別將浸泡后的濾紙片放到大鼠肛門周圍，使濾紙片緊密接觸肛周皮膚及黏膜，每只大鼠接觸1 min，其中于0.5 min時更換一次濾紙片。24 h觀察潰瘍程度，造模成功后，取50只大鼠，雌雄各半，按體質(zhì)量及潰瘍嚴(yán)重程度將大鼠隨機(jī)分為模型組、陽性對照組、康痔栓低、中、高劑量組，每組10只。每日按對照組別給藥1次，模型組給予0.5 % CMC-Na，每次給藥 2.5 mL，肛周潰瘍處涂抹。給藥第3、5、7、9、11天根據(jù)大鼠潰瘍愈合情況，評定潰瘍程度。評分細(xì)則見表1。

表1 肛周潰瘍評分表

2.2 小鼠耳郭腫脹程度實(shí)驗(yàn)

取雄性小鼠60只，0.05 mL二甲苯均勻涂于小鼠左耳前后兩面致炎，0.5 h后觀察小鼠左耳郭腫脹情況，造模成功后取50只，按體質(zhì)量及腫脹程度隨機(jī)分為模型組、陽性對照組、康痔栓低、中、高劑量組，每組10只。用在0.5 %CMC-Na、痔瘡栓、康痔栓低、中、高劑量組浸泡好的棉簽分別涂抹于相應(yīng)組別的小鼠致炎耳郭上。4 h后，將小鼠頸椎脫位致死，沿耳郭基線剪下兩耳，分別在同一部位用直徑8 mm打孔器打下一耳片，在分析天平上稱重，求兩耳片重量之差(Δmg)來反映腫脹度，并計算腫脹百分率。

2.3 統(tǒng)計學(xué)方法

3 結(jié) 果

3.1 康痔栓對大鼠肛周潰瘍的影響

涂抹藥物第3、5、7、9、11天后，康痔栓低、中、高劑量組大鼠肛周潰瘍愈合情況優(yōu)于模型組，且隨用藥時間及用藥劑量的增加，潰瘍愈合的程度更佳，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見圖1。

圖1 康痔栓對大鼠肛周潰瘍的影響

注：與模型組相比，P<0.05。

3.2 康痔栓對小鼠耳腫脹的影響

涂抹藥物后，康痔栓低、中、高劑量組小鼠耳郭腫脹程度低于模型組，且隨用藥劑量的增加而降低，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見圖2。與模型組相比，耳郭腫脹的抑制率隨康痔栓藥量的增加而增高，組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見圖3。

圖2 康痔栓對小鼠耳腫脹的抑制

注：與模型組相比，*P<0.05。

圖3 康痔栓對小鼠耳腫脹抑制率的影響

注：與模型組相比，P<0.05。

4 討 論

俗語講“十人九痔”，痔瘡是一種常見病、多發(fā)病。飲食不節(jié)、體虛勞累、便秘、久坐、外邪入侵及情志不舒等，都可引發(fā)痔瘡的發(fā)作。中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，濕熱風(fēng)燥損傷肛周血絡(luò)，導(dǎo)致氣血不行，瘀血阻滯，濕熱內(nèi)生[7]。治療上以清熱燥濕、祛瘀止痛、活血通絡(luò)為主?？抵趟ㄖ幸渣S芩、黃柏為君藥，清熱燥濕解毒；以當(dāng)歸、白及為臣藥，活血補(bǔ)血，使瘀血得去，新血得生；佐以冰片清熱消腫?？v觀全方，具有清熱解毒止痛、燥濕消腫止血、活血生血之效。

本文通過誘導(dǎo)造模的方法，建立一個穩(wěn)定的潰瘍、炎性腫脹模型，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：康痔栓可以明顯改善大鼠肛周潰瘍；并采用經(jīng)典的小鼠耳腫脹炎癥模型驗(yàn)證康痔栓的抗炎作用。臨床上，痔瘡患者經(jīng)常出現(xiàn)肛周潰瘍及炎性腫脹的情況，本實(shí)驗(yàn)為康痔栓臨床應(yīng)用提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。