梅毒檢驗中酶聯(lián)免疫吸附法與甲苯胺紅不加熱血清法的比較

姚映生

（汕頭市中心醫(yī)院檢驗科 廣東汕頭 515031）

1 前言

近幾年來，梅毒感染性檢出率明顯上升[1]，成為社會共同關注的公共衛(wèi)生問題。梅毒是由蒼白螺旋體引起的一種性傳播疾病[2]，一般使用酶聯(lián)免疫吸附法檢測，雖然其靈敏度較高，特異性較好，且操作方便，但有假陽性高的不足，臨床篩查中存在一部分缺陷。隨著醫(yī)療水平的逐漸提升，臨床上應用了檢測準確性更高的梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗，缺點是試劑盒價格昂貴，所以難以作為常規(guī)的梅毒篩查方法廣泛應用。對于梅毒感染能否進行快速而精準的診斷，是當前亟待解決的首要問題。通過梅毒篩查的200 例患者臨床資料，比較甲苯胺紅不加熱血清試驗與酶聯(lián)免疫吸附法檢測在梅毒檢驗中的臨床應用價值。

2 資料與方法

2.1 一般資料

收集2018年3月—2019年5月接收的梅毒感染患者資料200 例，隨機均分為實驗組和對照組。實驗研究組男性患者56 例，女性患者44 例，年齡范圍 30～61 歲，平均年齡（44.73±11.67）歲；對照組男性患者 57 例，女性患者 43 例，年齡范圍 29～61 歲，平均年齡（45.26±10.78）歲。兩組患者在一般資料上無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），有可比性。

2.2 方法

2.2.1 檢測儀器

洗板機、全自動酶聯(lián)免疫分析儀、微量加樣器等。

2.2.2 試劑盒

深圳寶安康生物有限公司生產(chǎn)的甲苯胺紅不加熱血清試驗試劑盒、上?？迫A生物工程股份有限公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫吸附試劑盒，均在有效期內。

2.2.3 檢測方法

抽取梅毒感染者的靜脈血5 mL，放置5 min 后，分離血清并進行檢測，分別采用甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯(lián)免疫吸附法進行梅毒檢測，檢測方法均為常規(guī)操作，操作按照試劑盒中的說明書進行。

甲苯胺紅不加熱血清法:（1）加樣：加入 50 μL 待測標本于預包被板條孔，分別設置空白對照、陽性和陰性，于 37℃中溫育 1 h；（2）加酶:加入酶標物 50 μL于 3 組中，搖勻后于 37℃中放置 0.5 h；（3）顯色：置入50 μL 底物緩沖液于各孔中，搖勻后于37℃中溫育0.5 h，并于隔孔內加入50 μL 終止液，在全自動酶聯(lián)免疫分析儀上讀出數(shù)據(jù)并記錄。

酶聯(lián)免疫吸附法:（1）加樣：于卡片圈中均勻加入 50 μL 血清；（2）加抗原：于孔內均勻加入 1 滴抗原液體；（3）反應：在立體脫色搖床中以 100 r/min 震蕩8 min，在亮光下觀察其結果。

2.3 統(tǒng)計學方法

兩組梅毒感染患者的觀察指標將采用SPSS16.0系統(tǒng)軟件統(tǒng)計分析。敏感性、特異性及陽性預測值為計數(shù)資料，用（n，%）表示；用 χ2檢驗，P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計學意義。

3 結果

甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯(lián)免疫吸附法梅毒抗體檢測結果比較結果表明，酶聯(lián)免疫吸附法檢測結果的敏感性、特異性及陽性預測值均高于甲苯胺紅不加熱血清法，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，具體內容詳見表1。

表1 兩組檢測方法的敏感性、特異性及陽性預測值的比較

4 討論

據(jù)研究數(shù)據(jù)顯示[3]，近年來，梅毒感染率始終呈上升態(tài)勢，且上升速度也逐年增長，其中也包括地區(qū)獻血人群的梅毒檢出率。梅毒感染的病原體是梅毒螺旋體，梅毒螺旋體侵襲機體后會產(chǎn)生一種非特異性抗體，此非特異性抗體臨床上檢出難度較高，通常在梅毒晚期可以檢出，有時會出現(xiàn)陰性結果，造成漏診的現(xiàn)象。至今臨床檢查中將特異性抗體作為感染梅毒的主要依據(jù)，就是由于梅毒螺旋體的特異性抗體出現(xiàn)時間早而消失較晚。截止到目前，臨床上主要的梅毒檢測方法是甲苯胺紅不加熱血清法與酶聯(lián)免疫吸附法[4]，甲苯胺紅不加熱血清法操作起來方便快捷，檢查費用低，但易受主觀因素影響；酶聯(lián)免疫吸附方法是對血清中的特異性抗體進行一系列檢測，決定結果的數(shù)據(jù)來自全自動酶聯(lián)免疫分析儀，能最大幅度降低主觀性判斷的誤差，檢出率相對精確。

綜上可知，酶聯(lián)免疫吸附法的篩查精準度高于甲苯胺紅不加熱血清法，臨床應用價值更高。使用酶聯(lián)免疫吸附法來檢測梅毒感染患者[5]，可以將血清中梅毒抗體免疫球蛋白一并檢測。先使用甲苯胺紅不加熱血清法作為初篩，再采用準確度高的酶聯(lián)免疫吸附方法作進一步檢查，可有效提高梅毒陽性檢出率，同時能檢測出梅毒抗體是否呈陽性，有效預防篩查過程中的誤診漏診，充分發(fā)揮梅毒檢測的意義，提高梅毒的檢出率，值得作進一步臨床推廣。