Survivin在腫瘤中的表達(dá)的研究進(jìn)展

盧杰 高莉莉 馬雪真

Survivin是IAP（凋亡抑制蛋白）家族的最新成員，是1997年耶魯大學(xué)Altieri DC等利用效應(yīng)細(xì)胞蛋白酶受體-1 cDNA在人類基因組庫(kù)中篩選分離出來(lái)的，被命名為“存活素或生存素”。Survivin主要分布于胚胎及分化未成熟的組織中，而大多數(shù)常見(jiàn)腫瘤組織內(nèi)表達(dá)水平明顯增高。Survivin基因全長(zhǎng)14.7kb，編碼產(chǎn)生一個(gè)由142個(gè)氨基酸組成的分子量約16.5KD的胞漿蛋白，含有一個(gè)桿狀病毒凋亡抑制蛋白重復(fù)序列（BIR）分子，此分子中含有對(duì)抑制凋亡起重要作用的氨基酸殘基。

1 Survivin的抗凋亡作用

Survivin是至今發(fā)現(xiàn)作用最強(qiáng)的凋亡抑制蛋白之一，有報(bào)道稱survivin抑制凋亡可能是通過(guò)直接結(jié)合caspases-3和caspases-7實(shí)現(xiàn)。關(guān)于Survivin抗凋亡機(jī)制的研究，Marusawa等的研究證實(shí)，Survivin通過(guò)輔因子乙型肝炎B病毒反應(yīng)蛋白（HBXIP）結(jié)合到caspase-9前體，并抑制它的活化，通過(guò)此途徑抑制凋亡。Dohi等的研究證實(shí)，在受到死亡刺激時(shí)，survivin和凋亡抑制因子X(jué)IAP結(jié)合形成復(fù)合物，增強(qiáng)了XIAP的穩(wěn)定性，然后協(xié)同地作用于caspase-9來(lái)抑制凋亡。

2 Survivin與細(xì)胞增殖分裂、分化

Survivin參與細(xì)胞分裂增殖，它與細(xì)胞的有絲分裂、卵裂溝形成及胞漿移動(dòng)等有關(guān)。Survivin在細(xì)胞分裂作用中的相關(guān)作用機(jī)制：（1）Survivin 激活CDK2-cyclinE復(fù)合物，使Rb磷酸化，促進(jìn)細(xì)胞增殖;（2）結(jié)合CDK4形成Survivin-CDK4復(fù)合體，使P16與CDK4分離，促進(jìn)細(xì)胞的有絲分裂;（3）參與過(guò)客蛋白復(fù)合體調(diào)節(jié)有絲分裂的進(jìn)行。

3 Survivin在腫瘤中的表達(dá)

Survivin是少數(shù)在人腫瘤細(xì)胞和正常組織細(xì)胞中表達(dá)有差異的蛋白質(zhì)之一，這一特點(diǎn)可能使survivin成為腫瘤標(biāo)志物之一，Tamm等采用國(guó)立癌癥研究所抗腫瘤藥物篩選程序中的60種人類腫瘤細(xì)胞株，研究了survivin在體外培養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，60種人類腫瘤細(xì)胞株均有survivin的表達(dá)，包括乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌、卵巢癌、前列腺癌、腎癌、黑色素瘤、白血病、淋巴瘤等。Ito等利用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)測(cè)定survivin mRNA在肝癌細(xì)胞株及手術(shù)切除的肝癌組織中的表達(dá)情況。Miyachi等人對(duì)Survivin在胃癌中的表達(dá)情況進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)107例胃癌標(biāo)本中有105例Survivin mRNA表達(dá)陽(yáng)性。他們認(rèn)為Survivin mRNA表達(dá)的增加出現(xiàn)在胃癌發(fā)生的早期，并且Survivin mRNA表達(dá)水平的高低可以作為判定胃癌病人淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移潛能的高低的指標(biāo)。Falleni等人對(duì)Survivin在83例早期非小細(xì)胞肺癌組織中的表達(dá)情況進(jìn)行了研究，發(fā)現(xiàn)Survivin在腫瘤標(biāo)本中的表達(dá)率為96%，明顯高于正常肺組織標(biāo)本的表達(dá)率，在所有肺癌組織學(xué)類型中鱗狀細(xì)胞癌中Survivin表達(dá)最

高，他們認(rèn)為可以將Survivin作為非小細(xì)胞肺癌的早期診斷指標(biāo)，并且也是一個(gè)重要的腫瘤治療靶點(diǎn)。Kawasaki等報(bào)道了survivin在結(jié)直腸癌的表達(dá)情況，其中91例為陽(yáng)性，癌旁正常組織均無(wú)表達(dá)。Nasu等利用RT- PCR方法測(cè)定survivin mRNA的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)在乳癌組織中其表達(dá)陽(yáng)性率為90.2%，而在癌周乳腺組織中陽(yáng)性率為23%，認(rèn)為survivin mRNA在乳腺癌診斷中是一個(gè)有用的指標(biāo)。

4 剪接變異體Survivin 2B和Survivin△Ex3在腫瘤中表達(dá)

目前已發(fā)現(xiàn)人survivin存在4個(gè)剪接變異體，共產(chǎn)生5 種蛋白亞型。Survivin-2B 轉(zhuǎn)錄物保留了2號(hào)內(nèi)含子轉(zhuǎn)變?yōu)殡[性外顯子，表現(xiàn)為69個(gè)堿基變異，Survivin-DEx-3 轉(zhuǎn)錄物去除了3號(hào)外顯子造成102個(gè)堿基缺失。剪接變體引起的序列變化導(dǎo)致相關(guān)的蛋白結(jié)構(gòu)的顯著變化，及抑制凋亡的功能的差異。Survivin 的不同亞型及不同的細(xì)胞定位可能導(dǎo)致其凋亡和抗凋亡之間的功能差異。目前一些研究表明，survivin 2B和survivin△Ex3在腫瘤的發(fā)展中顯示了不同的作用。在軟組織肉瘤及胃癌中可檢測(cè)到survivin及其剪接變異體survivin 2B和survivin△Ex3存在。在腦部腫瘤中survivin，survivin△Ex3的表達(dá)高于良勝對(duì)照組，survivin△Ex3在惡性腦腫瘤中高表達(dá)，而survivin 2B在良性組織中高表達(dá)。也有報(bào)道在胃癌（30例）和腎細(xì)胞癌（57例）中，survivin、survivin△Ex3及survivin2B均有表達(dá)，含量以survivin為主，survivin和survivin△Ex3含量隨腫瘤分期的改變無(wú)明顯變化，而survivin-2B含量卻隨腫瘤分期的增加而減少。Ling等報(bào)道在非小細(xì)胞肺癌病人中survivin- 2B 相對(duì)于survivin△Ex3的大量表達(dá)與survivin△Ex3相對(duì)于survivin- 2B 的大量表達(dá)來(lái)說(shuō)有更好的預(yù)后。

5 mRNA檢測(cè)方法

mRNA定量分析的方法主要有Northern印跡法、RT-PCR 法及實(shí)時(shí)定量熒光PCR法等。RT-PCR使RNA檢測(cè)的靈敏性提高，PCR技術(shù)的應(yīng)用提高了檢測(cè)腫瘤標(biāo)記物的水平。RT-PCR法檢測(cè)50例乳腺癌及癌旁5 cm正常乳腺組織標(biāo)本中的凋亡抑制因子survivin及其剪接變異體survivin 2B和survivin△Ex3 mRNA表達(dá)，半定量分析電泳結(jié)果。

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