王總飛,劉先本,張瑞祥,劉士磊
(鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院胸外科,河南 鄭州 450008)
非小細(xì)胞肺癌(NSCLC)在肺癌中占4/5左右,早期癥狀無特異性,臨床確診時多處于中晚期,易侵襲或轉(zhuǎn)移,患者5年生存率不高[1]。早期診治NSCLC,對提高患者生存率,改善其生存質(zhì)量具有十分重要的意義。近年來腫瘤標(biāo)記物在惡性腫瘤診斷、治療、預(yù)后評估中應(yīng)用較多[2,3],血清鐵蛋白(SF)為新型腫瘤標(biāo)志物之一,其診斷肺癌敏感度較高。胸腺激酶1(STK1)屬于DNA修復(fù)酶,參與細(xì)胞增殖過程,被發(fā)現(xiàn)在實體腫瘤中高表達(dá),且關(guān)于其對NSCLC化療效果評估的價值報道多[4,5]?;|(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)通過對細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)降解以參與腫瘤生長、侵襲與轉(zhuǎn)移[6]。本研究探討血清SF、STK1、MMP-9在NSCLC患者中的表達(dá)及臨床意義,為臨床NSCLC治療提供重要參考。
1.1 一般資料2016年2月至2018年2月我院收治的NSCLC患者80例(觀察組),均通過病理學(xué)檢查證實,術(shù)前均無放化療干預(yù),排除肝腎功能異常、免疫異常、合并其他惡性腫瘤等患者。其中男44例,女36例;年齡40~80歲[(56.38±3.29)歲];病理分型:鱗癌52例,腺癌28例;TNM分期:I期30例,II期33例,III期17例;有吸煙史30例,有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移26例。同期診治的肺部良性疾病患者65例(對照1組),疾病類型:慢性阻塞性肺疾病(COPD)42例,肺炎18例,肺結(jié)核5例。其中男36例,女29例;年齡36~77歲[(55.84±3.35)歲];有吸煙史22例。同期健康體檢正常人員50例(對照2組),其中男25例,女25例;年齡37~76歲[(55.69±3.16)歲];有吸煙史17例。三組性別、年齡、吸煙史比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0.05),有可比性。本次研究患者均自愿參與,并簽署知情同意書。
1.2 方法清晨空腹采集各組對象肘靜脈血4 ml,以每分鐘3000轉(zhuǎn)的速率(r=5 cm)離心5分鐘,血清分離后保存待測。通過酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測各組對象血清SF、MMP-9水平,試劑盒均購自上海江萊生物科技有限公司;免疫印跡增強(qiáng)化學(xué)發(fā)光法對血清STK1測定,化學(xué)發(fā)光成像分析儀及其配套試劑購自西安瑞邁分析儀器有限責(zé)任公司。
1.3 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件處理數(shù)據(jù)。計量資料行正態(tài)性和方差齊性檢驗,不符合正態(tài)分布則通過對數(shù)轉(zhuǎn)化后呈正態(tài)或近似正態(tài)分布,多組間行單因素方差分析,組內(nèi)兩兩比較行LSD-t檢驗;兩組間行獨(dú)立樣本t檢驗。Pearson相關(guān)性分析SF、MMP-9與STK1水平的關(guān)系。P< 0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
2.1 血清SF、MMP-9、STK1水平比較觀察組血清SF、MMP-9、STK1水平高于對照1組、對照2組(P< 0.05);對照1組血清SF、SKT1水平高于對照2組(P< 0.05),兩組血清MMP-9水平比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P> 0.05)。見表1。
表1 三組血清SF、MMP-9、STK1水平比較
*與對照2組比較,P< 0.05;#與對照1組比較,P< 0.05
2.2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較鱗癌、III期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者血清SF、MMP-9、SKT1水平分別高于腺癌、I~I(xiàn)I期、非淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者(P< 0.05);>60歲患者血清MMP-9水平高于≤60歲患者(P< 0.05)。見表2。
表2 不同病理特征NSCLC患者血清SF、MMP-9、STK1水平比較
2.3 相關(guān)性分析NSCLC患者血清SF與MMP-9、STK1水平均呈正相關(guān)(r=0.580、0.612,P< 0.05);血清MMP-9、STK1水平也呈正相關(guān)(r=0.563,P< 0.05)。
NSCLC患者預(yù)后與腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移密切相關(guān),而腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移復(fù)雜,新生血管形成、免疫低下、腫瘤標(biāo)志物等均可能導(dǎo)致腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移。SF屬于結(jié)合蛋白之一,為人體鐵儲備重要形式,人體各組織中SF有所表達(dá),特別是骨髓、肝臟及脾臟。有研究表明SF與惡性腫瘤發(fā)生有關(guān)[7]。范國華等[8]研究發(fā)現(xiàn)相比肺良性病變,肺癌患者血清SF水平明顯高,且與肺癌患者病理類型、腫瘤直徑、分化程度、臨床分期可能有關(guān)。認(rèn)為血清SF可能參與肺癌發(fā)生、發(fā)展過程。同時該學(xué)者提出SF不穩(wěn)定一說,假陽性率較高。對此需聯(lián)合其他指標(biāo)或檢查手段進(jìn)一步診斷。周晶等[9]研究發(fā)現(xiàn)SF對NSCLC診斷敏感度、特異度分別為62.86%、86.00%,聯(lián)合C反應(yīng)蛋白(CRP)、癌胚抗原(CEA)檢測NSCLC的敏感度、特異度分別為87.14%、51.00%??梢奡F聯(lián)合CRP、CEA能顯著提高NSCLC診斷敏感度,但不會提高其特異度。本研究結(jié)果顯示相比肺部良性疾病、健康人員,NSCLC患者血清SF水平顯著高,提示NSCLC患者多出現(xiàn)鐵超載現(xiàn)象。分析其原因:相關(guān)致癌理化因子對人體鐵代謝影響,減少鐵排出量,人體內(nèi)鐵儲備增多,此時抽血檢測血清SF升高;同時炎癥等對SF有一定的誘導(dǎo)作用,這是肺部良性疾病患者SF比健康人員高的原因之一。同時本研究發(fā)現(xiàn)NSCLC不同病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否患者血清SF水平存在顯著差異,提示血清SF明顯上升可能傾向鱗癌,且其顯著表達(dá)與NSCLC分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。
細(xì)胞基膜、細(xì)胞基質(zhì)被認(rèn)為是腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移的天然屏障,腫瘤細(xì)胞通過之且往遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移,這個過程中誘導(dǎo)機(jī)體形成蛋白酶類,對細(xì)胞基質(zhì)降解。相關(guān)報道發(fā)現(xiàn),NSCLC患者血清MMP-9水平與腫瘤浸潤、轉(zhuǎn)移密切相關(guān),可作為NSCLC預(yù)后預(yù)測重要指標(biāo)[10]。MMP-9為MMPs家族成員之一,其相對分子質(zhì)量大,它被激活后對I、V、IV、VII、X型細(xì)胞外基質(zhì)(如膠原蛋白、纖維黏連蛋白等)有不同程度的降解作用,促使腫瘤細(xì)胞易穿過基底膜浸潤結(jié)締組織基質(zhì),進(jìn)而促腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移。徐曉艷等[11]研究發(fā)現(xiàn)NSCLC組織MMP-9陽性表達(dá)率高,且其表達(dá)和患者年齡、分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究結(jié)果顯示相比肺部良性疾病患者、健康人員,NSCLC患者血清MMP-9水平顯著高,與梁乃超[12]報道一致。本研究還發(fā)現(xiàn)血清MMP-9水平可能與NSCLC患者年齡、病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。MMP-9通過對基底膜、細(xì)胞外基質(zhì)降解以促腫瘤細(xì)胞往周邊組織侵襲[13]。
STK1被證實在多種實體腫瘤中高表達(dá)。目前關(guān)于STK1與NSCLC的研究以化療效果評估為主[14]。黃仁飛等[15]對59例NSCLC患者化療4周期不同療效患者STK1水平測定,發(fā)現(xiàn)化療4周期后STK1陽性率比化療前明顯降低,且化療有效者明顯比無效者低。認(rèn)為STK1水平監(jiān)測能有效評估NSCLC患者化療效果。本研究結(jié)果顯示NSCLC患者血清STK1水平相比肺部良性疾病、健康人員顯著高,這可能與STK1參與細(xì)胞周期調(diào)控有關(guān)。有文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),STK1與腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)化有關(guān),能讓S期調(diào)控異常,G/S期時STK1水平持續(xù)上升,M期時其水平最高[16]。本研究還發(fā)現(xiàn)血清STK1水平可能與NSCLC患者病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。另外,本研究還發(fā)現(xiàn)NSCLC患者血清SF、MMP-9與STK1水平均正相關(guān)。提示血清SF、MMP-9、STK1協(xié)同促腫瘤生長、浸潤及轉(zhuǎn)移。
綜上,血清SF、MMP-9、STK1水平在NSCLC患者中高表達(dá),且其水平與腫瘤病理分型、TNM分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。血清SF、MMP-9、STK1可能協(xié)同參與NSCLC發(fā)生、侵襲及轉(zhuǎn)移。