4種蘿卜籽脂肪酸成分的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用分析

回瑞華，侯冬巖，李鐵純，刁全平

(鞍山師范學(xué)院 化學(xué)與生命科學(xué)學(xué)院,遼寧 鞍山 114007)

蘿卜又名萊菔，為十字花科植物，是一種國(guó)內(nèi)外廣泛種植的經(jīng)濟(jì)作物，在我國(guó)各地均有分布，主產(chǎn)于黑龍江、遼寧、河北、河南、浙江等地，在我國(guó)已有近三千年的種植歷史.蘿卜籽是蘿卜成熟的種子，其性平、味辛，歸肺、脾、胃經(jīng)，對(duì)治療咳嗽、多痰喘促、唾膿血、食積、氣脹氣臌、風(fēng)秘氣秘、頭痛、跌打損傷及瘀血脹痛等有顯著效果[1-2].現(xiàn)代研究表明,蘿卜籽主要含有脂肪酸、揮發(fā)油、多糖等，特別是蘿卜籽中含油率高，油中不飽和脂肪酸含量較高，含有豐富的亞油酸、亞麻酸和芥酸等[3-6].有關(guān)蘿卜籽的研究主要集中于育種、種植和藥用價(jià)值，對(duì)蘿卜籽化學(xué)成分的研究報(bào)道甚少，特別是關(guān)于蘿卜籽脂肪酸的研究少見(jiàn)報(bào)道.本文采用索氏提取法對(duì)4種蘿卜籽脂肪油進(jìn)行提取，再進(jìn)行甲酯化處理，采用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法對(duì)其脂肪酸組成及相對(duì)百分含量進(jìn)行分析，為深入開(kāi)發(fā)利用蘿卜籽提供一定的科學(xué)依據(jù).

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

HP6890GC/5973MS型氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,美國(guó)惠普公司；R2-201型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器，上海中科機(jī)械研究所；索氏提取器，江蘇高郵市教研儀器廠；KQ-250B型超聲波清洗器，昆山市超聲儀器有限公司；AL204型電子天平，梅特勒-托利多公司有限公司.

石油醚(60～90 ℃)、甲醇、正己烷及氫氧化鈉(所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水).

蘿卜籽樣品：紅蘿卜籽、青蘿卜籽、白蘿卜籽、水蘿卜籽均產(chǎn)于遼寧鞍山.

1.2 樣品的處理

將4種蘿卜籽分別放在30 ℃烘箱中干燥至恒重,粉碎過(guò)0.45 mm篩備用.

1.3 蘿卜籽油的提取

分別稱取25 g經(jīng)處理過(guò)的4種蘿卜籽粉，放入濾紙筒中，裝入索氏提取器中，加入150 mL的石油醚，回流萃取6 h，得黃色透明萃取液，除去石油醚,得到亮黃色清亮油狀液體，為蘿卜籽油.

1.4 脂肪酸的甲酯化

分別取1.3中4種蘿卜籽油各1 mL，加入正己烷4 mL,再加NaOH甲醇液(0.5 mol) 2 mL,在水浴上回流10 min,取出冷卻移至刻度試管中,加水至20 mL超聲振蕩、提取、離心，取上層清液，待做GC-MC分析[7-9].

1.5 氣相色譜-質(zhì)譜測(cè)定及分析

1.5.1 氣相色譜條件 色譜柱：HP-5彈性石英毛細(xì)管柱；升溫程序：初始溫度100 ℃，以20 ℃/min升至200 ℃，以2.5 ℃/min升至230 ℃，再以10 ℃/min升至270 ℃(保持15 min)；汽化溫度:290 ℃；進(jìn)樣量0.3 μL；載氣(He)流量:1 mL/min；分流比:50∶1；溶劑延遲3 min.

1.5.2 質(zhì)譜條件 電子轟擊離子源；離子源溫度230 ℃；四極桿溫度150 ℃；倍增器電壓1 341 V；電子能量70 eV；發(fā)射電流34.6 μA；接口溫度230 ℃；質(zhì)量掃描范圍20～500 m/z.

1.6 實(shí)驗(yàn)步驟

取經(jīng)1.4處理過(guò)的4種蘿卜籽樣品各0.3 μL,用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行進(jìn)樣分析，總離子流圖如圖1～圖4所示.

圖1 紅蘿卜籽脂肪酸甲酯的總離子流圖

圖2 青蘿卜籽脂肪酸甲酯的總離子流圖

圖3 白蘿卜籽脂肪酸甲酯的總離子流圖

圖4 水蘿卜籽脂肪酸甲酯的總離子流圖

2 結(jié)果與討論

2.1 4種蘿卜籽脂肪酸成分的組成及相對(duì)含量分析

4種蘿卜籽脂肪酸甲酯的GC/MS總離子流，通過(guò)G1701BA化學(xué)工作站數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)檢索譜圖庫(kù),結(jié)合人工譜圖解析,確定樣品脂肪酸的各個(gè)成分，按面積歸一化法進(jìn)行定量分析，分別求得各成分的相對(duì)百分含量如表1所示.

表1 4種蘿卜籽脂肪酸成分的組成及其相對(duì)含量

注：表1中A、B、C、D分別代表樣品紅蘿卜籽、青蘿卜籽、白蘿卜籽、水蘿卜籽.

2.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論

4種蘿卜籽脂肪酸鑒定結(jié)果由表1可知:紅蘿卜籽中鑒定出10種脂肪酸，共占紅蘿卜籽油總量的97.73%.飽和脂肪酸5種，占14.41%；不飽和脂肪酸5種，占83.32%，其中含量較多的9,12,15-十八碳三烯酸即亞麻酸26.41%，9,12-十八碳二烯酸即亞油酸12.09%,11-二十碳烯酸11.08%,二十二碳-13-烯酸甲酯即芥酸31.69%.

青蘿卜籽中鑒定出10種脂肪酸，共占青蘿卜籽油總量的98.99%.飽和脂肪酸5種，占12.83%；不飽和脂肪酸5種，占86.16%，其中含量較多的9,12,15-十八碳三烯酸即亞麻酸26.12%，9,12-十八碳二烯酸即亞油酸11.69%,11-二十碳烯酸12.55%,二十二碳-13-烯酸甲酯即芥酸33.82%.

白蘿卜籽中鑒定出12種脂肪酸，共占白蘿卜籽油總量的97.41%.飽和脂肪酸6種，占16.28%；不飽和脂肪酸6種，占81.13%，其中含量較多的9,12,15-十八碳三烯酸即亞麻酸23.59%，9,12-十八碳二烯酸即亞油酸11.77%,11-二十碳烯酸11.64%,二十二碳-13-烯酸甲酯即芥酸31.21%.

水蘿卜籽中鑒定出10種脂肪酸，共占水蘿卜籽油總量的98.45%.飽和脂肪酸5種，占12.79%；不飽和脂肪酸5種，占85.66%，其中含量較多的9,12,15-十八碳三烯酸即亞麻酸28.88%，9,12-十八碳二烯酸即亞油酸11.74%,11-二十碳烯酸12.82%,二十二碳-13-烯酸甲酯即芥酸30.29%.

4種蘿卜籽脂肪酸中含有豐富的不飽和脂肪酸，主要包括亞油酸 (11.69%～12.09%)、亞麻酸(23.59%～28.88%)和芥酸 (30.29%～33.82%)，4種蘿卜籽不飽和脂肪酸含量均達(dá) 81%以上，與其他常用油脂相比，4種蘿卜籽油具有明顯的不飽和性，具有開(kāi)發(fā)價(jià)值，將會(huì)受到廣泛的關(guān)注.