山東省沂水縣羊群布魯菌病基線調(diào)查

李 清,楊明清,秦 燕,蘭鄒然,陸 峰,黨安坤

(1.山東省臨沂市畜牧獸醫(yī)檢測中心,山東 臨沂 276000;2.山東省沂水縣畜牧局,山東 沂水 276400;3.山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心,山東 濟(jì)南 250022)

布魯菌病(以下簡稱布病)是由布魯菌感染動(dòng)物和人,造成生殖系統(tǒng)損害為主、可能伴隨骨胳和多器官損壞的一種人獸共患傳染病。該病可以動(dòng)物中以牛羊感染常見,豬、犬等多種動(dòng)物均可感染,以羊種布魯菌對人造成的感染最為嚴(yán)重[1],布病的流行不僅會(huì)對養(yǎng)殖業(yè)造成巨大損失,而且具有非常重要的公共衛(wèi)生意義。沂水縣位于山東省中東部,山東半島泰沂山脈與膠濰平原交界處,地勢南高北低,自南而東為起伏較大的山嶺地帶,間有若干谷狀盆地,西部、中部及北部,系大片波狀平原,屬膠萊沖積平原南部的濰河平原,其邊緣有低緩山丘分布,氣候適宜,是山東省傳統(tǒng)的畜牧業(yè)養(yǎng)殖、加工大縣,畜禽養(yǎng)殖主要以生豬、肉雞、蛋雞和特種動(dòng)物為主。近幾年來,隨著市場經(jīng)濟(jì)的發(fā)展,羊的養(yǎng)殖量較往年有擴(kuò)大的趨勢,但是以小規(guī)模養(yǎng)羊戶(年出欄500只以下)占比較大,據(jù)統(tǒng)計(jì),縣里存欄300只以下的小規(guī)模養(yǎng)羊戶占比約90%。山東省雖然被農(nóng)業(yè)部家畜布病防治區(qū)域化管理劃為一類地區(qū),但沂水縣位于膠東半島口蹄疫免疫無疫區(qū)和高致病性禽流感免疫無疫區(qū)中,動(dòng)物疫病防控政府相對比較重視,防疫基礎(chǔ)扎實(shí),對布病防控也投入了大量人力物力和財(cái)力,動(dòng)物布病沒有出現(xiàn)大范圍流行,呈穩(wěn)定控制狀態(tài)。但2010年以來,本縣人間布病病例數(shù)也有逐年增多趨勢,為了解該縣羊群布病的流行狀況,開展了針對羊布病的基線調(diào)查工作。

1 材料與方法

1.1 病例定義 參照李煥明的病例定義[2],調(diào)整后定義如下：

陽性羊：虎紅平板凝集試驗(yàn)初篩陽性,經(jīng)試管凝集試驗(yàn)復(fù)核仍為陽性的血清樣品對應(yīng)的羊只。

陽性群：至少有1只檢測為布病陽性羊的養(yǎng)羊場戶。

陽性鎮(zhèn)(街)：至少檢測出1個(gè)布病陽性群的鎮(zhèn)(街)。

1.2 研究群和抽樣單元 研究群：2017年8～9月份,根據(jù)山東省《2017年布魯菌病流行狀況基線調(diào)查》要求,對全縣18個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的1 126個(gè)羊養(yǎng)殖場戶(一個(gè)自然村的所有小規(guī)模養(yǎng)羊戶存欄為一個(gè)場群)開展了羊布病基線調(diào)查。

抽樣單元：場戶層面,抽樣單元為每個(gè)養(yǎng)羊場戶;場戶內(nèi)個(gè)體層面,抽樣單元為所有6月齡以上的羊只。

1.3 抽樣方案設(shè)計(jì) 參照徐秀榮等[3]的方法進(jìn)行調(diào)整后開展本次羊場布病基線調(diào)查,根據(jù)沂水縣各鎮(zhèn)(街)羊的存欄情況采用兩階段抽樣方法。其中有3個(gè)奶山羊場全部作為抽樣場,且場內(nèi)所有羊全部采樣普查。

第一階段：在全縣1 126個(gè)養(yǎng)羊場戶內(nèi)隨機(jī)抽取需調(diào)查的羊場群。

第一步,計(jì)算全縣需抽樣的養(yǎng)羊場戶數(shù)。用估計(jì)流行率的方法[4]抽取,全縣有1 126個(gè)場群,按95%置信水平,50%的預(yù)期流行率,7%的可接受誤差,計(jì)算公式為計(jì)算出抽樣場群為166個(gè)。

第二步,計(jì)算每個(gè)鎮(zhèn)街的抽樣場數(shù),按配額方法進(jìn)行,即根據(jù)每個(gè)鎮(zhèn)街場群數(shù)占全縣場群數(shù)的比例(各鎮(zhèn)街場數(shù)占比=場數(shù)/1126),分配這166個(gè)場群,“配額場數(shù)=166×各鎮(zhèn)街場數(shù)占比”。

第三步配額取整。

第四步從每個(gè)鎮(zhèn)街中選取要抽樣的場。根據(jù)每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的養(yǎng)羊場戶列表,用系統(tǒng)隨機(jī)抽樣方法選取每個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)要抽樣的養(yǎng)羊場戶。

第二階段：對第一階段選定的18個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)的166個(gè)養(yǎng)羊場戶進(jìn)行樣本量計(jì)算和隨機(jī)抽取。

第一步,選定場群后,如果發(fā)現(xiàn)有些場群羊只已經(jīng)出售,或者不符合抽樣要求,可以適當(dāng)進(jìn)行場的調(diào)整,采用就近選擇類似的場群即可。同樣采用估計(jì)流行率的方法抽取,按照95%的置信水平、50%的預(yù)期流行率、10%的可接受絕對誤差計(jì)算選定的18個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)166個(gè)場戶中每個(gè)場戶的抽樣羊數(shù)。

第二步,場內(nèi)隨機(jī)選羊,按系統(tǒng)隨機(jī)方法抽樣。

1.4 檢測方法 對采集血液,凝固完全后離心分離血清,用虎紅平板凝集試驗(yàn)進(jìn)行初篩,初篩陽性的樣品再用試管凝集試驗(yàn)進(jìn)行復(fù)核,復(fù)核為陽性的判定為布病抗體陽性。本次調(diào)查虎紅平板凝集試驗(yàn)和試管凝集試驗(yàn)的敏感性和特異性參照文獻(xiàn)[2]定為虎紅平板凝集試驗(yàn)的敏感性、特異性分別為95%、80%,試管凝集試驗(yàn)的敏感性、特異性分別為85%、90%,垂直聯(lián)合試驗(yàn)的敏感性、特異性分別為81%和98%。

1.5 數(shù)據(jù)分析 血清流行率的計(jì)算：根據(jù)實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果,獲知該地區(qū)羊布病的個(gè)體表觀流行率和場群表觀流行率,利用公式TP=(AP+Sp-1)/(Se+Sp-1)計(jì)算出真實(shí)流行率?？梢酝ㄟ^以下公式計(jì)算真實(shí)流行率的95%置信區(qū)間(CI)：

其中p為真實(shí)流行率,Z標(biāo)準(zhǔn)正態(tài)分布中概率0.05對應(yīng)的統(tǒng)計(jì)量,n為抽樣數(shù)量。

2 結(jié)果

2.1 3 養(yǎng)羊場基本情況 根據(jù)調(diào)查統(tǒng)計(jì)結(jié)果,該縣目前有養(yǎng)羊場戶1 126戶,存欄羊163 083只,100～299只的養(yǎng)羊場戶最多,總共有446個(gè),存欄羊78 388只,總體而言,該縣羊養(yǎng)殖以小規(guī)模散養(yǎng)為主,小規(guī)模養(yǎng)羊戶仍然以傳統(tǒng)的半放牧為主,集約化養(yǎng)殖比例較低,存欄數(shù)500以上的規(guī)模養(yǎng)殖場只有35個(gè),占比3.11%(見表1)。

表1 沂水縣不同規(guī)模養(yǎng)羊場戶數(shù)及存欄數(shù)

2.2 3個(gè)奶山羊普查結(jié)果 3個(gè)奶山羊場有1個(gè)檢出布病陽性,場表觀流行率達(dá)到33.3%(1/3)(95%CI：0.5% ～2.0%),檢測到的陽性場B場,個(gè)體表觀流行率為 0.43%(2/460)(95%CI：0.5% ～2.0%)(見表2)。

表2 2017年沂水縣羊3個(gè)奶山羊場布病血清學(xué)調(diào)查結(jié)果統(tǒng)計(jì)

2.3 羊群布病個(gè)體流行率 對全縣18個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)1 126個(gè)羊場群中的166個(gè)養(yǎng)羊場戶(包含3個(gè)奶山羊場)抽取樣本8 988份血樣(包括3個(gè)奶山羊場1 290份血樣)。經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測,共檢出6份布病血清學(xué)陽性,個(gè)體表觀流行率為0.7%(6/8 988)(95%CI：0.0% ～0.1%),計(jì)算得到的真實(shí)流行率為0.06(95%CI：0.0% ～0.1%)。 檢測到的3個(gè)陽性鄉(xiāng)鎮(zhèn),編號為13的鄉(xiāng)鎮(zhèn)表觀陽性率最高,為0.94(3/320)(95%CI：0.2% ～2.7%)(見表3)。

2.4 羊群布病群體流行率 這18個(gè)鄉(xiāng)鎮(zhèn)1 126個(gè)羊場群中的166個(gè)養(yǎng)羊場戶(包含3個(gè)奶山羊場)檢出5個(gè)養(yǎng)羊場戶(包括1個(gè)陽性奶山羊場),養(yǎng)羊場戶表觀群體陽性率為3.01%(5/166)(95%CI：1.0%～6.9%),計(jì)算得到的真實(shí)流行率為3.79%(95%CI：0.0% ～6.2%);編號為1、2 和 13 的陽性鄉(xiāng)鎮(zhèn)布病表觀群體流行率分別為33.33%(1/3)(95%CI：0.8% ～ 90.6%)、9.09%(1/11)(95%CI：0.2% ～ 41.3%) 和 27.27%(3/11)(95%CI：6.0%～61.0%),計(jì)算得到的真實(shí)流行率分別為42.17%(95%CI：0.0% ～ 100%)、11.48%(95%CI：0.0% ～ 49.8%)和 34.50%(95%CI：5.1% ～74.7%)(見表4)。

3 討論與結(jié)論

3.1 調(diào)查結(jié)論 本調(diào)查首次對沂水縣羊群布病開展基線調(diào)查,從調(diào)查結(jié)果來看,從116個(gè)抽取的養(yǎng)羊場戶中檢出5個(gè)陽性場戶,布病群體表觀流行率為3.01%(5/166)(95%CI：1.0% ～6.9%),雖然不算很高,但也需引起管理層的關(guān)注,應(yīng)認(rèn)真分析造成養(yǎng)羊場戶布病陽性的原因,以防布病進(jìn)一步在羊群中流行和暴發(fā),進(jìn)一步加強(qiáng)對職業(yè)人群關(guān)于布病 危害和個(gè)人防護(hù)方面知識和技能的宣傳和教育,防止職業(yè)人群感染布病,與此同時(shí),應(yīng)加強(qiáng)布病陽性動(dòng)物的及時(shí)處置和陽性羊場戶的監(jiān)督管理,有效防止布病擴(kuò)散傳播,并防止動(dòng)物布病感染人類。鑒于目前該縣羊群布病流行率較低,建議該縣羊群不采取布病免疫的方式控制該病,可采用直接開展監(jiān)測凈化的方式控制布病,該縣獸醫(yī)主管部門可盡早出臺羊布病凈化的日程表,在全縣開展羊布病凈化,同時(shí)做好檢疫監(jiān)督工作,嚴(yán)防外來的布病陽性動(dòng)物進(jìn)入。

表3 2017年沂水縣羊場群布病血清學(xué)調(diào)查結(jié)果統(tǒng)計(jì) (包括表1的3個(gè)奶山羊場)

表4 沂水縣羊布病群流行率統(tǒng)計(jì)

3.2 引導(dǎo)養(yǎng)羊朝集約化養(yǎng)殖轉(zhuǎn)變 從調(diào)查統(tǒng)計(jì)情況看,該縣養(yǎng)羊業(yè)仍以傳統(tǒng)散養(yǎng)為主,養(yǎng)殖方式落后,養(yǎng)殖水平總體較低,規(guī)模化養(yǎng)羊場占比不到10%,這種養(yǎng)羊方式對于羊病的預(yù)防和控制都帶來了一定難度,尤其做為接觸傳播的傳染病,如果存在大量的放養(yǎng)羊只,那么共同牧場一旦污染布魯菌,由于布魯菌外界環(huán)境中抵抗力強(qiáng),在衣服、皮、毛上可存活達(dá)5個(gè)月,在牧草中可存活2～3個(gè)月[5],就很容易引起放牧羊只感染,造成布病疫情擴(kuò)散。因此,政府部門應(yīng)積極引入羊養(yǎng)殖方式的轉(zhuǎn)變,朝著規(guī)?；图s化方向努力。

3.3 布病陽性原因分析 本次調(diào)查的布病陽性中有1個(gè)場為奶山羊場,該場羊全部從山西省購入,山西省為動(dòng)物布病一類地區(qū),在購入羊群的同時(shí),引入布病的風(fēng)險(xiǎn)也比較大,而老百姓在購入羊只時(shí)并沒有開展布病檢測,因此,該場羊布病檢出陽性與購入動(dòng)物存在一定邏輯關(guān)系,山東省今年羊布病調(diào)查中也有類似的結(jié)論[2,6]。除了這個(gè)奶山羊場布病檢測陽性以外,還有4個(gè)小養(yǎng)羊戶檢出布病陽性,其中有3個(gè)小養(yǎng)羊戶都屬一個(gè)自然村,這幾個(gè)養(yǎng)羊戶布病陽性的原因根據(jù)調(diào)查結(jié)果無法確定,當(dāng)?shù)貏?dòng)物疫控部門懷疑為配種和放牧過程中的感染,但是對配種的公羊進(jìn)行了布病跟蹤檢測,未檢出布病陽性。

3.4 奶山羊的布病應(yīng)更加關(guān)注 近年來由于羊奶價(jià)格較高,奶山羊養(yǎng)殖受到一定程度的追捧,出現(xiàn)了不少新投入的奶山羊場,有些奶山羊場還是重點(diǎn)扶貧項(xiàng)目。本次調(diào)查對該縣所有3個(gè)奶山羊場開展了普查,在其中1個(gè)場檢出了2例布病陽性,從場群流行率來看似乎不低,表觀場群流行率達(dá)到了33.33%(1/3)(95%CI：0.8% ～90.6%),由于樣本量少,還不能據(jù)此將奶山羊場的流行率定性為高流行率,但是由于奶山羊是對社會(huì)提供羊奶的,如果奶山羊攜帶布魯菌,那么這種羊提供的羊奶無疑會(huì)給布病傳播帶來可怕的后果,如果因喝羊奶造成大量人群感染布病,那么甚至?xí)鹕鐣?huì)恐慌。因此,對于有奶山羊的縣區(qū)在做了牛羊布病防控的同時(shí),應(yīng)更關(guān)注奶山羊場的布病檢測,一旦奶山羊檢出布病陽性,對陽性動(dòng)物和羊奶應(yīng)及時(shí)處置,有效防止布病擴(kuò)散傳播或感染人類。