原發(fā)性肝癌患者術(shù)后3年生存率與FHIT基因表達(dá)的關(guān)系

趙鵬偉 黃建釗 柳嚴(yán) 張佳偉 劉延 劉江偉

目前，手術(shù)是治療原發(fā)性肝癌的重要手段，但術(shù)后復(fù)發(fā)率仍較高，對(duì)預(yù)后影響非常大。已有研究證實(shí)手術(shù)治療后癌灶復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移是影響惡性腫瘤患者生存期的重要因素[1]。近年來，有研究指出脆性組氨酸三聯(lián)體(FHIT)基因?qū)?xì)胞有絲分裂、增殖存在抑制作用，可促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡[2]。然而，目前關(guān)于該基因?qū)颊哌h(yuǎn)期生存率影響的報(bào)道較少。鑒于此，本院納入180例原發(fā)性肝癌患者為研究對(duì)象，分析患者術(shù)后3年生存率與FHIT基因表達(dá)的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

資料與方法

一、納入與排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)成年患者；(2)符合中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部[3]制定的《原發(fā)性肝癌診療規(guī)范(2011年版)》中的診斷標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)臨床病理檢驗(yàn)證實(shí)；(3)無麻醉、手術(shù)禁忌，均行原發(fā)性肝癌根治術(shù)；(4)承諾配合隨訪；(5)意識(shí)清醒，無認(rèn)知障礙；(6)知情同意。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)保守治療；(2)腎、心、肺、腦等臟器嚴(yán)重?fù)p害；(3)合并其他惡性腫瘤；(4)機(jī)體全身感染。

二、一般資料

選取我院2012年5月—2015年5月收治的原發(fā)性肝癌患者180例，其中男性98例，女性82例，年齡26～75歲，平均(52.84±16.52)歲；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期72例、Ⅲ～Ⅳ期108例；分化程度：低分化47例、中分化61例、高分化72例；腫瘤部位：右半肝76例、左半肝89例、左右肝交界部位15例；腫瘤大小2～8 cm，平均(4.82±1.96)cm；病理分型：肝細(xì)胞型155例、膽管細(xì)胞型18例、混合型7例；腫瘤數(shù)目：?jiǎn)伟l(fā)95例，多發(fā)85例。

三、方法

通過入戶或電話隨訪3年，記錄患者隨訪期間的生存、死亡情況，并據(jù)此分為生存組、死亡組。收集兩組臨床特征，包括性別、年齡、分化程度、臨床分期、包膜、腫瘤部位、病理分型、肝硬化、腫瘤大小、腫瘤數(shù)目、家族史、血管侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、FHIT基因表達(dá)，分析患者術(shù)后3年生存率與臨床特征的關(guān)系。繪制ROC曲線分析FHIT基因表達(dá)對(duì)患者3年內(nèi)生存的預(yù)測(cè)價(jià)值，采用Cox回歸性分析FHIT基因表達(dá)與原發(fā)性肝癌術(shù)后3年生存率的關(guān)系。

四、FHIT基因表達(dá)檢測(cè)

采用組織芯片免疫組化染色法測(cè)定，取癌腫組織制備組織芯片，經(jīng)脫蠟、修復(fù)抗原、室溫封閉、加一抗、置入冰箱過夜、復(fù)溫、孵育、DAB顯色處理后，終止反應(yīng)，復(fù)染，返藍(lán)，脫水，封片。FHIT蛋白為顆粒狀，呈棕黃色。隨機(jī)選取5個(gè)視野給予定量分析，檢測(cè)FHIT蛋白陽(yáng)性顆粒平均灰度值?；叶戎蹬c物質(zhì)含量為反比例關(guān)系，即灰度值越小提示物質(zhì)含量越高。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

利用SPSS 20.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)患者的臨床資料進(jìn)行分析，計(jì)量資料用(±s)表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用(%)表示，采用χ2檢驗(yàn)，繪制ROC曲線分析FHIT基因表達(dá)對(duì)患者3年內(nèi)生存的預(yù)測(cè)價(jià)值，采用Cox回歸性分析FHIT基因表達(dá)與原發(fā)性肝癌術(shù)后3年生存率的關(guān)系，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

一、180例原發(fā)性肝癌患者3年內(nèi)生存、死亡情況

隨訪3年，在180例患者中，有118例生存，占65.56%，有62例死亡，占34.44%，死亡原因?yàn)椴≡钸h(yuǎn)處轉(zhuǎn)移與復(fù)發(fā)。其中1年、2年、3年生存率分別為88.33%(159/180)、76.11%(137/180)、65.56%(118/180)。

二、生存組、死亡組的臨床特征比較

生存組高分化、腫瘤Ⅰ～Ⅱ期、腫瘤<5 cm、無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移占比分別為51.69%、50.85%、65.25%、74.58%，高于死亡組的17.74%、19.35%、27.42%、32.26%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

表1 生存組、死亡組的臨床特征比較

三、FHIT基因表達(dá)對(duì)原發(fā)性肝癌患者3年內(nèi)生存的預(yù)測(cè)價(jià)值

FHIT基因灰度值預(yù)測(cè)原發(fā)性肝癌患者3年內(nèi)生存的曲線下面積為0.736(標(biāo)準(zhǔn)誤=0.041，P<0.001，95%CI=0.655～0.817)，最佳截?cái)嘀禐?5.489，敏感度為0.714，特異度為0.691。以FHIT基因灰度值<35.489時(shí)生存可能性越高，ROC曲線見圖1。

圖1 FHIT基因表達(dá)預(yù)測(cè)原發(fā)性肝癌患者3年內(nèi)生存的ROC曲線

四、FHIT基因表達(dá)及其他病理特征與術(shù)后3年生存率的關(guān)系

以表1中的各項(xiàng)臨床特征作為自變量，以隨訪3年是否生存為因變量，利用Cox回歸性分析對(duì)各變量進(jìn)行賦值，提示FHIT基因表達(dá)是原發(fā)性肝癌術(shù)后3年內(nèi)生存率的影響因素(P<0.05)。此外，分化程度、臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也與術(shù)后3年內(nèi)生存率相關(guān)(P<0.05)，見表2。

表2 FHIT基因表達(dá)及其他病理特征 與術(shù)后3年生存率的關(guān)系

討 論

近年來，有研究提示惡性腫瘤患者存在FHIT基因表達(dá)丟失、下調(diào)現(xiàn)象，這表明該基因可能對(duì)惡性腫瘤細(xì)胞有抑制作用，但具體機(jī)制尚未徹底明確[4]。本研究以原發(fā)性肝癌患者為研究對(duì)象，發(fā)現(xiàn)生存組的FHIT基因灰度值低于死亡組，這提示生存組患者的FHIT基因表達(dá)水平高于死亡組。FHIT基因蛋白是三聯(lián)組氨酸蛋白家族中的一員，它在正常人的組織中均存在表達(dá)，但在呼吸道癌、乳腺癌、消化道癌中表達(dá)均有缺失。劉學(xué)智等[5]認(rèn)為FHIT基因可通過與其底物結(jié)合發(fā)揮抑癌作用，并推測(cè)其底物復(fù)合物也許為信號(hào)物質(zhì)，這可能是該基因抑癌機(jī)制之一。徐又先等[6]研究提示FHIT基因的RNA、DNA與蛋白存在密切關(guān)聯(lián)，該基因缺失可能導(dǎo)致上述某一途徑啟動(dòng)，從而促進(jìn)惡性腫瘤病情進(jìn)展。這提示FHIT基因表達(dá)缺失與惡性腫瘤進(jìn)程相關(guān)，與本研究結(jié)論基本符合。

本研究創(chuàng)新之處在于通過繪制ROC曲線，發(fā)現(xiàn)FHIT基因灰度值對(duì)原發(fā)性肝癌3年內(nèi)生存率的預(yù)測(cè)存在一定價(jià)值，當(dāng)FHIT基因灰度值<35.489時(shí)，患者生存可能性越高。此外，Cox回歸性分析提示FHIT基因表達(dá)是原發(fā)性肝癌術(shù)后3年內(nèi)生存率的危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步證實(shí)FHIT基因表達(dá)對(duì)患者術(shù)后3年內(nèi)生存情況有顯著影響。筆者結(jié)合實(shí)踐過程，推測(cè)該基因表達(dá)對(duì)原發(fā)性肝癌預(yù)后的影響機(jī)制可能如下：(1)它可發(fā)揮Ap3A水解酶功能，而Ap3A能使蛋白激酶活性增強(qiáng)，當(dāng)FHIT基因表達(dá)降低后，Ap3A增高，從而促進(jìn)腫瘤進(jìn)展。(2)FHIT能對(duì)mRNA類似物產(chǎn)生影響，從而致其脫帽功能削弱，導(dǎo)致病情惡化。本次研究還發(fā)現(xiàn)分化程度、臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移也與術(shù)后3年內(nèi)生存率存在關(guān)聯(lián)，與陳兵等[7-8]研究結(jié)論基本相符。

綜上，本研究證實(shí)FHIT基因表達(dá)對(duì)原發(fā)性肝癌術(shù)后3年內(nèi)生存率有一定預(yù)測(cè)價(jià)值，且它與分化程度、臨床分期、腫瘤大小、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均為影響患者術(shù)后3年內(nèi)生存率的危險(xiǎn)因素，臨床需對(duì)此引起重視。除此之外，本研究也存在局限性，如納入樣本量較少，未來將擴(kuò)大樣本量對(duì)此進(jìn)行更深入分析。