2型糖尿病患者血清ChREBP水平與糖尿病腎病的相關(guān)性*

陳琰，白倩，蔡妍，趙淑杰

（吉林大學(xué)第二醫(yī)院 內(nèi)分泌科，吉 林 長(zhǎng)春 130041）

糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是糖尿病的微血管并發(fā)癥，是增加糖尿病患者疾病負(fù)擔(dān)的主要原因?；颊咭坏┻M(jìn)入臨床腎病期，腎臟損傷難以逆轉(zhuǎn)。因此，臨床需要新的治療策略來(lái)控制其進(jìn)展。ChREBP是響應(yīng)葡萄糖的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，有研究顯示高糖處理過(guò)的腎系膜細(xì)胞，ChREBP及其下游基因表達(dá)均顯著增加[1]。本研究旨在通過(guò)檢測(cè)2型糖尿病患者血清ChREBP及相關(guān)炎癥指標(biāo)水平，探討ChREBP與DN的相關(guān)性及其可能致病機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月—2018年1月于吉林大學(xué)第二醫(yī)院內(nèi)分泌科確診為2型糖尿病的患者80例作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡18～65歲；②符合1999年世界衛(wèi)生組織頒布的2型糖尿病診斷分型標(biāo)準(zhǔn)[2]。③同意參與本研究，并且資料齊全。排除標(biāo)準(zhǔn)：①1型糖尿病及特殊類型糖尿??；②妊娠、哺乳期女性；③其他類型慢性腎臟病、泌尿系感染等；④心力衰竭、高血壓；⑤糖尿病酮癥酸中毒、糖尿病高血糖高滲性綜合征及乳酸酸中毒等；⑥其他自身免疫性疾病和可能影響泌尿系統(tǒng)的疾??；⑦應(yīng)用降低尿蛋白藥物的患者?；颊甙肽陜?nèi)檢測(cè)3次24 h尿白蛋白排泄率（24 h urinary alumin excretion rata，24 h UAER），≥2次24 h UAER≥30 mg/24 h患者作為糖尿病腎病組（DN組），24 h UAER＜30 mg/24 h患者作為2型糖尿病組（T2DM組），每組40例。其中T2DM組患者男性20例，女性20例；平均年齡（47.45±14.78）歲。DN組患者男性16例，女性24例；平均年齡（51.85±7.69）歲。同時(shí)選取本院健康體檢中心同期體檢的健康群眾40例作為對(duì)照組（NC組）。其中，男性21例，女性19例；平均年齡（49.23±5.10）歲。本研究通過(guò)院倫理委員會(huì)審批，受試者簽署知情同意書。

1.2 方法

1.2.1 臨床資料收集收集研究對(duì)象的性別、年齡、病程、身高及體重等資料，并計(jì)算BMI。檢測(cè)患者空腹血糖（fasting plasma glucose，F(xiàn)PG）、糖化血紅蛋白（glycosylated hemogloin，HAb1c）、甘油三酯（Triglycerides，TG）、總膽固醇（total cholesterol，TC）、高密度脂蛋 白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL-C）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL-C）、尿素氮（blood urea nitrogen，BUN）、血清肌酐（serum creatinine，Scr）、空腹胰島素（fasting insulin，F(xiàn)INS）及24 h UAER，計(jì)算腎小球?yàn)V過(guò)率（eGFR）=186×Scr-1.154×年齡-0.203×（0.742，如果是女性），計(jì)算穩(wěn)態(tài)胰島素評(píng)價(jià)指數(shù)（homeostasis modeall assessment of insulin resistance，HOMA-IR）=FPG×FINS/22.5。

1.2.2 血清ChREBP及其他炎癥指標(biāo)檢測(cè)受試者禁食8～10 h，采集肘靜脈血，室溫靜置2 h后3 500 r/min離心10 min，分離上層血清，置于-80℃冰箱中備用。采用長(zhǎng)沙達(dá)爾鋒生物科技有限公司bioRike酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）試劑盒檢測(cè)血清指標(biāo)，ChREBP檢測(cè)范圍2.5～200.0 ng/ml，檢測(cè)敏感性≤1.25 ng/ml；HMG-1檢測(cè)范圍250～20 000 pg/ml；檢測(cè)敏感性≤125 pg/ml；白細(xì)胞介素-1β（Interleukin 1β，IL-1β）檢測(cè)范圍1～80 pg/ml，檢測(cè)敏感性≤0.5 pg/ml；白細(xì)胞介素-6（Interleukin 6，IL-6）檢測(cè)范圍0.6～48.0 pg/ml，檢測(cè)敏感性≤0.3 pg/ml；腫瘤壞死因子α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）檢測(cè)范圍1～80 pg/ml，檢測(cè)敏感性≤0.5 pg/ml。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）或中位數(shù)和四分位數(shù)間距[M（P25，P75）]表示，比較用t檢驗(yàn)、方差分析或H檢驗(yàn)；相關(guān)分析用Spearman法；影響因素的分析用多因素Logistic回歸模型，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組一般資料和生化指標(biāo)比較

各組患者的年齡比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。各組病程、BMI、FPG、HAb1c、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C、24 h UAER、IL-1β、IL-6、TNF-α、ChREBP、HMG-1、eGFR及HDL-C比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），病程、BMI、FPG、HbA1c、FINS、HOMA-IR、TG、TC、LDL-C、24hUAER、IL-1β、IL-6、TNF-α、ChREBP、HMGB-1的水平在DN組最高，NC組最低；eGFR、HLD-C水平在NC組最高。見(jiàn)表1。

表1 各組一般資料和生化指標(biāo)比較 （n =40）

2.2 血清ChREBP水平與其他指標(biāo)的相關(guān)性

ChREBP與eGFR呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.694，P=0.363），與24 h UAER、IL-1β、IL-6、TNF-α及HMG-1呈正相關(guān)（rs=0.596、0.711、0.650、0.684和0.515，均P=0.000）。

2.3 2型糖尿病患者DN發(fā)病的Logistic回歸分析

單因素Logistic回歸分析顯示，年齡、病程、HOMA-IR、24 h UAER及ChREBP均與糖尿病腎病發(fā)病存在關(guān)聯(lián)（P＜0.05）。將以上因素作為自變量納入多因素Logistic回歸，結(jié)果顯示：病程、HOMAIR、24 h UAER及ChREBP是糖尿病患者腎臟病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素（P＜0.05）。病程越長(zhǎng)，HOMA-IR、24 h UAER及ChREBP水平越高，患糖尿病腎病的風(fēng)險(xiǎn)越大。見(jiàn)表2、3。

表2 糖尿病患者DN發(fā)病單因素Logistic回歸分析參數(shù)

表3 糖尿病患者DN發(fā)病多因素Logistic回歸分析參數(shù)

3 討論

隨著糖尿病發(fā)病率的迅猛增長(zhǎng)，DN的發(fā)病率亦呈快速上升趨勢(shì)，據(jù)統(tǒng)計(jì)40%糖尿病患者合并糖尿病腎臟疾病，在世界范圍內(nèi)已成為終末期腎臟病的首要原因[3-7]。ChREBP是響應(yīng)葡萄糖的一個(gè)關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，在高糖條件下，ChREBP蛋白的表達(dá)上調(diào)，其自身的去磷酸化程度、糖基化程度增加，并轉(zhuǎn)位進(jìn)入細(xì)胞核，促進(jìn)基因的轉(zhuǎn)錄[8-9]。有研究發(fā)現(xiàn)，高糖激活ChREBP途徑，誘導(dǎo)低氧因子HIF1、脂質(zhì)合成基因及纖維化相關(guān)基因的表達(dá)可能參與DN的發(fā)生[10-11]。本研究檢測(cè)健康群眾、糖尿病和DN患者血清ChREBP的濃度，結(jié)果顯示DN組患者血清ChREP水平較NC組和T2DM組升高，ChREBP與eGFR呈負(fù)相關(guān)，與24 h UAER呈正相關(guān)。Logistic回歸分析顯示，病程、HOMA-IR、24 h UAER及ChREBP是糖尿病患者腎臟病變的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，ChREBP水平越高，患糖尿病腎病的風(fēng)險(xiǎn)越大，與上述研究結(jié)果大致相符。

炎癥反應(yīng)在高糖環(huán)境下可加重胰島素抵抗，并可促進(jìn)糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生[12]。有研究證實(shí)，炎癥反應(yīng)在DN的發(fā)展過(guò)程中起核心作用[13]。在DN發(fā)病早期，巨噬細(xì)胞和T細(xì)胞即在腎小球和腎間質(zhì)中積聚，同時(shí)激活的巨噬細(xì)胞和腎臟內(nèi)主要的炎癥細(xì)胞產(chǎn)生大量的促炎、促纖維化和抗血管生成因子等，包括TNF-α、IL-1、IL-6、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β、血小板衍生生長(zhǎng)因子及血管緊張素Ⅱ等[14-17]。HMG-1是一種核內(nèi)非組蛋白，其可在免疫激活和細(xì)胞死亡等過(guò)程中發(fā)生轉(zhuǎn)錄后修飾并轉(zhuǎn)移到細(xì)胞外參與炎癥反應(yīng)。有研究表明，HMG-1激活MAPK、NF-κb及PKC等信號(hào)通路，促進(jìn)炎癥因子TNF-α、IL-6及IL-1β的表達(dá)，導(dǎo)致腎臟損傷[18-20]。筆者前期研究發(fā)現(xiàn)，2型糖 尿病患者血清HMG-1水平與IL-6、TNF等炎癥因子的水平呈正相關(guān)；高糖可以顯著誘導(dǎo)SV40-MES-13細(xì)胞中HMG-1表達(dá)；干擾HMG-1可顯著改善高糖引發(fā)的炎癥因子表達(dá)[21]。亦有研究驗(yàn)證阻斷HMG1與其受體之間相互作用，能夠延緩STZ誘導(dǎo)的糖尿病小鼠發(fā)展為糖尿病腎病的進(jìn)程[22]。因此本研究還檢測(cè)了HMG-1、IL-1β、IL-6及TNF-α的濃度，結(jié)果顯示DN組患者血清IL-1β、IL-6、TNF-α及HMG-1濃度較NC組和T2DM組升高，與上述研究結(jié)果一致。相關(guān)性分析提示ChREBP濃度與IL-1β、IL-6、TNF-α及HMG-1水平呈正相關(guān)。因此，筆者認(rèn)為ChREBP可能通過(guò)誘導(dǎo)HMG1及促進(jìn)炎癥因子、促纖維因子的表達(dá)和釋放，從而導(dǎo)致DN的發(fā)生。

綜上所述，2型糖尿病患者血清ChREBP水平升高，DN患者更高。因此，血清ChREBP水平升高可能與DN發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。