豬丁型冠狀病毒的分析與診斷方法研究

陳少飛

摘 要 豬丁型冠狀病毒病是新近報(bào)道的豬腸道病毒，其屬內(nèi)病毒基因組特征與其他冠狀病毒屬存在差異。該病毒主要表現(xiàn)為引起嚴(yán)重的腸炎并伴有小豬腹瀉、嘔吐，導(dǎo)致仔豬高死亡率，影響成年豬的生產(chǎn)。該病毒臨床癥狀與豬流行性腹瀉極為相似，臨床較難區(qū)分。本文主要對(duì)豬丁型冠狀病毒的特點(diǎn)與診斷方法進(jìn)行分析。

關(guān)鍵詞 豬丁型冠狀病毒；臨床癥狀；診斷方法

豬丁型冠狀病毒又稱為德爾塔冠狀病毒，是新近報(bào)道呈現(xiàn)世界流行性的豬腸道病毒病。豬丁型冠狀病毒主要感染整段小腸，尤其是空腸、回腸，引起一種臨床特征表現(xiàn)為脫水、水樣腹瀉、嘔吐的疾病。我國(guó)廣泛存在豬流行性腹瀉，但關(guān)于豬丁型冠狀病毒感染報(bào)道較少。2012年豬丁型冠狀病毒在香港報(bào)道。2014年該病在美國(guó)首次報(bào)道、廣泛流行。因豬丁型冠狀病毒與豬流行性腹瀉臨床發(fā)病情況極為相似，但發(fā)病癥狀相對(duì)較輕，臨床較難區(qū)分。故本文對(duì)豬丁型冠狀病毒的特點(diǎn)、診斷方法做一探討。

1 豬丁型冠狀病毒的特點(diǎn)

冠狀病毒是一種有囊膜的單股正鏈RNA病毒，擁有已知RNA病毒中最大的基因組序列長(zhǎng)度。國(guó)際病毒分類委員會(huì)將該冠狀病毒亞科分為甲型冠狀病毒、乙型冠狀病毒、丙型冠狀病毒、丁型冠狀病毒。丁型冠狀病毒能夠感染鳥類、哺乳動(dòng)物。豬丁型冠狀病毒病是新近報(bào)道呈現(xiàn)世界流行性的豬腸道病毒病，2012年香港大學(xué)研究人員發(fā)現(xiàn)豬丁型冠狀病毒。此后美國(guó)、韓國(guó)、中國(guó)大陸等相繼發(fā)現(xiàn)該病毒，并獲得該病毒本土毒株的全長(zhǎng)序列。

豬丁型冠狀病毒與甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒和豬傳染性胃腸炎病毒類似，能夠引起豬腸道疾病，導(dǎo)致腹瀉、脫水、水樣腹瀉，其發(fā)病率和死亡率高達(dá)50%-100%，導(dǎo)致哺乳階段仔豬高死亡率，并影響成年豬生產(chǎn)。自2013年起，新出現(xiàn)的甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒、豬丁型冠狀病毒已遍布美國(guó)，造成大量豬死亡。目前國(guó)際上對(duì)該病毒的研究較為重視，但國(guó)內(nèi)該病毒的暴發(fā)和流行報(bào)道較少。

2 豬丁型冠狀病毒的診斷

2014年在俄亥俄州農(nóng)業(yè)部動(dòng)物疫情診斷實(shí)驗(yàn)室收到癥狀與甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒類似的腹瀉母豬、死亡小豬的糞便及小腸樣本，但該事件中小豬的死亡率低于甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒感染死亡率。樣本檢測(cè)提示無(wú)甲型冠狀病毒屬的豬流行性腹瀉病毒、豬傳染性胃腸炎病毒、輪狀病毒、沙門氏菌感染。進(jìn)一步進(jìn)行電鏡檢查結(jié)果提示有冠狀病毒樣病毒顆粒。故研究者設(shè)計(jì)了特異性檢測(cè)丁型冠狀病毒的RT-PCR檢測(cè)方法，成功檢測(cè)到了樣本中豬丁型冠狀病毒的存在。

此外，也有研究者建立熒光定量PCR方法進(jìn)行豬丁型冠狀病毒的檢測(cè)。與普通PCR檢測(cè)相比，熒光定量PCR具有精準(zhǔn)、快速、靈敏的特點(diǎn)，并且能夠?qū)崿F(xiàn)病毒定量分析。除了上述PCR檢測(cè)方法，新近研發(fā)的一種抗PDCoV IgG間接ELISA檢測(cè)方法也開始用于豬丁型冠狀病毒的診斷，獲得了較高的靈敏度和特異性。在此基礎(chǔ)上有學(xué)者建立了基于重組N蛋白檢測(cè)PDCoV抗體的間接ELISA檢測(cè)法，也有學(xué)者應(yīng)用間接免疫熒光檢測(cè)法檢測(cè)細(xì)胞中的丁型冠狀病毒，這兩種方法能顯示病毒感染細(xì)胞、部位等，對(duì)于體外感染、病理研究等有重要意義。

3 結(jié)束語(yǔ)

豬丁型冠狀病毒是近年來發(fā)現(xiàn)的豬腸道病毒，相關(guān)研究報(bào)道較少。但隨著該病毒在美國(guó)的流行，關(guān)于該病毒流行病學(xué)、序列分析、致病性等研究日趨增多。目前許多學(xué)者已建立了不同的豬丁型冠狀病毒實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法，也獲得部分國(guó)家和地區(qū)的流行情況，但尚缺乏穩(wěn)定的商品化檢測(cè)試劑盒。故在今后的研究中，豬丁型冠狀病毒高效臨床檢測(cè)方法、疫苗研發(fā)等將成為重點(diǎn)，以降低豬丁型冠狀病毒對(duì)養(yǎng)豬產(chǎn)業(yè)帶來的威脅。

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