生物肥SUNRED 促進(jìn)百合著色的生理指標(biāo)初探

袁以福

（景東縣大街鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心 云南景東 676200）

“SUNRED”是一種光合菌劑類的微生物肥料，由意大利Biolchim S.p.A.百倍強(qiáng)生化科技公司生產(chǎn)，主要成分是3.0%全氮、7.0%氧化鉀以及24.0%有機(jī)萃取物質(zhì)，具有增加果實(shí)、花卉著色的強(qiáng)度和范圍，增加糖含量等特點(diǎn)。與生長(zhǎng)激素相比，SUNRED 效果明顯且無(wú)副作用。該肥料為國(guó)內(nèi)新近引進(jìn)，目前在果樹上處于嘗試應(yīng)用階段，在花卉上尚沒(méi)有研究和應(yīng)用的報(bào)道。本試驗(yàn)以三種不同濃度SUNRED 處理“羅賓娜”百合，探討有機(jī)液體肥SUNRED 對(duì)百合著色的生理機(jī)理，旨在為高溫、高濕、寡日照地區(qū)百合生產(chǎn)上調(diào)控著色提供理論基礎(chǔ)和技術(shù)參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)園地情況

本試驗(yàn)在四川農(nóng)業(yè)大學(xué)雅安校本部農(nóng)場(chǎng)進(jìn)行，地處東經(jīng)102°51′～ 103°12′，北緯29°40′～ 30°14′，冬無(wú)嚴(yán)寒，夏無(wú)酷暑；濕度大，日照少。年均日照1005 h；年均氣溫16.1℃，最高年為16.9 ℃，最低年為15.4 ℃。全年1月最冷，月平均氣溫6.1 ℃；7 月最熱，月平均氣溫25.3 ℃。年均雨日218 d，年降水量1800 mm 左右，屬于亞熱帶濕潤(rùn)季風(fēng)氣候。

1.2 試驗(yàn)材料

供試品種為粉紅系“羅賓娜”百合，種球購(gòu)置于浙江虹越花卉有限公司。將3 ℃低溫貯藏的種球在15 ℃下催根發(fā)芽（芽長(zhǎng)1～2 cm），于2014 年3 月底至4 月初定植于口徑25 cm、高30 cm 的花盆中（以腐葉土∶珍珠巖=3 ∶1 作為栽培基質(zhì)，基質(zhì)提前用800～600 倍50%多菌靈可濕性粉劑消毒，每盆裝基質(zhì)4.5 L，每盆種一個(gè)種球），種好后澆足水分，以后進(jìn)行相同的管理。

1.3 試驗(yàn)方法

1）試驗(yàn)處理。在百合綠蕾期（花序基部第一個(gè)花蕾已停止伸長(zhǎng)，花被片綠色）分別用1000 倍、800 倍、600 倍SUNRED 溶液均勻噴布整個(gè)植株，對(duì)照組用等體積的清水噴布。每個(gè)處理10 盆，重復(fù)3 次，共120 盆。同時(shí)對(duì)各處理選擇生長(zhǎng)一致的基部花蕾掛牌，便于后期測(cè)定花徑和單花壽命。

2）采樣。分別于噴施生物肥SUNRED 后百合的初花期（外輪花被片1～2 枚展開）、盛花期（花被片全部展開，花藥全部展開）上午9:00～12:00，采樣各處理內(nèi)外輪花瓣（掛牌花不采）。采樣后立即用濕紗布包好，用冰盒帶回實(shí)驗(yàn)室，將各樣內(nèi)外輪花瓣的上部、中部、基部剪碎，混合稱重，液氮處理后用干凈的密封塑料袋分裝好后置于-70 ℃冰箱中待處理。

1.4 試驗(yàn)指標(biāo)的測(cè)定

1）形態(tài)指標(biāo)。①色澤指數(shù)：在百合初開期及盛開期，每處理隨機(jī)選取3 朵生長(zhǎng)狀況一致的花朵，將內(nèi)外輪花瓣混合后用CR-10 型色彩色差計(jì)測(cè)定每片花瓣近中脈處的色澤參數(shù) L、a、b、C、 h。其中， L 表示光澤明亮度，取值范圍為[0，100]， L越大，表示花瓣亮度越高；a、b 表示顏色組分，取值范圍為[-40，+40]，+a 為紅色，-a 為綠色，+b 為黃色，-b 為藍(lán)色，絕對(duì)值越大，顏色越深；C 為色澤飽和度， h 為色度角，則百合花瓣著色指數(shù)CIRG=（1800- h0）/（ L+C），采用花瓣顏色指數(shù)的方法評(píng)價(jià)色澤：CIRG＜2 為黃綠，2＜CIRG＜4為粉紅，4＜CIRG＜5 為紅色，5＜CIRG＜6 為深紅，CIRG＞6 為藍(lán)黑。②花徑：在盛開期對(duì)掛牌的花朵用游標(biāo)卡尺測(cè)定花朵完全展開時(shí)的最大寬度。③單株花朵數(shù)：謝花期統(tǒng)計(jì)不同處理單株花朵數(shù)量。④單花壽命：記錄掛牌花朵初開時(shí)間及謝花時(shí)間，單花壽命=謝花時(shí)間-初開時(shí)間。⑤盲花率：每個(gè)處理隨機(jī)調(diào)查3 株，記錄正?；亢兔せ?。盲花率（%）=[盲花量/（盲花量+正?；浚×100%

2）生理指標(biāo)：①總糖、類胡蘿卜素和花色素苷含量：采用蒽酮比色法測(cè)花瓣總糖含量；用分光光度法測(cè)定類胡蘿卜素含量，參照熊慶娥等的方法測(cè)定花色素苷含量。②活體葉綠素含量：在噴施生物肥SUNRED 后第7 d、14 d 上午，用葉綠素計(jì)對(duì)各處理百合的3 片葉片的同一部位（由頂部向下數(shù)）進(jìn)行活體葉綠素含量測(cè)定。③苯丙氨酸解氨酶（PAL）的提取與活性測(cè)定：PAL 的提取與活性測(cè)定按照李云萍等的方法并略有改進(jìn)，取0.5 g百合材料加入5 mL 的提取液[0.2 M 硼酸鹽緩沖液（pH8.8）,0.018 Mβ-巰基乙醇],0.1 gPVP（以去除酚類物質(zhì)對(duì)顏色的干擾）,加少量石英砂,于-20℃預(yù)冷的研缽中冰浴研磨,經(jīng)4 ℃10 000 rpm 離心20 min,取上清液作為粗酶液,用于PAL 活性測(cè)定。取1 mL 粗酶液加2 mL 蒸餾水再加1 mL 反應(yīng)底物（0.02M 的 L-苯丙氨酸）,對(duì)照不加底物,加l mL蒸餾水，37 ℃溫水浴30 min,加0.5 mL35%的三氯乙酸（TCA）終止反應(yīng)，再加入1.55 g 硫酸銨使溶液的飽和度達(dá)80%，10 000 rpm 離心10 min 去除變性蛋白,于290 nm 波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度。以1 mL 反應(yīng)液每小時(shí)在290 nm 處吸光度變化0.01 為1 個(gè)酶活單位,用U 表示。實(shí)驗(yàn)操作重復(fù)3 次。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析方法

試驗(yàn)數(shù)用Excel 和DPS 軟件進(jìn)行處理，進(jìn)行SSR 差異顯著性分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度SUNRED 處理對(duì)百合鮮花形態(tài)指標(biāo)的影響

1）花徑、單花壽命、盲花率、花量：由表1 得知，不同處理下花徑及單花花期由小到大為：600倍＜清 水＜1000 倍＜800 倍，說(shuō) 明1000 倍 和800倍SUNRED 處理可顯著增大百合花徑，延長(zhǎng)單花花期；其中800 倍處理平均花徑增大2.97 cm，增長(zhǎng)了16.67%，單花壽命延長(zhǎng)1.41 d，但較高濃度的SUNRED 處理反而降低百合的花徑和花朵開放時(shí)間。各處理下百合盲花率差異顯著，盲花率600倍＞清水＞1000 倍＞800 倍，表明1000 倍及800 倍SUNRED 處理可明顯降低“羅賓娜”的盲花率，提高成花率，而600 倍SUNRED 處理則顯著提高了盲花率。各處理下單株花朵數(shù)差異不顯著，說(shuō)明SUNRED 處理對(duì)百合單株花量無(wú)顯著影響。

2）色澤參數(shù)：如表2 和表3 所示，百合初開期，不同處理下百合花瓣的色澤參數(shù)均存在顯著差異。與對(duì)照相比，1000 ～600 倍SUNRED 處理百合花瓣的a、C 值顯著增大，即百合花瓣顏色組分a及色澤飽和度為：清水＜ 600 倍＜ 1000 倍＜ 800 倍，而光澤明亮度及顏色組分b 與對(duì)照相比均降低。隨著百合花朵的開放，盛開期各處理的a、C值均增大，L 值降低，表明百合花瓣的亮度降低，紅色加深，色澤飽和度提高，且800 倍處理極顯著高于對(duì)照。

3） 著色指數(shù)（CIRG 值）。著色指數(shù)（CIRG 值）為百合花瓣著色指數(shù)，如表4 所示，各處理CIRG值在百合開放過(guò)程中呈增加趨勢(shì)，表明百合花瓣著色指數(shù)提高，顏色加深。百合花朵初花期和盛花期，花瓣的CIRG 值均表現(xiàn)為：800 倍＞1000 倍＞600 倍＞清水，且差異達(dá)到顯著或極顯著水平，說(shuō)明SUNRED 處理可顯著提高百合花瓣的著色指數(shù)，其中800 倍SUNRED 處理百合花瓣著色指數(shù)最高，著色最均勻。

2.2 不同濃度SUNRED 對(duì)百合葉片活體葉綠素含量的影響

葉片活體葉綠素含量多少直接影響葉片光合作用及觀賞效果。由表5 可知，與對(duì)照相比，噴施SUNRED 1000 倍和800 倍均能極顯著提高百合葉片的活體葉綠素含量，其中SUNRED 800 倍處理下葉片的活體葉綠素含量增加最多，比對(duì)照增長(zhǎng)14.06%，而噴施SUNRED 600 倍的處理葉片活體葉綠素含量反而比對(duì)照低。說(shuō)明1000 ～800 倍SUNRED 處理可顯著提高百合葉片活體葉綠素含量，而高濃度SUNRED 對(duì)百合生長(zhǎng)產(chǎn)生負(fù)面影響，抑制了葉綠素的合成。

表1 不同濃度SUNRED 處理對(duì)百合花徑、單株花朵數(shù)、花期、盲花率的影響

表2 不同濃度SUNRED 對(duì)百合花初開期色澤參數(shù)的影響

表3 不同濃度SUNRED 對(duì)百合花盛開期色澤參數(shù)的影響

表4 不同濃度SUNRED 對(duì)百合花瓣著色指數(shù)的影響

2.3 不同濃度SUNRED 對(duì)百合花瓣主要生理指標(biāo)的影響

由表6 和表7 可知，與對(duì)照相比，不同濃度SUNRED 處理后在百合初開期和盛開期花瓣中的可溶性糖含量、類胡蘿卜素含量及花青苷含量均顯著或極顯著增加，且花瓣可溶性糖含量、類胡蘿卜素含量及花青苷含量800 倍＞1000 倍＞600 倍＞清水，噴施SUNRED 能有效促進(jìn)花瓣可溶性糖積累、類胡蘿卜素及花青苷的合成，其中以噴施SUNRED800倍效果最好。

2.4 不同濃度SUNRED 對(duì)百合花瓣苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性的影響

PAL 活性測(cè)定結(jié)果表明，著色程度深的百合花瓣，其花青素含量較高，PAL 活性也較高（表8），其中與對(duì)照相比，不同處理同一時(shí)期噴施SUNRED800 倍處理下PAL 酶活性最高，相同處理不同時(shí)期噴施后7 d花瓣P(guān)AL酶活性比對(duì)照增長(zhǎng)2.43倍，噴施后14 d 花瓣P(guān)AL 酶活性比對(duì)照增長(zhǎng)2.81倍。而不同處理同一時(shí)期噴施600 倍的處理花瓣P(guān)AL 酶活性反而比1000 倍低，說(shuō)明1000 ～800 倍SUNRED 處理可顯著提高百合花瓣苯丙氨酸解氨酶活性，而高濃度SUNRED 對(duì)百合花瓣P(guān)AL 酶活性影響沒(méi)有低濃度明顯。

3 討論與小結(jié)

試驗(yàn)結(jié)果顯示，同一時(shí)期百合花徑、著色指數(shù)、單花壽命均為800 倍處理下最大，其次是1000倍處理，且800 倍處理下百合盲花率最低，與對(duì)照差異極顯著。600 倍SUNRED 處理與對(duì)照相比減小了花徑，但差異不顯著，同時(shí)顯著縮短了單花花期，提高了盲花率，可能是因?yàn)闈舛冗^(guò)大抑制了百合的生長(zhǎng)。試驗(yàn)結(jié)果顯示，不同濃度SUNRED 處理后在相同時(shí)期百合花瓣中的可溶性糖含量、類胡蘿卜素含量及花青苷含量均增加，且800 倍＞1000倍＞600 倍＞清水，說(shuō)明噴施SUNRED 能有效促進(jìn)花瓣可溶性糖積累、類胡蘿卜素及花青苷的合成，其中以噴施SUNRED800 倍效果最好。

表5 不同濃度SUNRED 處理下百合葉片葉綠素含量變化 （單位：mg/g.FW）

表6 不同濃度SUNRED 對(duì)百合花初開期主要生理指標(biāo)的影響

表7 不同濃度SUNRED 處理對(duì)百合盛開期生理指標(biāo)的影響

表8 不同濃度SUNRED 處理下百合花瓣苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性變化（單位：U·g-1FW ）

本文的研究結(jié)果表明，百合花瓣的花青素的合成與PAL 活性密切相關(guān)，著色程度深的花瓣，其花青素的含量高，PAL 活性也較高，花青素的含量隨PAL 酶活性的升高而增加，且噴施SUNRED 之后，同一時(shí)期不同處理下低濃度處理對(duì)PAL 酶活性影響更顯著。

綜上所述，800 倍SUNRED 處理下的百合著色效果最好，鮮花品質(zhì)最高；1000 倍SUNRED 也可提高百合著色及鮮花品質(zhì)，但效果不如800 倍好；而600 倍SUNRED 對(duì)百合著色影響沒(méi)有低濃度明顯，導(dǎo)致葉片著色及花徑、單花花期、活體葉綠素含量均低于對(duì)照，但花色較對(duì)照好。因此，在南方陰濕地區(qū)可通過(guò)在綠蕾期對(duì)百合噴布800 倍SUNRED 來(lái)實(shí)現(xiàn)切花百合的優(yōu)質(zhì)生產(chǎn)。