二氫槲皮素對(duì)心肌缺血大鼠血液流變學(xué)相關(guān)指標(biāo)的影響

尚艷琦，于 瑩，顧媛媛*，梁 慧，田 明，韓玉生，劉 旭，代巧妹，周忠光

（1.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)藥研究院，哈爾濱 150040；2.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實(shí)驗(yàn)中心，哈爾濱 150040；3.黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，哈爾濱 150040）

缺血性心臟病（ischemic heart disease，IHD），是指因冠狀動(dòng)脈粥樣硬化使血管管腔狹窄或阻塞，或因冠狀動(dòng)脈功能改變導(dǎo)致心肌缺血缺氧甚至壞死而引起的心臟病。隨著生活水平的提高，缺血性心臟病的發(fā)病率也在逐年上升，嚴(yán)重威脅著人類健康甚至危及生命[1]。因此，對(duì)于心肌缺血損傷的預(yù)防和治療顯得極為重要。二氫槲皮素（Dihydroquercetin，DDQ）是一種多酚類黃酮化合物[2]，能夠提高心肌組織中SOD的活性，并抑制脂質(zhì)過(guò)氧化過(guò)程，降低脂質(zhì)過(guò)氧化物MDA 活性，減輕氧自由基對(duì)心肌的損傷，保護(hù)缺血性心肌，治療IHD[3]。然而關(guān)于二氫槲皮素對(duì)心肌缺血模型大鼠血液流變學(xué)是否有影響未見文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，本研究采用腹腔注射異丙腎上腺素制備急性心肌缺血模型，檢測(cè)DDQ 對(duì)心肌缺血模型大鼠血液流變學(xué)的影響，為DDQ 治療心肌缺血的臨床應(yīng)用提供藥理學(xué)資料。

1 材料

1.1 儀器 LBY-N7500B 全自動(dòng)血液流變儀（北京普利生儀器有限公司）；KDC-160R 高速冰凍離心機(jī)（科大創(chuàng)新股份有限公司中佳分公司）；CPA225D 電子分析天平（賽多利科學(xué)儀器北方有限公司）。

1.2 藥品與試劑 異丙腎上腺素（美國(guó)Sigma-Aldrich公司），地奧心血康（成都地奧制藥集團(tuán)有限公司，產(chǎn)品批號(hào)：1709054），二氫槲皮素（上海源葉生物科技有限公司）。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 SD 大鼠60 只，雄性，體質(zhì)量220 ～250 g。由黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)GLP 提供，許可證號(hào)：SCXK（黑）2013-004。

2 方法

2.1 分組、給藥及造模 將60 只SD 大鼠隨機(jī)分成空白組、模型組、地奧心血康組（54 mg/kg）、二氫槲皮素高（60 mg/kg）、中（30 mg/kg）、低劑量組（15 mg/kg），每組10 只，所有大鼠連續(xù)灌胃14 d，1 次/d。二氫槲皮素采用0.4%羧甲基纖維素鈉配制，空白組與模型組給予等體積羧甲基纖維素鈉為對(duì)照。第12 天開始，除空白組外，其余各組均按照5 mg/kg的劑量腹腔注射ISO，1 次/d，連續(xù)3 d。

2.2 檢測(cè)指標(biāo) 各組大鼠于造模后24 h 腹腔注射10%水合氯醛麻醉，肝門靜脈取血5 mL 于肝素抗凝管中，混勻，采用全血細(xì)胞分類計(jì)數(shù)儀測(cè)定血細(xì)胞分類情況及其參數(shù)值，其中包括血漿黏度、全血黏度、紅細(xì)胞積壓、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、紅細(xì)胞變形指數(shù)、紅血沉方程K值、纖維蛋白原。

2.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理。計(jì)量資料以（±s）表示，組間比較采用方差分析，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 二氫槲皮素對(duì)全血黏度、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積的影響 見表1。

3.2 二氫槲皮素對(duì)全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、紅細(xì)胞變形指數(shù)的影響 見表2。

3.3 二氫槲皮素對(duì)血沉方程K 值及纖維蛋白原的影響 見表3。

表1 對(duì)全血黏度、血漿黏度和紅細(xì)胞壓積的影響（± s，n = 6）

注：與空白組比較，# P ＜0.05，## P ＜0.01；與模型組比較，△P ＜0.05，△△P ＜0.01

組 別 劑量 全血黏度/mPa·s 血漿黏度/mPa·s 紅細(xì)胞壓積/%低切（1 /3） 中切（1 /50） 高切（1 /180）空白組-20.28±5.68 7.37±0.56 4.92±0.38 2.01±0.56 47.85±5.66模型組-26.27±7.63 8.53±0.75## 5.60±0.39# 3.29±0.11## 55.14±1.86##地奧心血康組 54 mg/kg 22.04±3.96 7.61±0.76△△ 5.13±0.40△ 2.27±0.13△△ 49.71±1.11△△DDQ 高劑量組 60 mg/kg 23.66±6.84 7.64±0.93△△ 5.26±0.38△ 2.47±0.09 51.85±1.95 DDQ 中劑量組 30 mg/kg 25.46±8.61 7.84±0.76△ 5.36±0.27△ 2.43±0.02 50.14±2.47 DDQ 低劑量組 15 mg/kg 25.28±8.09 7.89±1.03△ 5.44±0.49 2.45±0.01 50.85±3.67

表2 對(duì)紅細(xì)胞參數(shù)和全血還原黏度的影響（± s ，n = 6）

表2 對(duì)紅細(xì)胞參數(shù)和全血還原黏度的影響（± s ，n = 6）

注：與空白組比較，# P ＜0.05，## P ＜0.01；與模型組比較，△P ＜0.05，△△P ＜0.01

組 別 劑量 全血還原黏度/mPa·s 紅細(xì)胞聚集指數(shù)（EAI）紅細(xì)胞剛性指數(shù)（IR）紅細(xì)胞變形指數(shù)（DI）低切（1/3） 中切（1/50） 高切（1/180）空白組-21.58±3.89 7.87±0.41 3.27±0.23 4.95±2.20 0.34±0.04 1.27±0.23模型組-33.02±3.33## 9.71±0.54# 5.98±0.20## 6.40±2.21# 0.92±0.07## 0.61±0.38##地奧心血康組 54 mg/kg 24.44±2.54△△ 8.99±0.54 4.38±0.32△ 5.91±1.46 0.36±0.05△△ 0.88±0.32 DDQ 高劑量組 60 mg/kg 23.17±9.70△△ 8.40±1.24△ 4.16±0.64△ 5.21±3.07△ 0.58±0.04△ 1.16±0.64△DDQ 中劑量組 30 mg/kg 28.88±10.08 8.77±1.20△ 4.48±0.49△ 5.78±3.08 0.82±0.04 0.98±0.49 DDQ 低劑量組 15 mg/kg 29.18±10.80 8.38±1.28△ 4.41±0.71△ 5.42±3.69 0.80±0.05 0.87±0.71

表3 對(duì)血沉及纖維蛋白原含量的影響（± s ，n = 6）

表3 對(duì)血沉及纖維蛋白原含量的影響（± s ，n = 6）

注：與空白組比較，# P ＜0.05；與模型組比較，△P ＜0.05

組 別 劑量 血沉方程K 值 纖維蛋白原/（g /L）空白組-9.66±3.36 2.02±0.10模型組-13.13±3.94# 3.91±0.28#地奧心血康組 54 mg/kg 9.92±3.61△ 2.11±0.11△高劑量組 60 mg/kg 10.22±3.32△ 2.27±0.12△中劑量組 30 mg/kg 12.20±2.79 2.46±0.22△低劑量組 15 mg/kg 12.69±3.61 2.34±0.09△

4 討論

既往認(rèn)為引起缺血性心臟病的原因是以冠狀動(dòng)脈供血不足，不能滿足心肌需求而導(dǎo)致心肌缺血性損傷[4]，隨著研究的深入，其發(fā)生是冠狀動(dòng)脈狹窄、炎癥反應(yīng)、血小板和凝血功能亢進(jìn)等多因素共同作用的結(jié)果。心肌缺血時(shí)心肌細(xì)胞缺乏能量供應(yīng)，發(fā)生氧化還原反應(yīng)，產(chǎn)生大量氧自由基[5]。同時(shí)，心肌缺血的形成與血液流變的異常有密切聯(lián)系，血液黏度升高，使血流阻力增加，流速減慢，甚至造成血液停滯，最終影響冠脈供血，誘發(fā)或加重心肌缺血。二氫槲皮素可以使黃嘌呤氧化酶的活性降低[6]，從而發(fā)揮抗氧化作用；能夠抑制人宮頸癌Hela 細(xì)胞的增殖[7]，從而發(fā)揮抗癌作用；能對(duì)抗二甲苯所致小鼠耳腫脹和降低DNCB 誘導(dǎo)的小鼠過(guò)敏反應(yīng)[8]，從而發(fā)揮抗炎抗過(guò)敏作用；能夠降低心肌梗死程度，從而保護(hù)心肌[9]；此外，二氫槲皮素在改善血管內(nèi)皮細(xì)胞功能、抗血小板聚集、保護(hù)腦缺血再灌注損傷、降血糖等方面也發(fā)揮重要作用。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)腹腔注射異丙腎上腺素造成大鼠急性心肌缺血模型，觀察二氫槲皮素對(duì)大鼠血液流變學(xué)的影響。結(jié)果顯示：1）與空白組比較，模型組的全血黏度（包括中切和高切）、血漿黏度、紅細(xì)胞壓積、全血還原黏度（包括低切、中切和高切）、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、血沉方程K 值及纖維蛋白原均明顯升高，紅細(xì)胞變形指數(shù)明顯下降，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01 或P＜0.05）；2）與模型組比較，二氫槲皮素各給藥組的全血黏度（包括中切和高切）、全血還原黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、紅細(xì)胞剛性指數(shù)、血沉方程K 值和纖維蛋白原均明顯降低，紅細(xì)胞變形指數(shù)上升，其中，高劑量組和模型組比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01 或P＜0.05）。二氫槲皮素各給藥組的血漿黏度、紅細(xì)胞壓積均降低，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。證明二氫槲皮素能改善心肌缺血模型大鼠的血液流變學(xué)，這可能與其抑制血栓形成，改善微循環(huán)，維持心肌正常代謝和功能有關(guān)，從而為臨床應(yīng)用提供研究依據(jù)。