血清胱抑素C和中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白檢測(cè)對(duì)新生兒窒息后早期腎損傷診斷的價(jià)值

李梅

作者單位：宿州市立醫(yī)院檢驗(yàn)科，安徽 宿州 234000

新生兒窒息是新生兒死亡的常見(jiàn)病因之一，我國(guó)新生兒窒息的發(fā)病率約為1.14%～11.7%[1]。近來(lái)有研究表明血清胱抑素C(CYS-C)、中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)檢測(cè)可作為判斷新生兒窒息后早期腎損害的是敏感指標(biāo)[2-3]。本研究通過(guò)對(duì)不同程度窒息新生兒的血清CYS-C、NGAL的檢測(cè)結(jié)果及兩者檢查結(jié)果聯(lián)合分析，了解在新生兒窒息后早期腎損傷診斷的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 一般資料選取2015年6月至2017年6月在宿州市立醫(yī)院治療的窒息足月新生兒45例，輕度窒息組25例,重度窒息組20例，入選標(biāo)準(zhǔn)：出生后24 h內(nèi)入院，胎齡范圍為37～42周，體質(zhì)量范圍為2 500～4 000 g 1 min Apgar評(píng)分4～7分為輕度窒息，0～3分為重度窒息[4]。同時(shí)排除嚴(yán)重感染、非直系導(dǎo)致的心肺疾病和泌尿系統(tǒng)畸形等疾病可能對(duì)血清NGAL的影響，另外排除重度黃疸、溶血等可能影響血清CYS-C的疾病。對(duì)照組40例為同時(shí)期出生的足月健康的新生兒。本研究符合《世界醫(yī)學(xué)協(xié)會(huì)赫爾辛基宣言》相關(guān)要求，病兒近親屬知情同意。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1樣本采集及處理 所有受檢者均在出生后24 h內(nèi)采集靜脈血2 mL檢測(cè)血清CYS-C、NGAL、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)，4 h內(nèi)完成檢測(cè)。

1.2.2儀器和試劑 貝克曼AU5400全自動(dòng)生化分析儀，BUN、SCr試劑均由上海復(fù)星長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供，CYS-C試劑為廣州科方生物技術(shù)有限公司提供,質(zhì)控應(yīng)用伯樂(lè)質(zhì)控品；NGAL 試劑為上海廣銳生物科技有限公司提供，質(zhì)控品由原廠(chǎng)提供。

1.2.3檢測(cè)方法 CYS-C檢測(cè)采用膠乳增強(qiáng)免疫比濁法，SCr、BUN檢測(cè)采用酶法，NGAL檢測(cè)采用ELSA法(定量方法)。

2 結(jié)果

2.1 輕度、重度窒息足月新生兒與健康足月新生兒的胎齡、日齡、體質(zhì)量比較輕度窒息組男15例，女10例，胎齡(38.9±1.4)周，體質(zhì)量(3 641±463)g，取血日齡(12.8±2.3)h。重度窒息組男13例，女7例，胎齡(39.9±1.3)周，體質(zhì)量(3 428±520)g，取血日齡(9.5±1.3)h。健康足月新生兒男23例，女17例，胎齡(39.4±1.4)周，體質(zhì)量(3 548±510)g，取血日齡(14.5±1.5)h。3組之間胎齡、日齡、體質(zhì)量均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.2 輕度、重度窒息足月新生兒與健康足月新生兒的血清CYS-C、BUN、SCr及NGAL結(jié)果比較重度窒息組與輕度窒息組血CYS-C及NGAL檢測(cè)結(jié)果均高于健康對(duì)照組，重度窒息組的指標(biāo)高于輕度窒息組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，重度窒息組、輕度窒息組與健康足月新生兒BUN與SCr檢測(cè)結(jié)果各組之間兩兩比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表1。

2.3 血清CYS-C、NGAL和BUN及SCr檢測(cè)結(jié)果的ROC曲線(xiàn)分析由圖1可見(jiàn)，CYS-C、NGAL和BUN及SCr對(duì)新生兒窒息后早期腎損傷診斷曲線(xiàn)下面積(AUC)分別為0.901，0.900，0.776，0.661，見(jiàn)表2。

圖1 CYS-C、NGAL、BUN和SCr對(duì)新生兒窒息早期腎損傷診斷價(jià)值ROC曲線(xiàn)圖

項(xiàng)目曲線(xiàn)下面積(AUC)標(biāo)準(zhǔn)誤(SE)95% CI值下限上限CYS-C0.9010.0370.8270.974NGAL0.9000.0390.8240.976BUN0.7760.0570.6750.892SCr0.6610.0690.5290.781

注：各單項(xiàng)比P<0.05,CYS-C血清胱抑素，NGAL中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白,BUN尿素氮，SCr肌酐

2.4 CYS-C、NGAL檢測(cè)陽(yáng)性率比較45例窒息病兒血清CYS-C異常31例(69.0%)，NGAL異常28例(62.0%)。兩項(xiàng)檢測(cè)至少有一項(xiàng)異常39例(87.0%)，由此可見(jiàn)，窒息病兒聯(lián)合檢測(cè)CYS-C、NGAL的陽(yáng)性率明顯高于單項(xiàng)的檢測(cè)的陽(yáng)性率，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P<0.05。見(jiàn)表3。

表3 窒息足月新生兒與健康足月新生兒血清CYS-C、NGAL檢測(cè)的陽(yáng)性率比較/例(%)

注：CYS-C血清胱抑素，NGAL中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白,BUN尿素氮，SCr肌酐

表1 輕度、重度窒息足月新生兒與健康足月新生兒血清CYS-C、NGAL和BUN及SCr檢測(cè)結(jié)果

注：整體分析為單因素方差分析。多重比較為L(zhǎng)SD-t檢驗(yàn)或HSD-q檢驗(yàn)，a、b分別為和對(duì)照組、輕度組相比P<0.05，CYS-C血清胱抑素，NGAL中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白,BUN尿素氮，SCr肌酐

3 討論

新生兒窒息是足月兒群體導(dǎo)致其病死率高的直接原因[5]。新生兒窒息后致使機(jī)體處于缺血缺氧性狀態(tài)引起多器官、多系統(tǒng)損傷甚至死亡。在缺血缺氧性損傷、感染等情況下急性腎損傷發(fā)病率很高，尤其在我國(guó)圍生期窒息的發(fā)生率排在首位約61.8%[6]。因此早期診斷并及早進(jìn)行干預(yù)性治療是非常必要的。通常腎功能損傷用BUN、SCr不能發(fā)現(xiàn)早期腎損傷[2]。新生兒腎臟對(duì)缺氧非常敏感，窒息兒出生后第1天腎動(dòng)脈血流速度和血流量降低，阻力升高，其改變隨窒息程度加重而加重，臨床上可表現(xiàn)為少尿、無(wú)尿、蛋白尿、急性腎小管壞死。隨著缺氧癥狀的改善，腎損害會(huì)逐漸改善。如果胎兒有嚴(yán)重的宮內(nèi)窘迫，或者生后缺氧持續(xù)存在，可引起腎功能衰竭，最終危及生命。

新生兒病情變化快，以前常用評(píng)價(jià)腎功能指標(biāo)的BUN易受飲食、腎血流量、蛋白質(zhì)、高熱等因素影響因此并不能準(zhǔn)確反映腎臟功能[7]，有研究表明BUN、SCr在腎小球?yàn)V過(guò)功能喪失一半以上時(shí)其結(jié)果才會(huì)快速升高[8]，所以很難成為早期腎損傷的診斷指標(biāo)。本研究可見(jiàn)BUN、SCr輕度組與對(duì)照組比較以及重度組與輕度組比較，均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。BUN、SCr檢查結(jié)果ROC曲線(xiàn)下面積分別為77.6%和66.1%。證明BUN、SCr檢測(cè)結(jié)果不易為早期腎損傷的診斷指標(biāo)。

急性腎損傷時(shí)常表現(xiàn)為尿量與血生化指標(biāo)的微小變化，也常提示將發(fā)生嚴(yán)重不良的臨床預(yù)后[9]。這就要求我們尋找較靈敏的檢測(cè)項(xiàng)目替代。CYS-C分子量小，其濃度由腎小球?yàn)V過(guò)功能決定，不受性別，年齡，飲食等外來(lái)因素的影響是反映早期腎小球?yàn)V過(guò)功能的早期內(nèi)源性指標(biāo)[10-11]。因此較多的研究表明CYS-C不僅是急性腎損傷診斷的生物指標(biāo)，還評(píng)估疾病的嚴(yán)重程度，監(jiān)測(cè)預(yù)后也有重要作用[12]。本研究重度窒息組與輕度窒息組血CYS-C檢測(cè)結(jié)果均高于健康對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),CYS-C檢查結(jié)果ROC曲線(xiàn)下面積為90.1%。與劉華杰等[11]研究診斷急性腎損傷AUC高達(dá)88%～97%的結(jié)果基本一致，故CYS-C的檢測(cè)結(jié)果可以用于新生兒窒息后缺血缺氧性腦病腎早期損傷的指標(biāo)。

NGAL具有分子量小，性質(zhì)穩(wěn)定等特點(diǎn)。正常腎組織NGAL的表達(dá)較低，當(dāng)腎損傷時(shí)NGAL的表達(dá)顯著升高，因此是早期評(píng)估急性腎損傷的敏感和特異的指標(biāo)[13-14]。朱軍等[3]研究發(fā)現(xiàn)窒息組血清NGAL檢測(cè)結(jié)果高于健康對(duì)照組。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)，輕度、重度窒息組NGAL檢查結(jié)果均顯著升高，并且隨著窒息程度的加重也逐漸升高，NGAL檢查結(jié)果ROC曲線(xiàn)下面積為90.0%，本研究的結(jié)果與其一致。所以檢測(cè)NGAL結(jié)果可以及時(shí)評(píng)估窒息新生兒的早期腎損傷，其敏感性明顯高于BUN、SCr。但血NGAL可能還受全身感染和炎性疾病影響[14]，因此單獨(dú)檢測(cè)其結(jié)果我們應(yīng)排除炎癥感染的影響。

本研究結(jié)果可看出，檢測(cè)血清CYS-C、NGAL結(jié)果均可以單獨(dú)作為新生兒窒息后缺血缺氧性腦病腎早期損傷的指標(biāo)。CYS-C、NGAL如果單獨(dú)檢測(cè)的陽(yáng)性率分別為69%和62%，而兩項(xiàng)檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)的陽(yáng)性率為87%。這表明兩種檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)比單項(xiàng)檢測(cè)的陽(yáng)性率高，同時(shí)可以減少外來(lái)的影響因素對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響及結(jié)果判斷。本研究也存在不足之處如：(1)樣本量較少檢測(cè)結(jié)果不能充分量化血清CYS-C、NGAL對(duì)腎臟損傷的程度。(2)選取的對(duì)象均為足月的新生兒不能包括所有胎齡的新生兒尤其是早產(chǎn)兒，因?yàn)槠淠I功能發(fā)育并不成熟，所以還應(yīng)進(jìn)一步研究。

綜上所述，血清CYS-C、NGAL檢查結(jié)果隨病情的嚴(yán)重程度同步升高，單獨(dú)檢測(cè)可作為新生兒窒息后缺血缺氧性腦病腎早期損傷的指標(biāo)。兩種檢測(cè)方法聯(lián)合檢測(cè)可提高檢出率，并能對(duì)及時(shí)對(duì)癥治療得到明顯改善的病人提供循證依據(jù)。