卵巢癌患者順鉑化療效果與PURA等位基因的關(guān)系

李君 王倩青 張曉蘭

(1新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院婦科婦瘤科，河南 新鄉(xiāng) 453000；2青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤婦科)

卵巢癌是臨床中十分常見(jiàn)的惡性婦科腫瘤，其臨床發(fā)病率及病死率居高不下，有研究指出我國(guó)卵巢癌發(fā)病率及死亡率呈明顯的逐年增高趨勢(shì)，對(duì)婦女的健康安全造成嚴(yán)重威脅〔1〕?，F(xiàn)階段臨床中對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行治療的標(biāo)準(zhǔn)策略為鉑類(lèi)藥物聯(lián)合手術(shù)治療〔2〕。卵巢癌的治療及診斷技術(shù)不斷提高，晚期卵巢癌生存率無(wú)明顯改善〔3〕。PURA是與RNA或DNA具有高度親和力的蛋白，在腫瘤的發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中PURA可與E2F1、pRb等蛋白因子結(jié)合并誘發(fā)下游信號(hào)通路，是重要的潛在抑癌基因〔4〕。此外，有研究結(jié)果顯示，PURA蛋白在多種化療藥物作用下產(chǎn)生DNA損傷修復(fù)〔5〕，但PURA等位基因與卵巢癌順鉑化療療效的相關(guān)性研究仍鮮有報(bào)道，本文分析卵巢癌患者順鉑化療療效與PURA等位基因的關(guān)系。

1 資料方法

1.1一般資料 選取2010年1月至2018年1月間新鄉(xiāng)市中心醫(yī)院婦產(chǎn)科收治的經(jīng)病理檢查確診卵巢癌患者作為研究對(duì)象，所有患者采用20 mg/m2劑量順鉑(H37021362，齊魯制藥有限公司)進(jìn)行治療。依照國(guó)際婦產(chǎn)科聯(lián)盟TNM分期系統(tǒng)〔6〕對(duì)患者進(jìn)行分期，依照巴塞羅那分級(jí)系統(tǒng)〔7〕對(duì)患者行組織病理學(xué)分析。采用QIAGEN提取全血DNA。所有患者對(duì)本研究知情，并簽署知情同意書(shū)。

1.2PURA等位基因分析 通過(guò)檢索PUBMED數(shù)據(jù)庫(kù)分析PURA等位基因(rs142688247)，并采用引物及探針序列，基因上游引物5′-GGGCGCTCAAAAGCGAGTT-3′，下游引物5′-GCCAGAGCGTCACGGAAC-3′，C等位基因探針：5′-VIC-GCATCCGCCAGACGGTCAA-3′，T等位基因探針：5′-FAM-AGCTTGGCCAGAGCGTCAC-3′。采用PCR法檢測(cè)時(shí)選用6 μl體系，其中包括40×無(wú)菌水0.125 μl，基因組DNA 1 μl，2× TaqMan 2.5 μl，依照定量PCR法檢測(cè)，其反應(yīng)程序?yàn)?0 s 95℃、15 s 95℃、60 s 60℃，共45個(gè)循環(huán)，后采用序列檢測(cè)系統(tǒng)及PCR系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)分析，并向循環(huán)中加入非模板，10%樣品重復(fù)檢測(cè)做質(zhì)控。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0軟件行χ2檢驗(yàn)，繪制生存曲線評(píng)估患者生存率。

2 結(jié) 果

2.1患者臨床病理特征 全部患者中治療后3年內(nèi)復(fù)發(fā)41例，治療后3個(gè)月完全緩解148例、部分緩解34例?；颊吲R床病理特征為：年齡(64.32±10.84)歲；有吸煙史者132例；有避孕藥服用史82例；有淋巴轉(zhuǎn)移者10例；分期：Ⅰ期19例，Ⅱ期135例，Ⅲ期42例，Ⅳ期4例。復(fù)發(fā)者41例，治療反應(yīng)：完全緩解148例，部分緩解34例，穩(wěn)定10例，進(jìn)展6例，無(wú)信息2例。

2.2臨床特征與基因型相關(guān)性 通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)檢索分析PURA基等位基因共發(fā)現(xiàn)T型和C型，本組研究結(jié)果顯示T型基因出現(xiàn)頻率占31.25%，C型基因出現(xiàn)頻率占34.62%，基因型差異與患者病理分期差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，在治療反應(yīng)性上T型基因攜帶者對(duì)藥物反應(yīng)性顯著高于C型攜帶者(P<0.05)，見(jiàn)表1。

表1 臨床特征與基因型的相關(guān)性〔n(%)〕

2.3PURA基因多態(tài)型與患者總生存率 PURA T基因型患者治療總生存率明顯優(yōu)于PURA C基因型患者(P<0.05)，見(jiàn)圖1。

圖1 患者生存曲線

3 討 論

卵巢癌是現(xiàn)階段臨床中較為常見(jiàn)的惡性婦科腫瘤，一般情況下患者多無(wú)特異性臨床癥狀，因而常被患者忽視進(jìn)而導(dǎo)致患者在發(fā)現(xiàn)時(shí)多以發(fā)展至中晚期〔8〕?，F(xiàn)階段臨床中多采用手術(shù)方案對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行治療，但單獨(dú)采用手術(shù)方案對(duì)中晚期患者進(jìn)行治療時(shí)其手術(shù)效果較差，因而導(dǎo)致患者治療質(zhì)量較差，術(shù)后病死率及復(fù)發(fā)率居高不下，且對(duì)患者生活質(zhì)量產(chǎn)生嚴(yán)重不良影響〔9〕。一般情況下，卵巢癌患者術(shù)后病情惡化或復(fù)發(fā)時(shí)臨床中導(dǎo)致患者死亡的主要原因之一。有學(xué)者指出，在卵巢癌患者采用手術(shù)方案治療同時(shí)聯(lián)合應(yīng)用化療方案可有效彌補(bǔ)手術(shù)治療不足〔10〕。順鉑是現(xiàn)階段臨床中較為常見(jiàn)的化療藥物，其具有較高的臨床療效。但在對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行治療時(shí)順鉑類(lèi)藥物仍存在一定缺陷，臨床中如何尋找到提高鉑類(lèi)藥物細(xì)胞毒作用靶點(diǎn)十分迫切。研究結(jié)果顯示，采用順鉑對(duì)卵巢癌患者進(jìn)行治療時(shí)常引起腫瘤細(xì)胞死亡的機(jī)制為細(xì)胞無(wú)法有效修復(fù)斷裂DNA雙鏈并出現(xiàn)持續(xù)性積累〔11〕。

PURA基因微乳染色體5q31區(qū)基因包括早期生長(zhǎng)反應(yīng)基因-1及白介素，可編碼多種細(xì)胞因子。有學(xué)者采用熒光原位雜交技術(shù)分析結(jié)果顯示，在骨髓增生異常綜合征中可見(jiàn)EGR-1與PURA多種形式移位，并可能導(dǎo)致病情惡化發(fā)展至急性髓細(xì)胞性白血病〔12〕。PURA蛋白是重要的核基質(zhì)成分，在非雄激素依賴(lài)前列腺細(xì)胞中過(guò)表達(dá)PURA可誘導(dǎo)應(yīng)激反應(yīng)通路基因表達(dá)，并促進(jìn)細(xì)胞分化調(diào)節(jié)細(xì)胞功能。卵巢上皮細(xì)胞病變?cè)诼殉舶┌l(fā)生及發(fā)展過(guò)程中起到十分重要的作用，在鑒別卵巢癌發(fā)生過(guò)程中多種人卵巢癌體外模型及卵巢上皮細(xì)胞系行全基因組分析，結(jié)果表明20%異常表達(dá)基因與細(xì)胞外成分密切相關(guān)〔13〕，且在細(xì)胞內(nèi)腫瘤發(fā)生及發(fā)展過(guò)程中PURA基因起到十分重要的作用。有研究結(jié)果顯示，腫瘤細(xì)胞對(duì)順鉑等化療藥物治療的敏感度與DNA密切相關(guān)〔14〕。有研究結(jié)果顯示，PURA等位基因與多種腫瘤發(fā)生及發(fā)展密切相關(guān)〔15〕。本組研究結(jié)果顯示，兩組病理分型相近T型基因攜帶者對(duì)藥物反應(yīng)性顯著高于C型攜帶者，且T型基因改變與患者生存期密切相關(guān)。分析認(rèn)為，T型基因變異可改善細(xì)胞內(nèi)DNA修復(fù)能力，提高化療藥物治療敏感度，此外T型基因變異對(duì)卵巢癌治療的臨床療效有一定促進(jìn)作用。此外，PURA T型基因?qū)煼磻?yīng)正向作用，加速腫瘤細(xì)胞修復(fù)損傷能力，提高化療藥物敏感度，改善患者預(yù)后質(zhì)量。此外，PURA T基因型可作為評(píng)估順鉑治療質(zhì)量的預(yù)后因子，但其等位基因功能尚未完全揭示，仍有待后續(xù)深入研究。