血清sLOX-1在2型糖尿病合并OSAHS中的變化及與下肢血管病變的關系

白亞麗 范榕 趙雅寧 戈艷蕾 張馨

(華北理工大學，河北 唐山 063000)

凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體(LOX)-1是氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)在動脈粥樣硬化(AS)斑塊細胞表面的主要受體，參與AS斑塊形成及破裂。LOX-1在細胞表面大量表達后經(jīng)蛋白酶水解釋放可溶性LOX(sLOX)-1，血清sLOX-1水平能夠反映LOX-1的表達水平〔1〕。近年來學者對sLOX-1在急性冠脈綜合征(ACS)、阻塞性睡眠呼吸暫停低通氣綜合征(OSAHS)、2型糖尿病(T2DM)等中的變化進行了研究，發(fā)現(xiàn)血清sLOX-1的變化是ACS的獨立預測因子〔2～4〕。研究發(fā)現(xiàn)OSAHS與機體的糖代謝密切聯(lián)系，糖尿病(DM)合并OSAHS的患者血糖控制差〔5〕。OSAHS越嚴重，血糖控制越差，發(fā)生DM慢性并發(fā)癥的危險性也越高，但血清sLOX-1在DM合并OSAHS的患者中如何變化尚不清楚。下肢血管病變(PAD)是DM常見的大血管并發(fā)癥之一。本研究探討T2DM合并OSAHS患者血清sLOX-1水平的變化及與PAD形成的關系。

1 資料與方法

1.1研究對象 選取華北理工大學附屬醫(yī)院2015年3月至2016年10月就診的T2DM患者，行夜間連續(xù)7 h以上多導睡眠圖監(jiān)測，依據(jù)OSAHS入選標準，篩選出T2DM伴OSAHS患者171例為觀察組，單純T2DM患者231例為對照組，兩組性別、年齡、DM病程、糖化血紅蛋白(HbA1c)、有無慢性病等方面差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，見表1。納入標準：①經(jīng)血糖監(jiān)測符合世界衛(wèi)生組織(WHO)1999年制定的T2DM診斷標準；②OSAHS患者符合中華醫(yī)學會呼吸病學分會睡眠呼吸障礙學組制定的OSAHS診治指南的診斷標準；③知情同意。排除標準：①急慢性感染性疾病、腫瘤及腫瘤術后；②服用鎮(zhèn)靜、助眠等神經(jīng)、精神類藥物者；③嚴重心、肝、腎功能不全者；④妊娠期患者；⑤合并甲狀腺功能異?；蛴衅渌麅?nèi)分泌疾病。

表1 兩組一般資料比較

慢性病包括高血壓、高脂血癥

1.2PAD檢測 入組患者均于入院當日或次日采用德國西門子AcusonSequoia C512型彩色多普勒超聲診斷儀，7.5～11.0 MHz線陣探頭，患者分別采用俯臥位和仰臥位，檢測動脈包括雙側(cè)股淺動脈、脛后動脈及足背動脈?；颊呔扇A北理工大學附屬醫(yī)院超聲診斷室同一位醫(yī)師負責且檢測前未被告知患者分組情況。PAD的診斷標準：將PAD的性質(zhì)分為4種，并依據(jù)病變的嚴重程度評分，①血管內(nèi)膜厚度：不厚(內(nèi)膜增厚<1.0 mm)為0分，輕度增厚(內(nèi)膜增厚1.0～1.2 mm)為1分，中重度增厚(內(nèi)膜增厚>1.2 mm)為2分；②動脈硬化程度：正常為0分，輕度硬化(動脈內(nèi)膜回聲強但未增厚，無斑塊)為1分，中重度硬化(輕度伴有斑塊或狹窄)為2分；③斑塊：正常(未發(fā)現(xiàn)斑塊)為0分，單發(fā)為1分，多發(fā)斑塊為2分，彌漫性斑塊為3分；④狹窄：無狹窄為0分，輕度狹窄(狹窄程度為30%～50%)為1分，中重度狹窄(狹窄程度為51%～75%)為2分，閉塞(無血流)為3分。含有1種及以上則可診斷為PAD，得分越高血管病變越重。

1.3多導睡眠監(jiān)測 符合入組的T2DM患者入院后均采用YH1000多導睡眠儀(澳大利亞Compumedics公司)進行多導睡眠圖(PSG)監(jiān)測，內(nèi)容包括口鼻氣流、體位、胸腹呼吸運動、鼾聲、呼吸暫停低通氣指數(shù)(AHI)及最低血氧飽和度(LSaO2)等，監(jiān)測當日患者禁飲酒、濃茶、咖啡，禁服用鎮(zhèn)靜催眠類藥物，2 w內(nèi)無上呼吸道感染。所有研究對象需行整夜連續(xù)監(jiān)測，時間不少于7 h。數(shù)據(jù)經(jīng)睡眠分析軟件初步分析后由人工進一步糾正，最終由專業(yè)醫(yī)師確定監(jiān)測結果。主要采集AHI及LSaO2為主要參考指標。

1.4血清sLOX-1水平監(jiān)測 所有患者于入院后次日晨抽取空腹靜脈血2 ml，以3 000 r/min離心20 min，分離血清，取上清液放置于-80℃下保存待測。待標本收齊后解凍統(tǒng)一采用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)測定，試劑盒由天津灝洋生物制品科技有限責任公司提供。本研究依照兩組患者血清sLOX-1的檢測結果按照P50分層：血清sLOX-1水平超過P50者為異常。

1.5血液生化指標檢測 所有患者于入院后次日清晨空腹(入院當日晚8點起禁飲食)抽取靜脈血，采用葡萄糖氧化酶法測定HbA1c水平。

1.6統(tǒng)計學方法 采用SPSS17.0軟件進行t檢驗，χ2檢驗，Pearson相關分析。

2 結 果

2.1兩組患者PAD檢出率、血清sLOX-1水平比較 觀察組PAD檢出率明顯高于對照組(P<0.00)；與對照組比較，觀察組患者血清sLOX-1水平顯著升高(P<0.001)，見表2。

表2 兩組PAD檢出率、血清sLOX-1水平比較

2.2觀察組患者AHI、LSaO2與血清sLOX-1水平的相關性分析 觀察組AHI與血清sLOX-1含量呈正相關(r=0.791,P=0.000)，LSaO2與患者血清sLOX-1含量呈負相關(r=-0.705,P=0.000)。

2.3觀察組內(nèi)不同水平sLOX-1患者PAD發(fā)生率的比較 sLOX-1異常組PAD檢出率〔n=81,67例(60.9%)〕顯著高于正常組〔n=90,43例(39.1%)〕(χ2=8.475,P=0.004)。

2.4觀察組PAD單因素分析 觀察組患者依據(jù)有無PAD分為PAD組和無PAD組，兩組在DM病程、HbA1c、OSAHS病情方面，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01) ，見表3。

表3 觀察組PAD單因素分析〔n(%)〕

2.5觀察組PAD多因素分析 觀察組內(nèi)以是否有PAD(有=1，無=0)為因變量，以DM病程、HbA1c、AHI、LSaO2、sLOX-1為自變量進行Logistic回歸分析，多因素分析結果顯示：DM病程、AHI、LSaO2、sLOX-1為OSAHS合并T2DM PAD的影響因素，見表4。

表4 觀察組PAD多因素分析

3 討 論

LOX-1最早在內(nèi)皮細胞中表達，后來又發(fā)現(xiàn)在巨噬細胞、軟骨細胞、平滑肌細胞中也有表達，具有結合、內(nèi)吞、降解ox-LDL的功能〔6,7〕。近年來有研究顯示sLOX-1與OSAHS也具有一定相關性。Xu等〔8〕研究結果發(fā)現(xiàn)OSAHS患者血清sLOX-1水平顯著高于對照組，且升高程度與OSAHS的嚴重程度密切相關。也有學者指出〔9〕重度OSAHS男性血清中的sLOX-1 表達水平升高，在經(jīng)過氣道正壓通氣(CPAP)治療1個月后，患者sLOX-1 水平顯著下降。這表明，sLOX-1可能成為評價OSAHS嚴重程度和預后的新型指標。本研究結果提示血清sLOX-1水平在合并OSAHS后顯著升高，且隨著OSAHS病情加重，血清sLOX-1水平越高。OSAHS引起DM患者血清sLOX-1升高的機制可能為：①間歇低氧：OSAHS患者慢性間歇性低氧激發(fā)氧化應激反應可誘導急性期蛋白基因及相關細胞因子的表達增加，進而誘導LOX-1的上調(diào)〔10〕。②炎癥反應：OSAHS屬于炎癥性疾病，研究發(fā)現(xiàn)IL-6水平的升高可刺激LOX-1的表達上調(diào)〔11〕。③交感神經(jīng)興奮：OSAHS反復的低氧/復氧可導致交感神經(jīng)興奮，研究顯示〔12〕交感神經(jīng)興奮可通過誘導血管緊張素Ⅱ的表達引起sLOX-1的釋放。此外本研究還說明OSAHS加重了DM患者PAD的發(fā)生，可能與血清sLOX-1的升高有關。

PAD是T2DM患者致死、致殘的重要原因，其病理基礎是AS〔13〕，氧化應激、炎癥反應、胰島素抵抗在AS發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。本研究結果可得出血清sLOX-1水平與OSAHS病情呈正相關關系，當OSAHS病情越嚴重，血清sLOX-1水平越高，患者下肢血管病變越嚴重。本研究多因素分析結果說明血清sLOX-1參與了OSAHS合并T2DM患者血管病變的發(fā)生發(fā)展過程。機制可能為：被轉(zhuǎn)運到血管內(nèi)皮細胞的ox-LDL一方面可抑制血管內(nèi)皮細胞的活性功能，促進單核細胞和血小板活化，加速單核細胞向血管內(nèi)皮細胞黏附和聚集，促進泡沫細胞形成，觸發(fā)AS〔14〕；另一方面，LOX-1還可介導ox-LDL促進血管平滑肌細胞增殖和遷移，誘導細胞凋亡，加速動脈硬化的進程〔15〕。此外，本研究多因素分析顯示，長期的高糖刺激不僅導致胰島β細胞功能進行性下降，同時患者炎癥水平、糖脂代謝紊亂程度也不斷加重，因此下肢動脈硬化的發(fā)生率也隨之增高。間歇低氧可導致機體氧化應激反應增強，脂質(zhì)過氧化，細胞黏附因子表達增強，導致單核細胞與內(nèi)皮細胞黏附、聚集，引發(fā)血管內(nèi)皮損傷；此外頻繁低氧還導致炎性因子水平增高，引發(fā)炎癥反應，導致大量單核巨噬細胞向血管內(nèi)膜浸潤，促進動脈硬化及血栓形成。本研究中HbA1c僅在單因素分析中有統(tǒng)計學差異，但并未進入多因素回歸模型，考慮與樣本量較少有關。

綜上，OSAHS加重T2DM患者PAD的程度，因此對于就診的T2DM患者若懷疑合并OSAHS疾病應及早進行篩查，以便及時給予有效干預，從而改善DM患者預后及血管并發(fā)癥的嚴重程度。檢測OSAHS合并T2DM患者血清sLOX-1水平對患者的PAD程度具有警示作用。