早期梅毒血清固定患者外周血中IL-2，IL-10的表達(dá)及意義

王翠彥，李曉偉，黃文富

廣東省惠州市中心人民醫(yī)院，廣東惠州 516000

梅毒是我國最常見的性傳播疾病之一，對患者的身心健康造成一定的危害[1]。梅毒血清固定對患者的危害較大，一方面是容易對性伴侶傳播，另一方面是會進(jìn)展為顯性梅毒，甚至梅毒三期；還會對神經(jīng)系統(tǒng)和內(nèi)臟器官造成破壞；而且梅毒血清固定多在生育期女性中發(fā)生，使得新生兒先天性感染風(fēng)險(xiǎn)增加[2-3]。研究其發(fā)病機(jī)制，對于臨床診治具有重要意義。綜合國內(nèi)外研究結(jié)果，該實(shí)驗(yàn)選取2016年1月—2018年12月來該院進(jìn)行診治的143例梅毒患者為研究對象，采用ELISA法檢分別檢測不同感染狀態(tài)中IL-2、IL-10的變化，進(jìn)一步研究梅毒不同感染階段細(xì)胞免疫分子水平的變化?，F(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象均為該院皮膚科門診根據(jù)病史、臨床表現(xiàn)和血清學(xué)檢查綜合診斷的梅毒患者。根據(jù)患者診斷情況分為 A 組（23例）、B 組（40例）、C 組（40例）和 D 組（40例）。A組：符合一期梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)的門診患者。男性14例，女性 9 例，年齡為 21～48 歲，平均年齡為（32.47±4.88）歲。B組：符合二期梅毒診斷標(biāo)準(zhǔn)的門診患者。男性26例，女性 14 例，年齡為 21～49 歲，平均年齡為（32.55±4.71）歲。C組：早期潛伏梅毒同時(shí)排除神經(jīng)梅毒。男性24例，女性16 例，年齡為 23～49 歲，平均年齡為（32.18±4.66）歲。 D組：血清固定同時(shí)排除神經(jīng)梅毒者。男性27例，女性13例，年齡為 23～47 歲，平均年齡為（32.09±4.15）歲。 正常對照組（40名）：同時(shí)期來該院進(jìn)行體檢的健康志愿者。男性25名，女性 15名，年齡為 23～49歲，平均年齡為（32.78±5.12）歲。所有被研究者的性別、年齡等具有可比性（P＞0.05）。該研究經(jīng)該院倫理學(xué)委員會批準(zhǔn)同意，所有被研究者均知情同意，簽署知情同意協(xié)議書。

1.2 方法

標(biāo)本收集：首先對所有研究者進(jìn)行HIV抗體、RPR、TPPA檢測，購買RPR、TPPA檢測試劑，所有試驗(yàn)方法均按照說明書進(jìn)行。

細(xì)胞因子檢測：儀器為酶標(biāo)儀。

細(xì)胞因子前處理方法 A、B、C、D4組患者和正常對照組分別采集靜采清晨空腹靜脈血3 mL，離心取血清靜脈血 2 mL，立即以 4 000 r/min，最大離心力 2 325 g，離心15 min，分離血清后-40℃凍存待測。

細(xì)胞因子檢測方法：采用ELISA法檢測A、B、C、D4組及健康組血清IL-2、IL-10水平。嚴(yán)格按試劑盒說明書操作。EL1SA試劑盒購自美國PBM公司。所有相關(guān)的試驗(yàn)操作均由專業(yè)人員按照試劑盒說明書進(jìn)行，450 nm波長下讀取吸光度（A）值，以標(biāo)準(zhǔn)曲線為依據(jù)，計(jì)算其濃度。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察IL-2、IL-10水平變化情況。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

所有數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)采用SPSS 13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件。多組數(shù)據(jù)之間的比較采用單因素方差分析，兩兩比較采用Q檢驗(yàn)，對于多個(gè)率的比較采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

結(jié)果表明，各組IL-2、IL-10水平對比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；IL-2A 組最高，其次為 B 組，C 組第三，D 組最低，均高于對照組（P＜0.05）。IL-10正好相反。見表1。

表 1 被研究者 IL-2、IL-10 水平對比對比[（±s），pg/mL]

表 1 被研究者 IL-2、IL-10 水平對比對比[（±s），pg/mL]

組別 IL-2 IL-10 A 組（n=23）B 組（n=40）C 組（n=40）D 組（n=40）對照組（n=40）F值P值75.91±14.66 38.54±10.11 34.19±8.66 30.48±7.41 27.25±6.34 68.475 0.036 158.98±12.34 180.49±13.66 194.18±12.95 199.47±15.37 88.01±9.78 99.124 0.028

3 討論

梅毒（Syphilis）是由梅毒螺旋體（Treponema pauidum，TP）引起的一種慢性系統(tǒng)性傳染病，且近年來呈現(xiàn)上升的趨勢[4]。部分梅毒患者經(jīng)過數(shù)療程正規(guī)驅(qū)梅治療但RPR仍持續(xù)陽性，關(guān)于其血清固定的發(fā)生機(jī)制尚不明確，梅毒的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸，對患者的免疫功能有一定的影響，二者有密切相關(guān)性[5-6]。

該文研究結(jié)果顯示，各組IL-2、IL-10水平對比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；A 組最高，分別為（75.91±14.66）、（158.98±12.34）pg/mL，其次為 B 組，分別為（38.54±10.11）、（180.49±13.66）pg/mL，C 組第三， 分別為 （34.19±8.66）、（194.18±12.95）pg/mL，D 組最低， 分別為 （30.48±7.41）、（199.47±15.37）pg/mL，均高于對照組（P＜0.05），分別為（27.25±6.34）、（88.01±9.78）pg/mL。 而 IL-10 正好相反。 研究表明，IL-10與Th1產(chǎn)生的 IL-2相拮抗而又處于一種正反饋機(jī)制，兩者同時(shí)表達(dá)上調(diào)的時(shí)候，使得使免疫功能狀態(tài)趨于平衡平穩(wěn)[7-8]。有關(guān)梅毒患者血清IL-10的水平與機(jī)體免疫功能狀況之間的相互關(guān)系，國內(nèi)外學(xué)者的觀點(diǎn)不一，Wu D[9]認(rèn)為梅毒宿主的細(xì)胞免疫功能抑制與血清IL-10水平的上升密切相關(guān)。謝麗明等[10]研究表明：一期梅毒組IL-l0較健康對照組無差異，二期則顯著升高，之后隨病程進(jìn)展呈升高趨勢，隨病程發(fā)展IL-10在血清固定組患者達(dá)到最高。血清IL-10水平的異常改變，和機(jī)體的免疫功能狀況之間有著密切的聯(lián)系。這也和該文的研究結(jié)果一致。梅毒宿主細(xì)胞的免疫功能抑制能夠促使血清IL-10水平異常變化。采取有效的措施改變血清IL-10水平，可以促使抑制性T細(xì)胞的功能得到發(fā)揮，阻遏由于Th1介導(dǎo)的細(xì)胞免疫應(yīng)答反應(yīng)，促使機(jī)體保護(hù)性增強(qiáng)細(xì)胞免疫功能。

梅毒患者的細(xì)胞免疫狀態(tài)是影響其病情發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)歸的重要因素之一。不同病期梅毒患者存在一系列細(xì)胞免疫功能失調(diào)和細(xì)胞免疫抑制現(xiàn)象。綜上所述，梅毒血清固定可能與IL-10，IL-2存在著某種關(guān)聯(lián)，尤其是IL-10，同時(shí)推測IL-10可能為梅毒感染發(fā)展過程中極其重要的細(xì)胞因子，可能為Th1/Th2漂移假說以及CD4T+和CD8T+細(xì)胞變化共同通路的節(jié)點(diǎn)。盧淑嬌[11]等比較了健康者、梅毒未治療、梅毒治療后轉(zhuǎn)陰以及梅毒血清固定患者的血清IL-10和IL-12水平，并分析梅毒血清固定患者血清IL-12、IL-10水平之間的關(guān)系，結(jié)果表明，對各組的IL-10水平進(jìn)行檢測和比較,各組間比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。對各組的IL-12水平進(jìn)行檢測和比較，各組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。對20例梅毒血清固定患者血清IL-12、IL-10水平之間的關(guān)系進(jìn)行分析，可得二者之間無顯著相關(guān)性（r=0.423，P＞0.05）。這和本文的研究結(jié)果相左，分析其原因，可能其選取的樣本和本研究選取的樣本有差異，關(guān)于其具體的相關(guān)性，還需要擴(kuò)大樣本量和樣本種類，進(jìn)行進(jìn)一步研究。胡曉燕等[12]探討IL-2、IL-10和TNF-α在早期顯性梅毒發(fā)病機(jī)制中的作用，結(jié)果表明，IL-2、IL-10和TNF-α均參與了梅毒的發(fā)病，IL-10表達(dá)上調(diào)可能是二期梅毒發(fā)生輔助性T(Th)1/Th2細(xì)胞免疫應(yīng)答失衡的主要原因之一。這和該文的研究結(jié)果一致。

綜上所述，希望在今后的臨床治療中，應(yīng)該更關(guān)注患者的免疫學(xué)狀態(tài)，在對梅毒患者進(jìn)行干預(yù)的過程中，臨床上不僅要進(jìn)行常規(guī)的驅(qū)梅治療，還可根據(jù)患者不同的免疫狀態(tài)采取增加一些免疫調(diào)節(jié)劑，從而使得患者的細(xì)胞免疫能力得到調(diào)節(jié)和增強(qiáng)，提高治療效果。