米醋及米醋飲料對自發(fā)性高血壓大鼠降壓作用的實(shí)驗(yàn)研究*

吳 悅 朱冰兒 趙文慧 章若嵐 聞佳敏 何 嵐 吳人照

1 浙江中醫(yī)藥大學(xué)第二臨床醫(yī)學(xué)院 浙江 杭州 310053

2 浙江省中醫(yī)藥研究院 浙江 杭州 310007

食用米醋是眾多種類醋中營養(yǎng)價(jià)值較高的一種。《本草求真》記載米醋“散瘀解毒，下氣消食”。現(xiàn)代研究顯示，米醋具有改善血液循環(huán)，防止動脈硬化的功能。但是，《本草拾遺》記載米醋“多食損筋骨”。就食用米醋對降壓作用的具體影響，其酸性刺激的危害，以及如何保留其保健作用，降低危害，未見系統(tǒng)研究報(bào)告，筆者就此開展研究。本團(tuán)隊(duì)前期動物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，目前的食用米醋直接食用，在較短時間和較小用量的情況下，暫時不具有危害。但作為降低血壓為目標(biāo)的用途時，達(dá)到一定用量及時間，會出現(xiàn)肺損害等嚴(yán)重副作用。本研究通過中和米醋中的醋酸，保留其保健作用，觀察其克服酸性刺激危害后制成的米醋飲料對自發(fā)性高血壓（SHR）大鼠血壓的影響，探討米醋飲料的降壓療效。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物：10周齡SHR大鼠32只、Wistar大鼠24只（北京維通利華實(shí)驗(yàn)動物技術(shù)有限公司，動物合格證：SCXK(京)2016-0011）。

1.2 實(shí)驗(yàn)主要儀器：BP-98A型無創(chuàng)尾動脈血壓測量儀：日本軟融株式會社。

1.3 實(shí)驗(yàn)試劑：9°食用米醋（含總酸≥9.00g/100ml，鎮(zhèn)江恒豐醬醋有限公司生產(chǎn)）；食用小蘇打（碳酸氫鈉，NaHCO3）。

1.4 米醋飲料制備：米醋：9°食用米醋，含總酸≥9.00g/100ml，加水稀釋1倍，即加米醋等量的水，作為米醋稀釋液備用。實(shí)驗(yàn)樣品：取9°食用米醋（含總酸≥9.00g/100ml）1000ml，加入小蘇打，攪拌至小蘇打完全溶解。測定PH值，如果PH值小于6.5，繼續(xù)加入小蘇打，至接近中性（pH值為6.5～7.5）。加水稀釋到2000ml，4℃留存?zhèn)溆谩?/p>

1.5 實(shí)驗(yàn)方法與步驟：分述如下。

1.5.1 實(shí)驗(yàn)分組、用藥及療程：大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)（25±2℃的屏障實(shí)驗(yàn)室）1周后分組，10周齡SHR大鼠32只，雌雄各半，隨機(jī)分為4組：米醋飲料大劑量組、米醋飲料小劑量組、米醋大劑量組、SHR模型組，每組8只。10周齡Wistar大鼠24只，雌雄各半，隨機(jī)分為3組：正常大鼠米醋飲料大劑量組、正常大鼠米醋大劑量組、正常對照組。米醋飲料大劑量組予實(shí)驗(yàn)樣品5ml/kg體重灌胃；米醋飲料小劑量組予實(shí)驗(yàn)樣品0.5ml/kg體重灌胃；米醋大劑量組予配制米醋稀釋液5ml/kg體重灌胃；SHR模型組予生理鹽水等容量灌胃；正常大鼠米醋飲料大劑量組予實(shí)驗(yàn)樣品5ml/kg體重灌胃；正常大鼠米醋大劑量組予配制米醋稀釋液5ml/kg體重灌胃；正常對照組予生理鹽水等容量灌胃。共治療8周。

1.5.2 血壓測量：各組大鼠給藥前測量3次血壓（BP），取均值作為給藥前基礎(chǔ)BP均值。治療過程中，第1次給藥及每周測量1次給藥后2h血壓數(shù)據(jù)，每周測量時間一致。測量前，打開恒溫水浴鍋調(diào)至38℃，水面上放置合適的不銹鋼板，將大鼠置于特制水杯中（大鼠口鼻露出和尾巴置于外部），放于恒溫水浴鍋上加熱5～10min。測量BP時，大鼠狀態(tài)應(yīng)清醒安靜。將BP-98A型無創(chuàng)尾動脈血壓測量儀的加壓感應(yīng)器放在大鼠尾根部（加壓感應(yīng)器指示端與大鼠尾尖方向一致），并通過配套軟件獲取數(shù)據(jù)。每只大鼠每次測量3次BP，均值為該鼠血壓值。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：數(shù)據(jù)資料用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件處理，采用單因素方差分析（ANOVA）；數(shù)據(jù)描述以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，P＜0.05和（或）P＜0.01為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，差異顯著。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

治療前SHR米醋飲料不同劑量組、SHR米醋大劑量組與SHR模型組血壓無顯著差異（P＞0.05），組間有可比性；正常給藥組與正常對照組大鼠的血壓低于同期模型組及各治療組，差異顯著（P＜0.01）。

2.1 米醋與米醋飲料對正常大鼠和SHR大鼠收縮壓的影響：見表1。

2.2 米醋與米醋飲料對正常大鼠和SHR大鼠舒張壓的影響：見表2。

表1 米醋與米醋飲料對正常大鼠和SHR大鼠收縮壓的影響（±s，mmHg）

表1 米醋與米醋飲料對正常大鼠和SHR大鼠收縮壓的影響（±s，mmHg）

注：與SHR模型組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01。

組別正常對照組（n=8）正常大鼠米醋飲料大劑量組(n=8)正常大鼠米醋大劑量組(n=8，7，6)SHR大鼠米醋飲料大劑量組(n=8)SHR大鼠米醋飲料小劑量組(n=8)SHR大鼠米醋大劑量組(n=8，6，5)SHR模型組（n=8）停藥3天129.33± 6.27▲125.58±8.02 126.75±11.61(n=6)196.75±9.57 196.75±9.57 193.07±7.37(n=5)204.58±11.37治療前125.75±5.45▲124.04±4.02 125.11±4.6(n=8)183.71±7.52 184.22±8.76 182.58±8.78(n=8)183.00±5.95治療第1天126.17± 6.75▲116.54±5.59 125.11±3.22(n=8)185.79±9.99 186.84±7.89 160.83±30.96(n=8)186.79±7.50治療4周127.46±6.89▲131.96±4.98 133.67±9.73(n=7)182.25±5.60▲191.36±6.84 188.53±7.43(n=5)195.79±8.21治療8周130.63± 8.89▲130.75±5.62 130.67±9.29(n=6)193.04± 7.95▲195.11±10.95△193.07±13.67△(n=5)206.62±3.68

表2 米醋與米醋飲料對正常大鼠舒張壓的影響（±s，mmHg）

表2 米醋與米醋飲料對正常大鼠舒張壓的影響（±s，mmHg）

注：與SHR模型組比較，△P＜0.05，▲P＜0.01。

組別正常對照組（n=8）正常大鼠米醋飲料大劑量組(n=8)正常大鼠米醋大劑量組(n=8，7，6)SHR大鼠米醋飲料大劑量組(n=8)SHR大鼠米醋飲料小劑量組(n=8)SHR大鼠米醋大劑量組(n=8，6，5)SHR模型組（n=8）停藥3天100.00± 3.14▲97.42±3.73 98.58±8.57（n=6）152.33± 7.36△155.37±8.38 149.07±15.97△（n=5）162.75±5.38治療前93.67±3.90▲95.17±3.76 93.22±1.53（n=8）142.71±4.86 144.21±6.21 143.75±4.41（n=8）143.13±4.12治療第1天92.00± 5.59▲88.21±4.37 92.33±3.06（n=8）143.13±10.85 146.75±5.76 125.33±25.82（n=6）148.83±4.75治療4周102.08±4.98▲101.38±5.58 100.47±8.87（n=7）139.96±6.84▲147.37±7.63 142.00±5.35▲（n=5）153.21±5.33治療8周102.08±3.76▲102.54±4.65 102.50±2.63（n=6）152.29±2.99▲157.37±5.85 156.73±3.37（n=5）162.00±3.67

2.3 大鼠死亡報(bào)告：實(shí)驗(yàn)治療第3天，SHR米醋大劑量組2只大鼠死亡。大鼠死亡前以及死亡時有呼吸困難癥狀和叫聲，死亡后解剖可見肺部充血。實(shí)驗(yàn)治療第4周SHR米醋大劑量組1只大鼠死亡，正常大鼠米醋大劑量組1只大鼠死亡。第6周正常大鼠米醋大劑量組1只大鼠死亡，大鼠死亡前以及死亡時有呼吸困難癥狀和叫聲，死亡后解剖可見肺部充血，并可見肺部炎癥性改變。綜上，在實(shí)驗(yàn)過程中，SHR米醋大劑量組8只中共3只大鼠死亡，占37.5%，正常大鼠米醋大劑量組8只中共2只大鼠死亡，占25.0%。這2組共5只大鼠死亡，均可見基本相同的表現(xiàn)，均與米醋大劑量引起肺損害有關(guān)。

3 討論

食用米醋是用谷子、高粱、糯米、紅棗、蘋果、葡萄等糧食和果品為原料，經(jīng)過發(fā)酵釀造而成的調(diào)味食品?，F(xiàn)代研究顯示，米醋對預(yù)防心腦血管疾病有益，且已有研究證明米醋與硝苯地平聯(lián)合用藥能夠更好地控制高血壓[1］。SHR大鼠是研究原發(fā)性高血壓病的良好動物模型，血壓隨著鼠齡的增長而增高。研究結(jié)果顯示：各組SHR大鼠血壓在給藥前均無顯著差異，開始給藥后，模型組SHR大鼠血壓隨著鼠齡增加有升高趨勢，治療各組血壓隨鼠齡升高不顯著。米醋飲料大劑量組與米醋大劑量組對SHR大鼠的降壓作用均十分顯著（P＜0.05/P＜0.01），治療3～4周即有顯著療效，并對正常大鼠血壓無影響，停藥后3天時血壓回升緩慢。米醋大劑量較長時間連續(xù)使用對SHR大鼠以及正常大鼠均可能造成肺部損害，該劑量相當(dāng)于成年人9°食用米醋25ml連續(xù)使用。大鼠與人類在使用米醋方面是否存在差異，值得深入研究。米醋飲料大劑量組未見大鼠死亡，提示其不具有肺損害等嚴(yán)重副作用，但依然能夠調(diào)整降低血壓。

綜上，本實(shí)驗(yàn)中和米醋中所含的醋酸，避免其較大用量、較長期使用的健康危害，為高血壓治療領(lǐng)域新添通過米醋飲料食療來降低血壓的新方案。