新生兒溶血病檢測(cè)途徑解析

張燕娟

（南通市婦幼保健院 江蘇南通 226000）

新生兒溶血病在臨床上比較常見，其是指母親與新生兒由于血型的不合所引起的一種免疫性溶血反應(yīng)。在新生兒溶血病中比較常見的一種類型就是ABO-HDN，當(dāng)母親為O型血，而新生兒為A型或者B型血時(shí)，極易發(fā)生ABO-HDN。有研究人員發(fā)現(xiàn)，超過一半的ABO型溶血病都發(fā)生在第一胎，這是由于母體在首次妊娠前就已經(jīng)受到了多種因素的刺激，其體內(nèi)已經(jīng)產(chǎn)生了大量的抗A、抗B等IgG之類的抗體[1]。新生兒溶血病并不會(huì)對(duì)母體造成任何形式的影響，但是其會(huì)對(duì)導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)貧血、心力衰竭等，嚴(yán)重的甚至?xí)?dǎo)致新生兒死亡，臨床上加強(qiáng)對(duì)其的檢測(cè)極其重要。本次選取了160例2017年12月至2018年11月本市各醫(yī)院的新生兒溶血病患者以及其母親的血液標(biāo)本，對(duì)其中的158份采用了傳統(tǒng)的試管法進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)另外的158份進(jìn)行凝膠技術(shù)檢測(cè)。具體如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取160例2017年12月至2018年11月本市各醫(yī)院的新生兒溶血病患者以及其母親的血液標(biāo)本各1份，共320份。本組患兒中男74例，女 86例，年齡 1～60 d，平均年齡（33.11±5.69）d。本組 160例母親均為O型血，但是88例新生兒為A型血，72例為B型血。本次研究符合本院倫理學(xué)要求，患者及家屬均知情，且自愿參與本次研究。兩組一般資料對(duì)比無明顯差異（P＞0.05），有可比性。

1.2 方法

取抗人球蛋白試劑、A試劑、B試劑和O試劑紅細(xì)胞，其均由本市血液中心提供。對(duì)新生兒與母親血型進(jìn)行檢測(cè)，將ABO-HDN患者的血液標(biāo)本分成2份，分別將其標(biāo)記為凝膠技術(shù)組和傳統(tǒng)試管組，各包括新生兒的血液標(biāo)本158份。將傳統(tǒng)試管組標(biāo)本采用傳統(tǒng)的試管法進(jìn)行檢測(cè)。將凝膠技術(shù)組標(biāo)本采用凝膠技術(shù)檢測(cè)。

改良Coombs試驗(yàn)，將傳統(tǒng)試管組患兒血液標(biāo)本用生理鹽水進(jìn)行洗滌3次，將其配制成濃度為5%的紅細(xì)胞懸液，并加入抗人球蛋白血清，將其混合。將凝膠技術(shù)組標(biāo)本配制成濃度為0.8%的紅細(xì)胞懸液，并取其中的50μL，將其加入到抗IgG卡的其中一個(gè)小孔內(nèi)，采用凝膠檢測(cè)專用離心機(jī)離心7～8 min，對(duì)其結(jié)果進(jìn)行觀察。

游離抗體試驗(yàn)，在傳統(tǒng)檢測(cè)組血液標(biāo)本中加入抗人球蛋白，對(duì)其血清、血型抗體等進(jìn)行檢測(cè)。凝膠技術(shù)組，取一張IgG卡，在上面標(biāo)記上6個(gè)孔，分別為 A、B、O 和 A′、B′、O′，在 A、B、O 孔內(nèi)加入25μL的患兒血清，在A′、B′、O′孔中加入25μL離心后的上層清液，再取50μL濃度為0.8%的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞加入在6個(gè)孔中，將IgG卡進(jìn)行孵育和離心，對(duì)其結(jié)果進(jìn)行觀察。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察并比較兩種檢測(cè)方法對(duì)新生兒溶血病診斷準(zhǔn)確率。診斷標(biāo)準(zhǔn)為改良Coombs試驗(yàn)陽性、抗體釋放試驗(yàn)陽性，而游離抗體試驗(yàn)陽性作為參考依據(jù)。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件處理數(shù)據(jù)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，計(jì)數(shù)資料用%表示，用X2檢驗(yàn)，計(jì)量資料用均數(shù)標(biāo)準(zhǔn)差表示，用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

本組 160例患兒中 ABO-HDN患者有 158例（98.75%），RH-HDN 2例（1.25%）。試管組對(duì)新生兒溶血病診斷準(zhǔn)確率65.19%（103/158）低于凝膠技術(shù)組75.32%（119/158）。試管組改良Coombs試驗(yàn)陽性率、游離抗體試驗(yàn)陽性率、抗體釋放試驗(yàn)陽性率分別為13.29%、15.82%和65.19%，凝膠技術(shù)組分別為22.15%、37.34%和75.32%，試管組各項(xiàng)結(jié)果均低于凝膠技術(shù)組，差異明顯（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。詳見表1所示：

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3 討論

新生兒溶血病的發(fā)病機(jī)制是由于母體內(nèi)存在與胎兒紅細(xì)胞不符合的血型抗體，導(dǎo)致胎兒體內(nèi)出現(xiàn)了紅細(xì)胞的大量溶解和破裂，當(dāng)新生兒出現(xiàn)溶血病后，會(huì)增加其黃疸、貧血、肝脾腫大等疾病的發(fā)生率，嚴(yán)重的甚至還會(huì)導(dǎo)致患兒出現(xiàn)心力衰竭、膽紅素腦病等疾病[2]。因此，應(yīng)及時(shí)采取有效的措施進(jìn)行檢測(cè)診斷。臨床檢測(cè)人員大都選取HDN試驗(yàn)，并且其發(fā)現(xiàn)，對(duì)新生兒溶血病患者及時(shí)進(jìn)行HDN試驗(yàn)，對(duì)患者的診斷和治療均有著非常重要的意義。

傳統(tǒng)的試管法操作比較復(fù)雜，并且對(duì)操作者的要求也比較高，此種檢測(cè)方法測(cè)定的結(jié)果不能保存較長(zhǎng)的時(shí)間，其結(jié)果還極易出現(xiàn)假陰性。而凝膠技術(shù)不但在檢測(cè)的過程中，利用了微柱凝膠顆粒的篩選原理，其是在離心儀離心的作用下，將凝集與非凝集的紅細(xì)胞進(jìn)行了分離，當(dāng)凝集的紅細(xì)胞聚集在了凝膠的上部或者凝膠中時(shí)，判定試驗(yàn)結(jié)果為陽性，此時(shí)沒有發(fā)生凝集的紅細(xì)胞會(huì)自動(dòng)的沉積在凝膠管的底部，此時(shí)判定試驗(yàn)結(jié)果為陰性。此種檢測(cè)技術(shù)充分的利用了抗原可抗體反應(yīng)的原理，使操作起來更加簡(jiǎn)便和快捷，并且此種檢測(cè)方法的檢測(cè)結(jié)果還容易保存，有效的避免了抗體蛋白在蛋白質(zhì)中的殘留，還避免了殘留鹽分對(duì)抗球蛋白進(jìn)行稀釋后引起的假陰性，有效的提高了臨床診斷的準(zhǔn)確率[3]。

本次研究結(jié)果也顯示，試管組改良Coombs試驗(yàn)的陽性率、游離抗體試驗(yàn)的陽性率、抗體釋放試驗(yàn)的陽性率分別為13.29%、15.82%和65.19%，凝膠技術(shù)組分別為22.15%、37.34%和75.32%，試管組各項(xiàng)結(jié)果均低于凝膠技術(shù)組，差異明顯（P＜0.05），有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這與劉蕾[4]的研究結(jié)果是一致的。進(jìn)一步提示凝膠技術(shù)對(duì)HDN陽性的檢出是有效的，其診斷效果值得肯定。

綜上所述，臨床上診斷新生兒溶血病患者時(shí)，凝膠技術(shù)的檢測(cè)效果優(yōu)于傳統(tǒng)的試管法檢測(cè)效果，建議將此種技術(shù)應(yīng)用在更多的臨床上。