噻托溴銨對(duì)COPD患者痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)、炎癥因子及MMP-9水平的影響

黃潘文 張 平 方年新

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)為呼吸系統(tǒng)常見的一種慢性肺部疾病，以氣流受限為特征，患者伴有氣道對(duì)有害顆?；驓怏w的異常炎癥反應(yīng)，嚴(yán)重者可能喪失勞動(dòng)及自理能力[1-4]。研究表明COPD患者肺部的巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞明顯增加，激活釋放血清中基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)等多種介質(zhì)破壞肺部結(jié)構(gòu)從而加重患者病情[5-6]。故臨床上抗炎對(duì)患者的治療至關(guān)重要，常規(guī)的小劑量茶堿雖然可以抑制部分炎癥細(xì)胞，但臨床效果不顯著[7-8]。噻托溴銨為一種長(zhǎng)效抗膽堿藥，可以舒張氣道平滑肌和減少粘液分泌，臨床上常用于治療哮喘和COPD[9-10]。本文探討噻托溴銨對(duì)COPD患者痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)、炎癥因子及MMP-9水平的影響，報(bào)道如下。

資料與方法

一、一般資料

選擇2014年6月至2017年10月我院收治的79例穩(wěn)定期COPD患者為研究對(duì)象，隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組(41例)與對(duì)照組(38例)，其中實(shí)驗(yàn)組男25例，女16例，年齡42～76歲，平均年齡(56.23±12.95)歲，病程2.8～14.6年，平均病程(6.25±2.78)年。對(duì)照組男23例，女15例，年齡44～79歲，平均年齡(56.12±13.04)歲，病程2.5～15.1年，平均病程(6.79±2.65)年。本文已得到我院倫理委員會(huì)許可。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均符合穩(wěn)定期COPD的相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)[11]；②COPD自我評(píng)估問卷評(píng)分大于9分，或呼吸困難分級(jí)不小于2級(jí)；③第1 s用力呼氣容積值介于30%至50%，且第1 s用力呼氣容積和用力肺活量比值小于70%；④咳嗽咳痰等癥狀表現(xiàn)較輕，且肺功能等指標(biāo)較為穩(wěn)定；⑤入選前一個(gè)月內(nèi)無使用過抗膽堿藥物治療史或COPD急性發(fā)作史者；⑥對(duì)本文中使用到的藥物無過敏史者；⑦無神經(jīng)系統(tǒng)功能異常者；⑧對(duì)本文知情同意者。兩組患者的年齡和性別等比較均無明顯差異(均P>0.05)，具有可比性。

二、研究方法

所有患者均給予控制性吸氧、祛痰、糾正電解質(zhì)紊亂及營(yíng)養(yǎng)支持等常規(guī)治療，并口服0.1 g茶堿緩釋片(修正藥業(yè)集團(tuán)股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H22021080，規(guī)格：每片0.1 g)治療，2次/d；實(shí)驗(yàn)組患者在此基礎(chǔ)上吸入18 μg噻托溴銨(浙江仙琚制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字：H20090276，規(guī)格：每粒18 μg)輔助治療，1次/d，2個(gè)月為一個(gè)療程。

所有患者于于治療前、治療1周后、1個(gè)月后及2個(gè)月后采集誘導(dǎo)痰：患者霧化吸入3%高滲鹽水，2 min后采用雙氧水漱口，深咳痰液，收集1 g以上痰液于離心管，以離心半徑8 cm，3 500 r/min離心20 min，于光學(xué)顯微鏡下觀察沉淀細(xì)胞，記錄痰液炎癥細(xì)胞數(shù)量，包括淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、中性粒細(xì)胞及嗜酸細(xì)胞，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)痰上清液MMP-9水平。所有患者于治療前、治療1個(gè)療程后于早晨空腹?fàn)顟B(tài)下取3 ml靜脈血，離心后取血清用于檢測(cè)相關(guān)指標(biāo)，采用酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)血清高遷移率族蛋白1(High mobility group protein 1, HMGB-1)、白細(xì)胞介素-8(Interleukin-8, IL-8)及腫瘤壞死因子α(Tumor necrosis factor alpha, TNF-α)。

三、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié) 果

一、兩組患者治療前后痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)比較

治療后兩組患者淋巴細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞均比治療前有所提高，但實(shí)驗(yàn)組巨噬細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞低于對(duì)照組(均P<0.05)；兩組治療前后中性粒細(xì)胞均無明顯變化(均P>0.05)，見表1。

二、兩組患者治療前后相關(guān)炎癥因子水平比較

治療前兩組患者HMGB-1、IL-8和TNF-α水平比較無明顯差異(P>0.05)；經(jīng)治療后兩組患者HMGB-1、IL-8和TNF-α水平均有所降低，且實(shí)驗(yàn)組患者的降低程度大于對(duì)照組(P<0.05)，見表2。

表1兩組患者治療前后痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)比較

表2兩組患者治療前后相關(guān)炎癥因子水平比較

三、兩組患者治療前后MMP-9水平變化情況比較

治療前實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的MMP-9水平分別為(719.06±65.12)μg/L和(716.43±68.12)μg/L，兩組相比無明顯差異(t=0.175，P>0.05)；兩組患者M(jìn)MP-9水平隨著治療時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降，治療1周后、1個(gè)月后及2個(gè)月后實(shí)驗(yàn)組MMP-9水平分別為明顯(619.14±63.28)μg/L、(457.21±59.46)μg/L和(368.17±58.17)μg/L，均明顯低于對(duì)照組的(673.28±64.04)μg/L、(548.51±61.39)μg/L和(459.68±60.52)μg/L(t=4.252、7.554、7.708，P<0.05)。

四、兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生情況比較

實(shí)驗(yàn)組患者治療后出現(xiàn)惡心1例，口干1例，皮疹1例，不良反應(yīng)發(fā)生率為7.32%(3/41)；參照組患者出現(xiàn)惡心1例，聲嘶1例，不良反應(yīng)發(fā)生率為5.26%(2/38)，兩組不良反應(yīng)發(fā)生率比較無明顯差異(χ2=0.008，P>0.05)。

討 論

COPD可導(dǎo)致患者呼吸困難及肺功能下降，具有較高的發(fā)病率，目前認(rèn)為其主要與有害顆粒和氣體導(dǎo)致的異常炎癥反應(yīng)有關(guān)，但相關(guān)的發(fā)病機(jī)制尚未明確[12-14]。對(duì)穩(wěn)定期COPD患者臨床上一般通過常規(guī)的抗感染及平喘方式進(jìn)行治療，但對(duì)肺功能的改善效果不理想[15-16]。研究表明，噻托溴銨作為一種長(zhǎng)效抗膽堿類藥物，可以有效抑制氣道上的M3膽堿能受體，減少平滑肌張力，起到抑制炎性反應(yīng)作用，從而可以有效擴(kuò)張支氣管并減少肺過度充氣[17-19]。

本文將對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組分別予以常規(guī)治療和吸入噻托溴銨輔助治療，結(jié)果顯示，經(jīng)治療后，兩組淋巴細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞均比治療前有所提高，但實(shí)驗(yàn)組巨噬細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞低于對(duì)照組(均P<0.05)；兩組治療前后中性粒細(xì)胞均無明顯變化(均P>0.05)?？梢娊?jīng)藥物治療后，患者的淋巴細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞被激活，而巨噬細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞得到一定抑制。研究表明，COPD會(huì)導(dǎo)致免疫功能紊亂，患者免疫功能普遍下降，而T淋巴細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)進(jìn)行自我調(diào)節(jié)的樞紐，其含量會(huì)比健康人有所降低，而巨噬細(xì)胞由于直接參與眾多免疫炎性反應(yīng)大量存在病灶中心及外周氣道中，在COPD的發(fā)病機(jī)制過程中起著重要作用[20-23]。嗜酸細(xì)胞也與該疾病的發(fā)病機(jī)制相關(guān)，但目前有關(guān)其在COPD患者中具體的含量情況仍然存在爭(zhēng)議，研究證實(shí)COPD患者誘導(dǎo)痰里嗜酸粒細(xì)胞及嗜酸細(xì)胞陽離子蛋白含量明顯比健康人高[24-25]。本文結(jié)果中實(shí)驗(yàn)組巨噬細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞低于對(duì)照組，可見噻托溴銨可以有效抑制巨噬細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞，在一定程度上可以改善COPD患者病情。但有關(guān)上述痰液炎癥細(xì)胞含量的變化是如何具體作用于COPD患者的炎癥過程還有待進(jìn)一步探討。

研究表明，炎癥因子的大量產(chǎn)生、蛋白酶失衡以及肺組織里彈性基質(zhì)的降解跟COPD的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[26-27]。HMGB-1作為一種新型炎癥介質(zhì)，能夠通過激活中性粒細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等途徑來促使患者機(jī)體炎癥反應(yīng)的級(jí)聯(lián)放大；巨噬細(xì)胞和氣道上皮細(xì)胞可產(chǎn)生大量IL-8和TNF-α等細(xì)胞趨化因子，進(jìn)一步誘導(dǎo)炎性反應(yīng)；MMP-9是一種重要的基質(zhì)金屬蛋白酶，可以將細(xì)胞外基質(zhì)的蛋白降解以破壞肺泡壁并增加氣道重塑，故其含量一旦過高將損害患者肺部組織[28-29]。本文結(jié)果顯示，治療后兩組HMGB-1、IL-8和TNF-α水平均有所降低，且實(shí)驗(yàn)組的降低程度大于對(duì)照組(均P<0.05)。兩組MMP-9水平隨著治療時(shí)間延長(zhǎng)逐漸下降，治療1周后、1個(gè)月后及2個(gè)月后實(shí)驗(yàn)組MMP-9水平明顯低于參照組(均P<0.05)。提示噻托溴銨治療COPD患者可以有效改善炎性反應(yīng)、降低患者M(jìn)MP-9水平，與魏曉陽等[30]的研究結(jié)果相一致。噻托溴銨具有毒蕈堿受體亞型M1～M5類似的親和力，可以特異性地作用于氣道平滑肌上的M3膽堿能受體，并激活Gαq信號(hào)通路的活性進(jìn)而起到舒張氣道的作用；還可以抑制支氣管粘液分泌，通過降低迷走神經(jīng)張力來糾正氣道構(gòu)型，從而減少氣流的限制作用改善肺泡有效通氣量[31]。噻托溴銨的藥效具有專一效應(yīng)，能夠維持1 d以上，可以更好地減輕患者的炎癥反應(yīng)，降低對(duì)受損氣道的重塑作用以及對(duì)肺組織的損害，有利于患者肺功能及呼吸功能的恢復(fù)。此外，本文發(fā)現(xiàn)治療后兩組患者不良反應(yīng)發(fā)生率均較低，且兩組間比較無明顯差異(P>0.05)，表明噻托溴銨應(yīng)用于治療COPD患者安全性能良好。

綜上所述，噻托溴銨治療COPD患者能有效改善痰液炎癥細(xì)胞計(jì)數(shù)和相關(guān)炎癥因子的表達(dá)、降低患者M(jìn)MP-9水平，且具有較好的安全性，值得推廣應(yīng)用。