硝基呋喃類藥物及其代謝物檢測(cè)方法的研究進(jìn)展

摘要：本文對(duì)于硝基呋喃類藥物具體的種類和理化性質(zhì)以及可能帶來(lái)的危害進(jìn)行了相關(guān)的分析，并且對(duì)于膠體金免疫和酶聯(lián)免疫以及高效液相色譜，還有液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜等一些當(dāng)前被使用在對(duì)硝基呋喃類藥物和其代謝物殘留進(jìn)行檢查方式的具體使用情況進(jìn)行研究，同時(shí)針對(duì)這一藥物檢測(cè)方式的有效應(yīng)用給出了個(gè)人的一些建議。

關(guān)鍵詞：硝基呋喃類藥物及代謝物;檢測(cè)方法;研究進(jìn)展

1 硝基呋喃類藥物簡(jiǎn)介

硝基呋喃類藥物其本身屬于呋喃核的5位引入硝基以及2位被引入到其他基團(tuán)中的一種通過(guò)人工合成方式生成的抗菌藥。因?yàn)檫@一類類藥物其本身都存在C=N雙鍵與5-硝基呋喃環(huán)的一種結(jié)構(gòu)，因此四種藥物的理化性質(zhì)是相同的，其都屬于一種無(wú)臭并且味苦，同時(shí)擁有穩(wěn)定性質(zhì)的一種黃色結(jié)晶粉末。其本身對(duì)于光敏感和代謝會(huì)產(chǎn)生一定的影響，其在和蛋白質(zhì)融合在一起的時(shí)候會(huì)構(gòu)成一種相對(duì)穩(wěn)定的蛋白結(jié)合物。

2 硝基呋喃類藥物及其代謝物殘留檢測(cè)方法

2.1 膠體金免疫法（GICA）

膠體金免疫法其屬于前處理的方式其進(jìn)行反應(yīng)的時(shí)間相對(duì)較短，并且僅僅需要使用肉眼就能夠?qū)ζ溥M(jìn)行定性的一種檢測(cè)方法。我國(guó)的相關(guān)研究人員對(duì)于飼料中硝基呋喃抗生素膠體金檢測(cè)試的紙條進(jìn)行研究，檢測(cè)出其中呋喃唑酮和呋喃它酮，以及呋喃西林與呋喃妥因進(jìn)行檢測(cè)的最低極限分別能夠達(dá)到5，3，2，2 μg·kg-1，假陽(yáng)性率能夠達(dá)到2%，假陰性率則能夠達(dá)到為0。

2.2 酶聯(lián)免疫法（ELISA）

酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)是一種具有高特異性和高靈敏度的半定量定量方法。它操作簡(jiǎn)單，檢測(cè)時(shí)間短。它可以實(shí)現(xiàn)大量樣品的同時(shí)檢測(cè)。因此，它經(jīng)常被用作藥物殘留分析的篩選方法。2004年，Cooper等首次制備了AOZ多長(zhǎng)抗體，并提出了用于蝦組織AOZ檢測(cè)的ELISA方法。該方法的建立為開(kāi)發(fā)硝基呋喃代謝物的ELISA奠定了基礎(chǔ)。徐一平[24]建立了AHD的ELISA方法，檢出限為0.085 mg·mL-1，通過(guò)測(cè)定豬肉樣品的回收率確定了該方法的準(zhǔn)確性。現(xiàn)在市場(chǎng)上，如德國(guó)R-Biopharm，英國(guó)RANDOX等公司都有成熟的產(chǎn)品。

2.3高效液相色譜（HPLC）

高效液相色譜法是檢測(cè)硝基呋喃及其代謝物的常用方法之一。由于呋喃結(jié)構(gòu)的紫外光譜吸收不明顯，靈敏度降低，不能滿足檢測(cè)要求。然而，衍生化后，硝基呋喃代謝產(chǎn)物可以產(chǎn)生強(qiáng)烈的紫外吸收，檢測(cè)限提高到1μg·kg-1。王元等建立了一種用酸測(cè)定水產(chǎn)品中四種硝基呋喃代謝物的方法。- 分解樣品，2-氯苯甲醛衍生化，用乙酸乙酯萃取，并用SPE柱純化，5.0-500。μg·L-1濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量限為1.0μg·kg -1，兩次加入濃度水平的平均回收率為76%～102%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于10%（n = 6）。Chumanee等采用2-萘醛甲醛衍生法，用液相色譜 - 二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)蝦肉中4種硝基呋喃代謝物，檢出限為1μg·kg-1。

3 結(jié)論

目前，用于硝基呋喃類抗生素和其代謝物檢測(cè)方式主要有膠體金免疫法和酶聯(lián)免疫法以及液相色譜即串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)法，液相色譜法的優(yōu)勢(shì)是自動(dòng)化和精準(zhǔn)度相對(duì)較高，可是其因?yàn)槭艿交|(zhì)效應(yīng)的干擾經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生一些假陽(yáng)性，并且其檢測(cè)的儀器相對(duì)比較貴操作過(guò)程較為繁瑣在進(jìn)行前處理過(guò)程較為復(fù)雜，因此需要有專業(yè)的人員對(duì)其進(jìn)行分析。而液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法，其自身的特異性相對(duì)較高敏感度和精確度也非常的強(qiáng)，這樣的情況使得檢測(cè)極限相對(duì)較低?？墒瞧湓谑褂蒙系某杀颈容^高，操作流程復(fù)雜是其存在的主要缺點(diǎn)。而酶聯(lián)免疫法和膠體金免疫法基本上擁有快速簡(jiǎn)便和高特異性的優(yōu)勢(shì)，可是卻不能夠去完成電量檢測(cè)的需求，并且其經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生一些假陽(yáng)性或者是假陰性的風(fēng)險(xiǎn)。所以針對(duì)不同的環(huán)節(jié)和不同的樣品，需要結(jié)合實(shí)際的情況去選擇不同的方式，只有這樣才能夠使得其測(cè)量的結(jié)果更加的準(zhǔn)確和高效，除此之外還能夠降低使用資金。而在對(duì)液相色譜或串聯(lián)質(zhì)譜檢測(cè)方式進(jìn)行使用的過(guò)程中建議去運(yùn)用內(nèi)標(biāo)法去完成定量這種方式不僅能夠減少基質(zhì)效應(yīng)對(duì)其產(chǎn)生的干擾同時(shí)還能夠防止前處置技術(shù)過(guò)程中目標(biāo)成分丟失而產(chǎn)生的定量不精準(zhǔn)的情況。對(duì)于酶聯(lián)免疫法或膠體金免疫法進(jìn)行選擇的時(shí)候，需要盡可能選擇一些質(zhì)量合格，并且其自身穩(wěn)定性較高的產(chǎn)品，同時(shí)使其在對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行使用之前完成所需要的驗(yàn)證。

硝基呋喃代謝物需要經(jīng)過(guò)衍生增大分子量，通過(guò)這種方式去使其色譜行為得到改善同時(shí)還能夠令離子化效率檢測(cè)的精準(zhǔn)度與靈敏度得到提升，當(dāng)前我們國(guó)家所制定的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)和國(guó)外報(bào)告的文獻(xiàn)里的一些標(biāo)準(zhǔn)都是通過(guò)加入了其他物質(zhì)去保持在恒定溫度下進(jìn)行檢測(cè)的這樣的一種情況所需要的檢測(cè)時(shí)間相對(duì)較久，并且其檢測(cè)效率也無(wú)法得到有效保證，尤其是在遇到一些緊急或突發(fā)情況的時(shí)候，就會(huì)使得檢測(cè)機(jī)構(gòu)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的上報(bào)出現(xiàn)延遲，當(dāng)前很多文獻(xiàn)報(bào)道選擇的都是新型衍生化劑去進(jìn)行檢測(cè)，這樣的一種方式能夠減少衍生時(shí)間，同時(shí)還能夠滿足檢測(cè)極限，使其回收率得到較大提升，筆者曾經(jīng)通過(guò)把溫度提高到60度的方式，持續(xù)4小時(shí)去對(duì)其進(jìn)行驗(yàn)收，獲得的結(jié)果和連續(xù)進(jìn)行16個(gè)小時(shí)的衍生，存在的差異并不是很大，但是如果將這種方式進(jìn)行大范圍的使用，還需要對(duì)其進(jìn)行進(jìn)一步的驗(yàn)證。

參考文獻(xiàn)：

[1]生威，李季，許艇.動(dòng)物性產(chǎn)品中硝基呋喃類抗生素殘留檢測(cè)方法研究[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境科學(xué)學(xué)報(bào)，2006（25）：429-434.