240 g/L蟲螨腈懸浮劑對桑螟防效及對家蠶毒性測定＊

楊一平，林蔚紅，戴建忠，張 芬，錢秋杰，孫海燕，陳偉國

（浙江省海寧市蠶桑技術(shù)服務(wù)站，浙江 海寧 314400）

桑螟是桑園主要害蟲之一，秋季第4、5代易暴發(fā)成災(zāi)，常導(dǎo)致桑園片葉不存，嚴(yán)重影響秋蠶飼養(yǎng)［1］。因高齡桑螟幼蟲潛伏隱蔽的特點，農(nóng)藥防治要求在低齡期進行，而秋季采葉養(yǎng)蠶間隔時間短，可選的適用農(nóng)藥品種極少，再加上從2017年開始，桑園主要殺蟲劑“滅多威”列入限制使用農(nóng)藥名錄［2，3］，對秋季桑螟防治非常不利，生產(chǎn)上急需新的適用農(nóng)藥品種。

蟲螨腈（Chlorfenapyr）又名溴蟲腈，是美國氰胺公司于20世紀(jì)80年代后期研制開發(fā)的芳基吡咯類殺蟲殺螨劑。該藥主要通過氧化磷酸化的解偶聯(lián)作用阻礙昆蟲呼吸，使昆蟲不能產(chǎn)生能量而導(dǎo)致軀體癱瘓，從而無法進行正常的生理活動而死亡［4，5］。蟲螨腈對家蠶和桑園害蟲間存在一定的選擇毒性，對非靶標(biāo)生物家蠶的毒性較低［6］，因而成為近年來桑園害蟲防治農(nóng)藥的主要篩選試驗對象。為進一步明確蟲螨腈防治桑螟的藥效以及對養(yǎng)蠶生產(chǎn)的安全性，我們于2018年秋季進行了24%蟲螨腈懸浮劑應(yīng)用試驗。

1 材料與方法

1.1 供試材料

1.1.1 供試農(nóng)藥

240 g/L蟲螨腈懸浮劑（江蘇生久農(nóng)化有限公司生產(chǎn)），40%辛硫磷乳油（江蘇寶靈化工股份有限公司生產(chǎn)），77.5%敵敵畏乳油（南通江山農(nóng)藥化工股份有限公司生產(chǎn)）。

1.1.2 供試桑園

海寧市蠶桑站試驗桑園，8年生“農(nóng)桑14號”，中低桿養(yǎng)成，每667 m2桑園栽1000株。

1.1.3 家蠶品種

一代雜交種為“白玉×秋豐”，浙江省海寧市新興蠶種制造有限公司生產(chǎn)。

1.2 對桑螟田間防效試驗方法

1.2.1 處理設(shè)置

設(shè)240 g/L蟲螨腈懸浮劑750倍（320 mg/L）、1500倍（160 mg/L）2個稀釋濃度處理，77.5%敵敵畏乳油750倍+40%辛硫磷乳油1500倍（以下簡稱“敵辛混劑”）為農(nóng)藥對照，噴清水為空白對照，共4個處理，處理間設(shè)2行桑樹保護。

1.2.2 噴藥方法

采用大紅葉3WBD-16HBA電動噴霧器，以桑葉正反面均勻噴濕為度，農(nóng)藥處理和清水對照區(qū)噴水量一致。

1.2.3 調(diào)查方法

在噴藥前和噴藥后2 d、4 d、8 d、12 d調(diào)查，分別調(diào)查記載低齡（1～3齡）和高齡（4～5）桑螟蟲量，重復(fù)3次，計算各農(nóng)藥處理重復(fù)小區(qū)的蟲口減退率及校正防效。

1.3 對家蠶毒性試驗方法

1.3.1 蟲螨腈對家蠶的室內(nèi)毒性測定

在預(yù)備試驗基礎(chǔ)上，將240 g/L蟲螨腈懸浮劑稀釋成7～9個梯度濃度，取適熟桑葉分別浸入不同濃度的藥液中1 min，取出后自然晾干，置于保鮮盒內(nèi)，然后給入20頭3齡起蠶，在溫度26.5℃±1℃、相對濕度75%～85%的恒溫室內(nèi)飼喂藥葉，添毒時間分24 h、48 h和72 h，然后改用新鮮無毒桑葉繼續(xù)飼養(yǎng)至4齡餉食，每天調(diào)查家蠶幼蟲中毒死亡數(shù)，以清水處理為空白對照，重復(fù)3次。

1.3.2 蟲螨腈在桑葉上的殘留毒性試驗

殘毒試驗以農(nóng)藥處理和采葉養(yǎng)蠶間隔時間為雙向處理組合。農(nóng)藥處理為240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L、160 mg/L，“敵辛混劑”為農(nóng)藥對照，清水為空白對照，共4個處理。采葉養(yǎng)蠶間隔時間設(shè)噴藥后1 d、2 d、3 d、4 d、5 d、7 d，各處理小區(qū)30頭蠶供試，重復(fù)3次。供試家蠶1～2齡期常規(guī)飼養(yǎng)，3齡起蠶開始分別飼喂不同處理的桑葉，連續(xù)1個齡期，逐日調(diào)查記載各處理死亡蠶頭數(shù)；其中噴藥后3 d、5 d、7 d處理區(qū)繼續(xù)飼養(yǎng)到上蔟結(jié)繭，調(diào)查各小區(qū)繭質(zhì)成績。

1.4 數(shù)據(jù)處理

蟲口減退率和校正防效計算公式如下：蟲口減退率（%）=（1-殘存蟲口量/施藥前蟲口量）×100%；校正防效（%）=（處理組蟲口減退率-對照組蟲口減退率）/（100-對照組蟲口減退率）×100%。

試驗數(shù)據(jù)均采用DPS（15.10版）數(shù)據(jù)處理軟件統(tǒng)計［7］，以Duncan新復(fù)極差測驗法進行多重比較，檢測田間藥劑試驗校正防效的差異顯著性；對藥液質(zhì)量濃度對數(shù)與幼蟲死亡率概率值進行線性回歸分析，求出致死中濃度（LC50）和95%置信限。

2 結(jié)果與分析

2.1 田間防效

從表1可以看出，噴藥后2 d，240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L對1～3齡桑螟的防效最高，“敵辛混劑”略低，240 g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L最低，3個處理校正防效均在70%以上，處理間差異不顯著。噴藥后4 d，3個處理校正防效均提高到80%以上，240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L校正防效達到94.47%，處理間差異也不顯著，表明240 g/L蟲螨腈懸浮劑藥效作用較慢。噴藥后8 d和12 d，240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L的校正防效顯著高于240 g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L，兩者均極顯著高于“敵辛混劑”?！皵承粱靹钡男Ｕ佬С掷m(xù)下降，表明240 g/L蟲螨腈懸浮劑的藥效期明顯長于“敵辛混劑”。

從表2可見，噴藥后2 d，對4～5齡桑螟的校正防效，240g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L顯著高于240g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L，兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。噴藥后4 d，240g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L極顯著高于240g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L，兩者均極顯著高于“敵辛混劑”。噴藥后2 d、4 d、8 d和12 d，3個處理校正防效均持續(xù)增高，其中噴藥后2～4 d的增幅最大，且噴藥后8 d和12 d的防效高于表1中1～3齡桑螟的同期防效，這是因為除了藥劑對4～5齡桑螟的直接作用外，對1～3齡桑螟的防效在后期疊加到對4～5齡桑螟的防效上所致。由此可見，在桑螟低齡期防治十分關(guān)鍵。

從表3可見藥劑處理對全齡桑螟的防效趨勢，240g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L的校正防效從噴藥后2 d到12 d均呈現(xiàn)持續(xù)增高，“敵辛混劑”從噴藥后4 d到12 d則持續(xù)下降，表明240 g/L蟲螨腈懸浮劑的藥效期明顯長于“敵辛混劑”。

2.2 對家蠶的毒性

2.2.1 240 g/L蟲螨腈懸浮劑對家蠶的食下毒性

240 g/L蟲螨腈懸浮劑對3齡起蠶的食下毒性隨著連續(xù)添毒時間的延長而增強，見表4。3齡起蠶添毒24 h的LC50＞3750 mg/L（即240 g/L蟲螨腈懸浮劑稀釋64倍），連續(xù)添毒48 h的LC50為1858.2552 mg/L（即240 g/L蟲螨腈懸浮劑稀釋129倍），連續(xù)添毒72 h的LC50為1207.4615 mg/L（即240 g/L蟲螨腈懸浮劑稀釋99倍）。添毒后24 h內(nèi)一般僅少量中毒死亡蠶，2～3 d后是死亡高峰，可見240 g/L蟲螨腈懸浮劑對家蠶的食下毒性較低，藥效作用較慢，隨時間延長而表現(xiàn)出累積效應(yīng)。

參照2014年發(fā)布的《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評價試驗準(zhǔn)則第11部分：家蠶急性毒性試驗》附錄A“農(nóng)藥對家蠶的毒性等級劃分”［8］，240 g/L蟲螨腈懸浮劑對家蠶的毒性等級為低毒（LC50＞200 mg/L）。

2.2.2 240g/L蟲螨腈懸浮劑在桑葉上的殘留毒性

由于240 g/L蟲螨腈懸浮劑在桑葉上的殘留毒性試驗濃度為320 mg/L和160 mg/L，遠低于食下毒性測定的LC50值，因此上述濃度藥液噴灑桑葉后飼喂3齡起蠶不表現(xiàn)中毒癥狀和死亡蠶。農(nóng)藥對照處理“敵辛混劑”噴藥后1 d采葉飼喂3齡蠶，死亡率100%，間隔2 d的死亡率為91.11%，間隔3 d后采葉飼喂3齡蠶無中毒癥狀和死亡蠶（表5）。

表1 240g/L蟲螨腈懸浮劑對桑螟1～3齡幼蟲的防效Table 1 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 1st～3rd Instar Larvae of Phalidid Caterpillar

表2 240g/L蟲螨腈懸浮劑對桑螟4～5齡幼蟲的防效Table 2 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling 4th～5th Instar Larvae oOf Phalidid Caterpillar

表3 240g/L蟲螨腈懸浮劑對桑螟全齡幼蟲的防效Table 3 Effect of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Controlling All Larval Duration of Phalidid Caterpillar

2.2.3 240g/L蟲螨腈懸浮劑處理桑葉的飼養(yǎng)成績

噴藥后3 d、5 d、7 d處理區(qū)飼養(yǎng)至上蔟結(jié)繭，養(yǎng)蠶成績見表6。3齡起蠶結(jié)繭率，240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L、160 mg/L不同間隔時間處理組合與清水對照差異均不顯著，與“敵辛混劑”噴藥后3 d、5 d的差異亦不顯著，但“敵辛混劑”噴藥后7 d的結(jié)繭率最低，可能因試驗誤差所致。各處理組合的好蛹率指標(biāo)都很高，處理間差異不顯著，表明供試農(nóng)藥對化蛹無不良影響。各處理組合的粒繭重差異不顯著，但總體來說數(shù)值偏小，主要是因為試驗在晚秋蠶期進行，桑葉老化、硬化導(dǎo)致蠶體小，繭形小。繭層率指標(biāo)，240 g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后7 d最高，極顯著高于240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后3 d和240 g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后3 d，顯著高于240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后5 d和240 g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L噴藥后5 d，與240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L噴藥后7 d差異不顯著；240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴藥后7 d的繭層率與清水對照差異不顯著，噴藥后5 d和3 d的繭層率顯著低于清水對照。可見240 g/L蟲螨腈懸浮劑處理的桑葉連續(xù)飼蠶對繭層率有一定影響，從養(yǎng)蠶經(jīng)濟性狀指標(biāo)看，240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴霧處理的桑葉應(yīng)當(dāng)在噴藥7 d后采葉養(yǎng)蠶。

3 小結(jié)與討論

試驗結(jié)果表明，240 g/L蟲螨腈懸浮劑對桑螟1～3齡幼蟲的防效優(yōu)于對4～5齡幼蟲的防效，應(yīng)掌握在桑螟低齡期噴藥防治；240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L的防效顯著優(yōu)于160 mg/L，以及對照農(nóng)藥“敵辛混劑”，生產(chǎn)中可與對照農(nóng)藥交替使用；在桑螟常規(guī)蟲量防治時可用240 g/L蟲螨腈懸浮劑160 mg/L，蟲量多或蟲齡高時以320 mg/L為宜。蟲螨腈藥效作用較慢，對桑螟的防效在噴藥后3～4 d時最高，須注意不能為了追求速效性而盲目提高使用濃度，與藥效快的農(nóng)藥混配使用，則可兼顧速效性和持效，馮世民、朱浩龍等［9～10］報道溴蟲腈與辛硫磷混配對桑螟、桑尺蠖防效良好，但在混配比例方面有待進一步優(yōu)化。

表4 240g/L蟲螨腈懸浮劑對3齡起蠶的食下毒性Table 4 Food Toxicity of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent pn Newly Exuviated Silkworm Larvae at Third Instar

表5 240g/L蟲螨腈懸浮劑噴藥后的桑葉對家蠶的殘毒期Table 5 Residual toxicity of 240 g/L Chlorfenapyr suspension agent on silkworm larvae

表6 240g/L蟲螨腈懸浮劑對結(jié)繭率和繭質(zhì)的影響Table 6 Effects of 240 g/l Chlorfenapyr Suspension Agent on Cocooning Rate and Cocoon Quality

240 g/L蟲螨腈懸浮劑對3齡起蠶的急性毒性為低毒，稀釋64倍（3750 mg/L）添毒24 h的死亡率低于50%；連續(xù)添毒48 h和72 h的LC50分別為1858.2552 mg/L、1207.4615 mg/L，即隨著連續(xù)添毒時間的延長而毒性作用增強，表明240 g/L蟲螨腈懸浮劑對家蠶的食下毒性表現(xiàn)為藥效較慢且具有累積效應(yīng)，添毒后24 h內(nèi)一般僅少量中毒死亡蠶，2～3 d后是死亡高峰。這與對桑螟防效最高的時間吻合。羅雁婕等［11］測定了溴蟲腈對2齡起蠶的毒性，添食毒葉24 h內(nèi)沒有引起明顯的死亡，其LC50＞5000 mg/L，添食毒葉96 h的對家蠶的LC50為119.715 mg/L，其毒性累積作用與本試驗的趨勢相似。不同的試驗方法會影響結(jié)果，對于毒性較低且藥效較慢的溴蟲腈，如試驗濃度范圍窄、調(diào)查時間短，其真實中毒結(jié)果尚未表現(xiàn)出來。這可能是溴蟲腈對家蠶的毒性試驗結(jié)果差異較大的主要原因［6，12～14］。

240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴于桑樹后1 d開始采葉，對3齡起蠶均無中毒癥狀和死亡現(xiàn)象，這與室內(nèi)急性食下毒性測定結(jié)果相符。在噴藥后3 d、5 d、7 d采葉飼喂3齡起蠶，直至上蔟結(jié)繭，調(diào)查養(yǎng)蠶成績表明，3齡起蠶結(jié)繭率、好蛹率、粒繭重與清水對照無顯著性差異，但繭層率在噴藥后間隔3 d和5 d均顯著低于清水對照。因此，240 g/L蟲螨腈懸浮劑320 mg/L和160 mg/L噴藥的桑葉應(yīng)當(dāng)間隔7 d后采葉養(yǎng)蠶，避免影響蠶繭質(zhì)量。關(guān)于溴蟲腈在桑葉上的殘毒期測定結(jié)果，以5～7 d的為多［12，15～16］；謝道燕等［17］的試驗結(jié)果為 11 d，而佘柳濤等［18］在不同季節(jié)測定殘毒期，夏季3～5 d，春季＞7 d。由于蟲螨腈在不同地區(qū)、不同季節(jié)噴施后，在桑葉上的殘毒期相差較大，生產(chǎn)上推廣應(yīng)用前應(yīng)經(jīng)過當(dāng)?shù)氐奶镩g試驗。