金屬-有機(jī)框架Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的性能及其裝載洛貝林藥物的基礎(chǔ)研究

鄧臨新 李 崧

(1.云南警官學(xué)院，云南·昆明 650223；2.云南農(nóng)業(yè)大學(xué)，云南·昆明 650221)

前言

金屬有機(jī)框架材料(Metal Organic-Framworks)作為先進(jìn)前沿材料中的一種，是近十幾年來(lái)配位化學(xué)發(fā)展的最快的一個(gè)方向。它具備超分子網(wǎng)狀的結(jié)構(gòu)并結(jié)合了復(fù)合高分子和配位化合物兩者的特點(diǎn)，且兼具無(wú)機(jī)化合物和有機(jī)化合物兩者的優(yōu)點(diǎn)[注]Li， W. B.; Yang， Z. H.; Zhang， G. L.， et al.， Stiff metal-organic framework-polyacrylonitrile hollow fiber composite membranes with high gas permeability [J]. J Mater Chem A 2014， 2(7): 2110-2118. Li， G. Y.; Zhang， B.; Yan， J.， et al.， The directing effect of linking units on building microporous architecture in tetraphenyladmantane-based poly(Schiff base) networks [J]. Chem Commun 2014， 50(15): 1897-1899.。此類框架材料的結(jié)構(gòu)可實(shí)現(xiàn)多樣化的設(shè)計(jì)及實(shí)現(xiàn)可調(diào)控的孔道大小與結(jié)構(gòu)，因此可以實(shí)現(xiàn)半定向設(shè)計(jì)合成[注]Ji， Q.; Lirag， R. C.; Miljanic， O. S.， Kinetically controlled phenomena in dynamic combinatorial libraries [J]. Chem Soc Rev 2014， 43(6): 1873-1884. Hasell， T.; Culshaw， J. L.; Chong， S. Y.， et al.， Controlling the Crystallization of Porous Organic Cages: Molecular Analogs of Isoreticular Frameworks Using Shape-Specific Directing Solvents [J]. J Am Chem Soc 2014， 136(4): 1438-1448.。此類分子功能材料研究跨越了晶體學(xué)、材料學(xué)、無(wú)機(jī)化學(xué)、配位化學(xué)、有機(jī)化學(xué)等諸多領(lǐng)域并成功實(shí)現(xiàn)領(lǐng)域交叉[注]Chen， X. W.; Wan， L.; Huang， J. M.， et al.， Nitrogen-containing carbon nanostructures: A promising carrier for catalysis of ammonia borane dehydrogenation [J]. Carbon 2014， 68: 462-472. Zhang， W.; Jin， Y. H.; Yang， H. S.， et al.， Development and applications of 3D covalent organic polyhedrons (COPs) and porous polymer frameworks (PPFs) through dynamic covalent chemistry [J]. Abstr Pap Am Chem S 2013， 246-249. Yuan， Y.; Sun， F. X.; Zhang， F.， et al.， Targeted Synthesis of Porous Aromatic Frameworks and their Composites for Versatile， Facile， Efficacious， and Durable Antibacterial Polymer Coatings [J]. Adv Mater 2013， 25(45): 6619-6624.。

金屬有機(jī)框架材料作為一種新型納米多孔材料，與活性炭和沸石比較，在氣體的捕獲、儲(chǔ)存與分離[注]Yan， W.; Song-Quan， S.; Ju-Hong， Z.， et al.， Synthesis， structural diversities and properties of a series of transition metal-organic frameworks based on asymmetric dicarboxylic acid and N-donor auxiliary ligand [J]. Inorg Chem Commun 2013， 30: 5-12.[注]Li， Y. W.; Yang， R. T.， Hydrogen storage in metal-organic and covalent-organic frameworks by spillover [J]. Aiche J 2008， 54(1): 269-279.[注]Bureekaew， S.; Sato， H.; Matsuda， R.， et al.， Control of Interpenetration for Tuning Structural Flexibility Influences Sorption Properties [J]. Angew Chem Int Edit 2010， 49(42): 7660-7664.；藥物的緩釋[注]Dinca， M.; Han， W. S.; Liu， Y.， et al.， Observation of Cu2+-H2 interactions in a fully desolvated sodalite-type metal-organic framework [J]. Angew Chem Int Edit 2007， 46(9): 1419-1422.；光、磁、電科學(xué)[注]Lassig， D.; Lincke， J.; Moellmer， J.， et al.， A Microporous Copper Metal-Organic Framework with High H2 and CO2 Adsorption Capacity at Ambient Pressure [J]. Angew Chem Int Edit 2011， 50(44): 10344-10348.，催化科學(xué)[注]Lee， Y. G.; Moon， H. R.; Cheon， Y. E.， et al.， A comparison of the H2 sorption capacities of isostructural metal-organic frameworks with and without accessible metal sites: [{Zn2(abtc)(dMf)(2)}(3)] and [{Cu2(abtc)(dMf)(2)}(3)] versus [{Cu2(abtc)}(3)] [J]. Angew Chem Int Edit 2008， 47(40): 7741-7745.[注]Li， B. Y.; Zhang， Z. J.; Li， Y.， et al.， Enhanced Binding Affinity， Remarkable Selectivity， and High Capacity of CO2 by Dual Functionalization of a rht-Type Metal-Organic Framework [J]. Angew Chem Int Edit 2012， 51(6): 1412-1415.，手性拆分[注]Duan， J. G.; Yang， Z.; Bai， J. F.， et al.， Highly selective CO2 capture of an agw-type metal-organic framework with inserted amides: experimental and theoretical studies [J]. Chem Commun 2012， 48(25): 3058-3060.[注]Lin， Q. P.; Wu， T.; Zheng， S. T.， et al.， A chiral tetragonal magnesium-carboxylate framework with nanotubular channels [J]. Chem Commun 2011， 47(43): 11852-11854.等應(yīng)用領(lǐng)域都表現(xiàn)非常出色并有巨大的應(yīng)用潛力，已成為新型功能材料的研究熱點(diǎn)。

洛貝林是從山梗菜中提取出來(lái)的一種生物堿，它是中樞興奮藥的一種，可以做到選擇性地刺激頸動(dòng)脈體中的化學(xué)感受器，反射性引起迷走神經(jīng)中樞、呼吸中樞與血管運(yùn)動(dòng)中樞興奮[注]Roni M A， Rahman S. Lobeline attenuates ethanol abstinence-induced depression-like behavior in mice.[J]. Alcohol， 2017， 61.。在洛貝林的應(yīng)用過(guò)程中應(yīng)該嚴(yán)格控制劑量的大小，因?yàn)槁遑惲衷谑褂脛┝吭龃蟮耐瑫r(shí)，對(duì)大腦皮質(zhì)、迷走神經(jīng)中樞等的作用也隨之增大，不良反應(yīng)也會(huì)增加，癥狀嚴(yán)重的可引起驚厥[注]Da C E S L， Rodrigues L C， Dos Santos V R， et al. Evaluation of mutagenic and genotoxic activities of lobeline and its modulation on genomic instability induced by ethanol.[J]. Life Sciences， 2014， 103(2):73-78.。

Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O是一種新型3D多孔MOFs材料，本課題組前期已對(duì)其進(jìn)行吸附N2、Ar2和多種有機(jī)分子的研究，但尚未見(jiàn)文獻(xiàn)報(bào)道其作為藥物載體的研究。據(jù)此，本文采用洛貝林為模型藥物，采用兩因素優(yōu)化載藥制備工藝，考察了載藥Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的體外釋藥特性及體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)，為其作為藥物載體的開(kāi)發(fā)應(yīng)用提供了依據(jù)。

一、實(shí)驗(yàn)部分

(一)所用儀器

紅外光譜測(cè)試儀器(Nicolet Impact 410 FT-IR紅外儀)；粉末XRD測(cè)定儀器(Siemens D5005 型X-射線衍射儀)；單晶衍射數(shù)據(jù)(Rigaku/MSC Mercury CCD單晶衍射儀)；熱失重(TGA)測(cè)定(TGA/SDTA851e 熱解重量分析儀)；熒光光譜測(cè)定儀器(Perkin-Elmer LS55型熒光光譜儀)；HEPA Class 100 CO2培養(yǎng)箱( Thermo電子公司) ，振蕩恒溫器(SPX-100B-D，上海薄迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠) ; 高溫恒溫試驗(yàn)箱( GHX-30，無(wú)錫科隆實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司)。

(二)合成金屬有機(jī)框架Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O

1.合成配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯(C16H10N2O8)

圖1 (E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯(C16H10N2O8)結(jié)構(gòu)圖

圖2 (E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯(C16H10N2O8)合成路線

將200mL 濃硫酸倒進(jìn)400ml燒瓶，0℃冰水浴下，邊攪拌邊加入100ml發(fā)煙硝酸。然后將分小份加入10g對(duì)氯甲基苯甲酸，反應(yīng)90分鐘后對(duì)氯甲基苯甲酸完全溶于混酸，將瓶中所有物體倒入600ml冰水中，析出大量白色固體。過(guò)濾并洗滌殘留混酸，所的物于甲苯溶劑中重結(jié)晶。得到化合物3-硝基對(duì)氯甲基苯甲酸白色晶體，烘箱烘干收集(89%)。

50ml無(wú)水乙醇倒進(jìn)300ml燒杯，將5.7g(0.0970mol)KOH溶解于無(wú)水乙醇。接著倒入5.00g(0.0230mol)3-硝基對(duì)氯甲基苯甲酸，生成棕色沉淀，為(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯的鉀鹽。室溫反應(yīng)45min后真空抽濾并把所得固體于70ml水中溶解。加HCl于該水溶液到pH=1并形成沉淀。收集固體，用四氫呋喃溶劑重結(jié)晶，黃色晶體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯(C16H10N2O8)化合物獲得，烘箱烘干收集(78%)。

2.合成化合物Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O

把配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯(C16H10N2O8)(0.15mmol)、4,4’-聯(lián)吡啶(BPY，0.15mmol)、硝酸鋅(Zn(NO3)2·6H2O，0.15mmol)、乙醇2ml、H2O 10ml放到50ml高壓反應(yīng)釜里，調(diào)pH為9，超聲， 150℃兩天。過(guò)濾并洗滌后可獲得菱形黃色晶體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯。元素分析：C 52.45, N 9.34,H 3.11, Zn 10.89%；理論值：C 52.37, N 9.40,H 3.02, Zn 10.98%。該產(chǎn)物組成為： C26H18N4O9Zn(595.81)。

(三)測(cè)定結(jié)構(gòu)

用Bruker Smart-1000 CCD 單晶X射線衍射分析儀對(duì)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O單晶數(shù)據(jù)進(jìn)行測(cè)試。晶體結(jié)構(gòu)解析和結(jié)構(gòu)精修是 SHELXTL 軟件。Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的主要晶體學(xué)數(shù)據(jù)列詳見(jiàn)下表。

表1 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的晶體學(xué)數(shù)據(jù)和結(jié)構(gòu)修正條件

(四)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O載入洛貝林

1.繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線

準(zhǔn)確稱適量洛貝林，以甲醇溶劑配制溶液。用溶劑作空白，波長(zhǎng)掃描尋找最大吸收峰為249nm。然后配制標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度梯度，建立在此波長(zhǎng)處的吸光度(A)和濃度(c)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。該標(biāo)準(zhǔn)曲線適用于載藥環(huán)境。

與上述操作同，以pH=7.4磷酸鹽緩沖液(PBS)為溶劑配制適宜濃度洛貝林溶液，以PBS為空白對(duì)照，建立吸光度(A)和濃度(c)的標(biāo)準(zhǔn)曲線。該標(biāo)準(zhǔn)曲線適用于釋藥環(huán)境。

2.洛貝林載入

準(zhǔn)確稱取干燥活化后的Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 2mg，加入含有10mg洛貝林的1mL甲醇溶液中，超聲混勻，作用24h，離心反應(yīng)液(10000rpm，10min)，取上清液 100 μl ，稀釋到 10mL(100 倍)，測(cè)其 249 nm 下吸光度，并計(jì)算 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 載藥量。

載藥量 = (MOFs內(nèi)藥量/MOFs總質(zhì)量)×100%

(五)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O體外釋放洛貝林性能測(cè)定

取 2 mg 裝載有洛貝林的Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O，放到20 mL PBS 緩沖溶液里，此為實(shí)驗(yàn)組。另取 1.16 mg Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O，放到 20 mL PBS緩沖液中，此為空白組。在(37±1℃)恒溫振蕩器中(振蕩速度 100r.min-1)，每間隔12h取1mL 溶液并加入等量新鮮 PBS 緩沖液，將取出的溶液離心操作(12000rpm, 20min)后，取上清液用紫外光譜測(cè)定其吸光度，根據(jù)所建立的洛貝林標(biāo)曲計(jì)算溶液中洛貝林含量，繪制累積釋放量與時(shí)間關(guān)系曲線，考察載藥后的Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O體外釋放洛貝林性能。

(六)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)

采用含10% 的胎牛血清RPMI 1640培養(yǎng)液來(lái)培養(yǎng)Hela細(xì)胞，取用處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期、生長(zhǎng)狀態(tài)好的Hela細(xì)胞，并用0.25% 的胰蛋白酶消化細(xì)胞，離心操作使細(xì)胞沉淀，用含10%胎牛血清RPMI 1640培養(yǎng)液配制細(xì)胞懸浮液，細(xì)胞密度1×105個(gè)·mL-1，以每孔104個(gè)細(xì)胞接種到96孔培養(yǎng)板里(6個(gè)復(fù)孔)，每孔100μL，把培養(yǎng)板轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱，37℃、5% CO2以及飽和濕度條件下培養(yǎng)24h后更換100μL RPMI1640培養(yǎng)液。實(shí)驗(yàn)分3組:空白對(duì)照(不加細(xì)胞)、陰性對(duì)照(細(xì)胞，不加Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O)、Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O(加細(xì)胞，加Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O)。加入各組藥液各100μL，使質(zhì)量濃度分別為200，100，50，25，12，6μg·mL-1，繼續(xù)培養(yǎng)48h，每孔更換100μL RPMI 1640培養(yǎng)液，加20μL MTT 溶液(5mg·mL-1)，微量振蕩器上振蕩20 min，繼續(xù)培養(yǎng)24h，除掉培養(yǎng)液，每孔加150μL DMSO，酶聯(lián)免疫檢測(cè)測(cè)定于490nm 處的吸光度(A)，可計(jì)算細(xì)胞存活率[注]Li, B. Y.; Zhang, Z. J.; Li, Y., et al., Enhanced Binding Affinity, Remarkable Selectivity, and High Capacity of CO2 by Dual Functionalization of a rht-Type Metal-Organic Framework [J]. Angew Chem Int Edit 2012, 51(6): 1412-1415.。

存活率%=(藥物組-空白組)/(陰性對(duì)照組-空白組)×100%

二、性質(zhì)研究與結(jié)果和討論

(一)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O晶體結(jié)構(gòu)

X射線單晶結(jié)構(gòu)測(cè)試結(jié)果表明Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O晶體為三斜晶系、P-1空間群，其次級(jí)構(gòu)筑單元中含有兩個(gè)Zn(Ⅱ)離子和兩個(gè)配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯，還有兩個(gè)配體聯(lián)吡啶。圖3表示了Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的金屬配位環(huán)境。從中能看出，Zn1與Zn2分別采用6配位形式，與之配位的四個(gè)氧配位原子分別出自于兩個(gè)雙齒螯合結(jié)構(gòu)的羧基氧原子與兩個(gè)水分子；與之配位的兩個(gè)氮配位原子則分別出自兩個(gè)配體聯(lián)吡啶。

圖3可看出，沿ac平面方向，單個(gè)配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯與兩個(gè)Zn(Ⅱ)離子配位，而每個(gè)Zn(Ⅱ)離子還與一個(gè)水分子中氧配位原子和兩個(gè)配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯配位，從而向外延伸構(gòu)成2D平面。沿c軸方向，層和層間又經(jīng)由聯(lián)吡啶柱配體同Zn(Ⅱ)離子配位連接從而搭建3D網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，最終形成具有一維孔道結(jié)構(gòu)的3D金屬-有機(jī)框架材料(圖3-4、圖3-5、圖3-6)。

圖3 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O次級(jí)構(gòu)筑單元

圖4 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 2D層結(jié)構(gòu)

圖5 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的三維結(jié)構(gòu)圖

圖6 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的框架結(jié)構(gòu)圖

(二)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O紅外吸收譜圖

圖7 (E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯配體(右)與Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O(左)的紅外吸收譜圖比較

(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯配體與Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的紅外吸收光譜如圖7，其1598cm-1處吸收峰來(lái)自于苯環(huán)C=C震動(dòng)，1500cm-1處吸收峰則屬于-NO2基團(tuán)的對(duì)稱伸縮，1660cm-1處吸收峰則是c=c雙鍵伸縮振動(dòng)，810cm-1左右處吸收峰是吡啶環(huán)的C…H檢形變振動(dòng)，據(jù)此可證明配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯同配體聯(lián)吡啶配位成功。

(三)顯微鏡與SEM表征Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O

利用顯微鏡和SEM，對(duì)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O形貌進(jìn)行表征。圖8是Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的顯微鏡圖，可看出晶體Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O呈黃色菱形晶體。而圖9是Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 在SEM的表面形貌，可看出Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O表面結(jié)構(gòu)呈魚(yú)鱗狀。

圖8 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O顯微鏡表征

圖9 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2OSEM表征

(四)熒光表征

Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O熒光發(fā)射光譜如圖10。300nm波長(zhǎng)激發(fā)時(shí)，Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O于383nm位置有一發(fā)射信號(hào)。

圖10 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的熒光發(fā)射表征

(五)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O粉末XRD表征

圖11 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的粉末XRD表征

圖11是Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的實(shí)測(cè)和軟件模擬及配體三者的粉末XRD結(jié)果。其中A圖是配體聯(lián)吡啶XRD，B圖是配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯XRD，C圖是Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O實(shí)測(cè)粉末XRD，D圖則是Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的模擬XRD。從圖可看出，Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O實(shí)測(cè)值與軟件模擬值能很好吻合，由此表明此化合物為純相，且同兩配體具有有明顯差異。

(六)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O熱分析表征

在0℃到600℃溫度范圍氮?dú)猸h(huán)境下對(duì)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O進(jìn)行了DSC-TG熱重分析。圖12是Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的DSC-TG圖。從圖中可知，Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O可穩(wěn)定至350℃。Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O在50-200℃溫度范圍發(fā)生第一次熱失重，失重3.78%(理論值3.65%)，可歸因于失去客體分子。而在350℃-560℃溫度范圍發(fā)生結(jié)構(gòu)坍塌從而失重46.58%(理論值45.45%)，最終剩余物49.15%(理論值48.78%)主要成分ZnO。

圖12 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的DSC-TG分析結(jié)果

(七)載藥緩釋研究

1.Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O載藥量測(cè)定

通過(guò)測(cè)量發(fā)現(xiàn)洛貝林甲醇溶液最大吸收峰在 249 nm 處。

表2 給出了洛貝林與載體質(zhì)量之比以及載藥時(shí)間對(duì)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O所載藥物量之間的關(guān)系?？煽闯?，隨著洛貝林與載體質(zhì)量之比的增加(固定載體質(zhì)量，增加藥物質(zhì)量)，Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O載藥量隨之加大；作用時(shí)間的延長(zhǎng)同樣能使Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O載藥量加大．但在不同藥物與載體質(zhì)量比之下，Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O最高載藥量構(gòu)出現(xiàn)于第5天，由此說(shuō)明吸附作用在第5天時(shí)，Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O裝載的藥物量已經(jīng)達(dá)到飽和，載藥量到達(dá)最大值。而當(dāng)作用時(shí)間延長(zhǎng)到7天的時(shí)候，載藥量反而有所下降，這有可能是吸附于Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O表面的部分藥物由于浸泡時(shí)間過(guò)長(zhǎng)而發(fā)生的脫落所導(dǎo)致，由此說(shuō)明最佳的作用時(shí)間是5天。由表2 可知，最佳實(shí)驗(yàn)組條件為藥物與載體質(zhì)量比為5∶1，作用時(shí)間為5天，可得到的最高載藥量為0.355 g/g載體。

表2 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O(m1)裝載洛貝林(m2)的載藥量(n=3)

2.Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O裝載洛貝林的體外釋藥

如圖13所示，釋藥曲線的前半部分比較陡直，釋藥過(guò)程分為兩個(gè)過(guò)程，最初的 12小時(shí)表現(xiàn)為突釋的特性，洛貝林的突釋量在12小時(shí)之內(nèi)為29.2%，這主要是由于吸附于 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O表面的洛貝林?jǐn)U散進(jìn)入介質(zhì)而造成的，隨后則進(jìn)入平穩(wěn)的緩慢釋放階段，吸附于Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 孔道中的洛貝林慢慢被釋放出來(lái)。平穩(wěn)釋放72小時(shí)內(nèi)，洛貝林釋放量達(dá)到 64.15%，而在平穩(wěn)釋放7天之內(nèi)，洛貝林的釋放量則達(dá)到75.23%，顯示出明顯的緩釋效果。

圖13 Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O裝載洛貝林體外釋藥曲線

3.Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

本實(shí)驗(yàn)用正常生長(zhǎng)細(xì)胞(Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 質(zhì)量濃度為0μg·mL-1) 做為陰性對(duì)照組，用Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O作為藥物組，分別作用于Hela 細(xì)胞以此研究Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O的細(xì)胞體外毒性。細(xì)胞體外毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，不同濃度的Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 作用于Hela 細(xì)胞36小時(shí)之后，隨Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O質(zhì)量濃度的加大，細(xì)胞存活率呈現(xiàn)出下降趨勢(shì)，當(dāng)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O質(zhì)量濃度小于20μg·mL-1的時(shí)候，細(xì)胞存活率高，與對(duì)照組比較 P>0.05，而當(dāng)Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O質(zhì)量濃度大于20μg·mL-1的時(shí)候，細(xì)胞存活率隨Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O 質(zhì)量濃度的增大二下降趨勢(shì)變得明顯，在Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O質(zhì)量濃度是250μg·mL-1時(shí)候，細(xì)胞存活率達(dá)到最低值。

綜上，采用溶劑熱法可經(jīng)由配體(E)-二(對(duì)3-硝基苯甲酸)乙烯(C16H10N2O8)合成新型金屬有機(jī)框架材料Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O；用干燥活化處理以后的Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O載入洛貝林，具有較高的載藥量，釋藥曲線顯示出Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O具有緩釋功能，可延長(zhǎng)洛貝林的作用時(shí)間，同時(shí)降低其副作用；而且Zn2(EBNB)2(BPY)2·2H2O具有良好的生物相容性，有望成為優(yōu)良的藥物載體。