長期高頻血小板獻血者凝血功能及健康狀況變化研究

張玉忠，欒 鹢

(1.內(nèi)鄉(xiāng)縣人民醫(yī)院血庫,河南南陽 474350；2.南陽市中心血站,河南南陽 473000)

血小板輸注是目前預防和治療因血小板數(shù)量減少或者功能異常所致出血的重要手段，臨床對單采血小板需求量較大[1]。2011年，原衛(wèi)生部頒布《獻血者健康檢查要求》[2]將單采血小板最短間隔時間縮短為2周，不大于24次/年，不少固定獻血者長期以最大頻率捐獻血小板。枸櫞酸鹽在人體內(nèi)代謝快，大量應(yīng)用于尿毒癥終末期患者血液透析，安全性已得到證實[3]，而單采血小板枸櫞酸鹽抗凝劑(ACD)回輸量遠低于血液透析，故長期血小板捐獻者健康狀況研究應(yīng)注重血小板、造血生長因子及血漿蛋白能否穩(wěn)定再升[4]。但國內(nèi)相關(guān)研究較少，國家相關(guān)規(guī)定中對單采后凝血狀態(tài)的監(jiān)測亦幾乎為零。為此，筆者研究了南陽市中心血站60位長期以2周/次頻率進行血小板捐獻者的凝血功能及健康狀況，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2016年2月至2018年6月在南陽市中心血站以最高頻率(2周/次)連續(xù)捐獻血小板≥24次的捐獻者60例作為研究對象。其中男53例，女7例，中位年齡是27.5歲(21～45歲)。所有血小板捐獻者均簽署知情同意書。納入標準：(1)符合《獻血者健康檢查要求》(GB18467-2011)；(2)每兩周進行1次單采血小板捐獻，且每次捐獻量為2 U。排除標準：(1)中途因任何原因中斷捐獻3周以上者；(2)因任何疾病不滿足獻血者健康要求者。

1.2檢測指標方法 所有捐獻者首次捐獻血小板后(第1次檢測)及連續(xù)單采血小板(Amicus血細胞分離機-德國Fresenius Kabi公司生產(chǎn))達6次(第2次檢測)、12次(第3次檢測)、24次(第4次檢測)后休息10 min，于對側(cè)手臂采集乙二胺四乙酸二鉀(EDTA-K2)抗凝血2 mL和枸櫞酸鈉抗凝血2 mL，于血小板采集24 h后采集生化促凝血2 mL，血樣采集后1 h內(nèi)上機檢測，所有檢測均嚴格按照相應(yīng)操作規(guī)程進行。

1.2.1血常規(guī)和生化檢測 血常規(guī)使用日本希森美康血細胞計數(shù)儀(KX-21)進行檢測，主要統(tǒng)計血紅蛋白(Hb)、血細胞壓積(Hct)、紅細胞(RBC)、平均紅細胞容積(MCV)、紅細胞分布寬度(RDW)、血小板(Plt)、平均血小板容積(MPV)及血小板分布寬度(PDW)。生化檢測指標為促血小板生成素(TPO)、葉酸及清蛋白(Alb)，其中Alb使用AU-400全自動生化分析儀檢測，TPO和葉酸使用瑞士FAME全自動酶聯(lián)免疫分析系統(tǒng)檢測，試劑購自上海酶聯(lián)生物科技有限公司。

1.2.2血栓彈力圖(TEG) TEG使用重慶鼎潤公司生產(chǎn)的血栓彈力圖儀及其配套試劑檢測。取枸櫞酸鈉抗凝血1 mL與高嶺土混勻，室溫孵育4 min后，取340 μL血樣與20 μL CaCl2在檢測杯中混勻，上機檢測，記錄TEG圖像和參考值。主要分析凝血反應(yīng)時間(R)、K值、α角、最大振幅(MA)和綜合凝血指數(shù)(CI)等5個參數(shù)。

2 結(jié) 果

2.1血常規(guī) 4次血小板采集后Hct、MPV及PDW指標比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其中第3次Hct、MPV及PDW和第4次MPV顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而4次檢測Hb、RBC、MCV、RDW和Plt指標間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表1。

2.2生化指標 4次血小板采集后TPO指標比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其中第3次和第4次顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而4次檢測葉酸和Alb指標間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表2。

表1 4次血小板捐獻后血常規(guī)指標比較±s)

注：與第1次比較,*P<0.05

表2 4次血小板捐獻后生化指標比較±s)

注：與第1次比較，*P<0.05

表3 4次血小板捐獻后TEG指標比較±s)

注：與第1次比較，*P<0.05

2.3TEG指標 4次血小板采集后K值、α角及MA指標比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，其中第3次K值、α角及MA均顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；而4次檢測R和CI指標間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。見表3。

3 討 論

《獻血者健康檢查要求》定義：歷史獻血3次以上，且1年內(nèi)有獻血經(jīng)歷者為固定獻血者[2]。國內(nèi)外統(tǒng)計資料顯示[5-6]，固定獻血者是各血站血液資源的主要來源，占比可達90%以上。ACD在體內(nèi)代謝時間小于15 min，已經(jīng)廣泛應(yīng)用于尿毒癥終末期患者血液透析，被證明是安全可靠的[7]。由于血液透析需處理全身血液，而每次單采血小板血液處理量僅400～1 000 mL[8]，且尿毒癥患者透析頻率遠高于2周/次，故單采血小板ACD回輸量遠小于血液透析。所以，筆者認為長期血小板捐獻者主要危害不在于ACD回輸，而在于血小板及血漿蛋白的丟失，在于血小板、造血生長因子及血漿蛋白能否持續(xù)再升并維持穩(wěn)定。

戴宇東等[9]報道長期固定血小板捐獻會造成骨髓巨核細胞顯著增加、血小板生成能力增強。自規(guī)定獻血頻率提高以來，雖未出現(xiàn)如高凝狀態(tài)腦血管栓塞等單采血小板相關(guān)的嚴重不良事件，但國內(nèi)在長期固定獻血者凝血及健康狀況變化研究仍不夠全面[10]。相關(guān)研究多從歷史血小板捐獻次數(shù)進行分析，未考慮近期捐獻頻率[11-12]。本文所有研究對象均以2周/次的最高頻率捐獻血小板，血常規(guī)結(jié)果顯示，第3次Hct、MPV及PDW和第4次MPV顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，提示高頻捐獻血小板對血小板形態(tài)影響較大，在堅持半年左右的捐獻者中尤為顯著。第4次除MPV值外，其余指標與第1次間比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，提示血細胞數(shù)量、形態(tài)在堅持高頻血小板捐獻1年后基本耐受而恢復正常。這與AKAY等[13]的結(jié)論類似。

研究指出，長期單采血小板捐獻者血清鐵隨著血小板捐獻次數(shù)的增多而減少[14]。葉酸是合成血細胞的原料，Alb是血漿營養(yǎng)蛋白，TPO可促進血小板生成，3種物質(zhì)均為消耗性原料，即隨著合成物質(zhì)增多而減少，故本研究將樣本采集時間定為血小板捐獻后24 h。結(jié)果顯示，4次檢測葉酸和Alb指標間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，而第3次和第4次TPO指標顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但均在正常范圍內(nèi)，與CABLE等[15]研究結(jié)果類似。提示，持續(xù)高頻血小板捐獻半年以上者，TPO可顯著降低。第4次TPO高于第3次，但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)?？赡苡捎谑?年以上捐獻者機體耐受，TPO逐漸恢復至初次捐獻水平；或長期捐獻者TPO將穩(wěn)定維持在更低水平，但這有待進一步研究驗證[16]。

K值延長提示纖維蛋白原缺乏，α角減小提示纖維蛋白原缺乏，MA值降低提示PLT聚集功能不足或數(shù)量降低[17]。TEG結(jié)果顯示，單采血小板12次后K值、α角及MA均顯著低于第1次，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，但仍在正常參考范圍內(nèi)。提示高頻血小板捐獻半年以上者凝血功能有所減弱，但尚無出血或血栓風險，是安全可控的。這與馮晴等[11]的研究結(jié)論一致。

綜上所述，1年內(nèi)未觀察到每兩周單采血小板2 U的捐獻者出血或血栓風險，健康狀況良好，但捐獻者TPO水平仍需進一步研究。