趙國(guó)清, 王貴升, 胡永浩*
(1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué),甘肅蘭州 730070;2.山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心,山東濟(jì)南250022)
隨著養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展,水貂的養(yǎng)殖數(shù)量逐漸增多,在水貂的養(yǎng)殖過(guò)程中,抗菌藥物不合理的使用,帶來(lái)許多的弊端,如畜禽免疫力下降、腸道菌群失衡等(陳頎,2017)。因此,研發(fā)替代抗生素的物質(zhì)成為新的研究方向。益生菌富含多種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),可以提高飼料在動(dòng)物體內(nèi)的消化與吸收,提高動(dòng)物免疫力和生長(zhǎng)性能(裴躍明,2016),被廣泛應(yīng)用于動(dòng)物養(yǎng)殖中。關(guān)于益生菌在水貂養(yǎng)殖過(guò)程中的應(yīng)用報(bào)道比較少。因此,本試驗(yàn)在60日齡的雄性水貂基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的益生菌制劑,旨在探討其對(duì)水貂生長(zhǎng)性能和免疫指標(biāo)的影響,為益生菌制劑在水貂養(yǎng)殖過(guò)程中進(jìn)一步的應(yīng)用提供參考依據(jù)。
1.1 試驗(yàn)材料 益生菌制劑是由乳酸桿菌、枯草芽孢桿菌、酵母菌等組成,活菌量均≥100萬(wàn)cfu/g,由山東寶來(lái)利來(lái)生物工程股份有限公司生產(chǎn);細(xì)胞因子IL-2、IL-6 ELISA Kit試劑盒購(gòu)自上海允麥生物科技有限公司;免疫球蛋白IgG、IgM、IgA ELISA Kit試劑盒購(gòu)于 Elabscience公司;小型高速離心機(jī)由德國(guó)Eppendorf公司生產(chǎn);多功能全波長(zhǎng)酶標(biāo)儀由北京凱奧科技發(fā)展有限公司生產(chǎn);常規(guī)的試劑及儀器由本實(shí)驗(yàn)室提供。
1.2 試驗(yàn)動(dòng)物及設(shè)計(jì) 采用單因素完全隨機(jī)設(shè)計(jì)試驗(yàn),選擇 60日齡體重為(960.55±80.45)g 雄性水貂60只,隨機(jī)分為4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)5只,1組為空白對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧,2、3、4組分別在基礎(chǔ)日糧中添加0.5%、1.0%、1.5%益生菌制劑,試驗(yàn)期60 d,每只水貂單籠飼養(yǎng),單獨(dú)給料,自由飲水,每日8:30和16:30定期打掃,按照常規(guī)免疫程序進(jìn)行免疫和驅(qū)蟲(chóng)。
1.3 基礎(chǔ)日糧 參考乜豪(2018)方法配制育成期水貂的基礎(chǔ)日糧,其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1,飼糧為干粉型。
1.4 指標(biāo)測(cè)定及方法
1.4.1 生長(zhǎng)性能的測(cè)定 在試驗(yàn)開(kāi)始和結(jié)束時(shí),對(duì)每只水貂進(jìn)行稱(chēng)重,記錄初始體重和試驗(yàn)?zāi)┲?,并記錄試?yàn)期間耗料量。測(cè)定計(jì)算各組的平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。
表1 日糧組成成分與營(yíng)養(yǎng)水平
1.4.2 免疫指標(biāo)的測(cè)定 在試驗(yàn)結(jié)束后,每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)挑選10只水貂,指尖消毒并采血3 mL,置于促凝固管中,靜置、離心,將血清分裝-80℃保存,按照說(shuō)明書(shū)檢測(cè)免疫球蛋白IgG、IgM、IgA和細(xì)胞因子IL-2、IL-6含量。
1.5 試驗(yàn)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析,試驗(yàn)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,用單因素方差分析差異顯著性,P<0.05表示差異顯著。
2.1 益生菌制劑對(duì)水貂生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知,試驗(yàn)2、3、4組的ADFI均高于1組,但是差異不顯著(P>0.05);試驗(yàn)3、4組的ADG顯著高于1組 (P<0.05),分別提高38.8%、31.8%(P<0.05),2組高于 1組,但差異不顯著(P > 0.05),試驗(yàn) 2、3、4 組之間差異不顯著(P > 0.05);試驗(yàn) 3、4組的F/G顯著低于1組 (P<0.05),分別降低18.6%、16.2%(P < 0.05),2組低于 1組,但差異不顯著 (P>0.05);試驗(yàn)2、3、4組之間差異不顯著(P > 0.05)。
2.2 益生菌制劑對(duì)水貂免疫指標(biāo)的影響 由表3可知,試驗(yàn) 2、3、4 組血清 IgM、IgA、IL-6 含量均高于 1組,但是差異不顯著(P > 0.05);試驗(yàn) 3、4組血清中IgG含量顯著高于1組(P<0.05),分別提高 23.5%、14.8%(P<0.05),2組高于 1組, 但差異性不顯著(P > 0.05),試驗(yàn) 2、3、4 組之間差異不顯著(P>0.05);試驗(yàn) 3、4組血清中IL-2含量顯著高于 1組(P < 0.05),分別提高 10.2%、8.2%(P <0.05),2組高于 1組,但差異性不顯著(P> 0.05),試驗(yàn) 2、3、4組之間差異不顯著(P > 0.05)。
表2 益生菌制劑對(duì)水貂生長(zhǎng)性能的影響
表3 益生菌制劑對(duì)水貂免疫指標(biāo)的影響n(yōu)g/mL
益生菌制劑被廣泛應(yīng)用于畜禽養(yǎng)殖中,具有提高動(dòng)物生長(zhǎng)性能的作用。崔一喆等(2017)報(bào)道,益生菌可以提高梅花鹿生長(zhǎng)性能。田浪等(2017)等報(bào)道,益生菌可以提高肉雞生長(zhǎng)性能。本試驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn) 2、3、4組的 ADFI均高于 1組(P>0.05),試驗(yàn) 3、4組的 ADG分別較 1組提高38.8%、31.8%(P < 0.05),F(xiàn)/G 分別較 1組降低18.6%、16.2%(P<0.05)。因而證實(shí)益生菌制劑可以提高水貂的生長(zhǎng)性能。益生菌在動(dòng)物腸道中可以抑制致病菌群的生長(zhǎng)繁殖,促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在腸道內(nèi)的消化吸收,提高營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的轉(zhuǎn)化率,從而提高水貂的生長(zhǎng)性能。
免疫球蛋白介導(dǎo)體液免疫,是評(píng)價(jià)免疫機(jī)能的重要指標(biāo)之一,免疫球蛋白IgG在抗感染免疫中起著重要作用,IgA主要參與黏膜免疫,IgM是機(jī)體免疫中最早出現(xiàn)的抗體,具有很強(qiáng)的殺菌功能(張召興,2017)。IL-2又稱(chēng)T細(xì)胞生長(zhǎng)因子,可以刺激T淋巴細(xì)胞增殖,還可以調(diào)節(jié)B淋巴細(xì)胞和抗體產(chǎn)生,在免疫過(guò)程中具有重要作用 (宋麗霞,2011)。細(xì)胞因子IL-6主要參與機(jī)體的體液免疫和細(xì)胞免疫,是免疫系統(tǒng)中重要的細(xì)胞因子(宋巴達(dá)瑪,2010)。因此,血清中 IL-2、IL-6含量的高低可直接反映機(jī)體的免疫功能。本試驗(yàn)結(jié)果表明,試驗(yàn) 2、3、4 組血清中的 IgM、IgA、IL-6 含量均高于 1組(P > 0.05),試驗(yàn) 3、4組血清中 IgG、IL-2含量較1組相比分別提高23.5%、14.8%、10.2%、8.2%(P<0.05)。因而證實(shí)益生菌制劑可以提高水貂的免疫水平。可能由于益生菌所含的物質(zhì)可以刺激機(jī)體的免疫系統(tǒng),促進(jìn)抗體分泌合成,從而增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。與裴躍明等(2016)、乜豪等(2018)報(bào)道的一致。但益生菌制劑提高免疫機(jī)能的機(jī)理尚未明確,有待進(jìn)一步研究。
本試驗(yàn)條件下,在基礎(chǔ)飼料中添加1.0%益生菌制劑可以顯著提高水貂的生長(zhǎng)性能和免疫指標(biāo)。