隱球菌性腦膜炎的臨床表現(xiàn)及墨汁染色聯(lián)合隱球菌抗原檢測的診斷意義

曹蘊，李偉，劉傳苗

（蚌埠醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院感染科，安徽 蚌埠233004）

隱球菌性腦膜炎是由新型隱球菌及格特隱球菌引起的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病，該病大多起病慢，臨床表現(xiàn)不典型且復(fù)雜多樣，與一般的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染相比缺乏特異性，另外，該病的臨床表現(xiàn)類似結(jié)核性腦膜炎[1-2]。因此，該病的早期診斷較困難。傳統(tǒng)墨汁染色法檢測簡便易行但陽性率較低，隱球菌抗原檢測技術(shù)是隱球菌腦膜炎輔助診斷的一種新實驗室分析方法[3]。本研究旨在探討墨汁染色聯(lián)合隱球菌抗原檢測對隱球菌性腦膜炎的診斷價值，以期為該病的臨床診治提供一定依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料選取2018年1月至2019年6月本院收治的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者40例。其中10例隱球菌性腦膜炎患者作為觀察組，其他30例中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者作為對照組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染參考人民衛(wèi)生出版社第八版《神經(jīng)病學(xué)》教科書中相應(yīng)疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)確診[4]，隱球菌性腦膜炎均經(jīng)病原學(xué)確診；②患者家屬簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料欠缺較多者；②合并惡性腫瘤者；③妊娠期及哺乳期者。觀察組男6例，女4例；年齡22～68歲，平均年齡（57.34±5.64）歲。對照組中男17例，女13例；年齡22～69歲，平均年齡（58.27±5.59）歲；疾病類型：細(xì)菌性腦膜炎7例，病毒性腦膜炎10例，結(jié)核性腦膜炎13例。兩組性別、年齡等臨床資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2 方法患者均于入院后24～48 h內(nèi)行腰椎穿刺術(shù)，收集腦脊液2～3 mL，2 500 rpm離心15 min，棄去上清液，取沉渣保存待檢。墨汁染色鏡檢：取腦脊液樣本與印度墨汁（DM1192，北京華越洋生物）混勻后，取適量置于載玻片上并加蓋蓋玻片，采用CX22型顯微鏡（奧林巴斯）進(jìn)行鏡檢，若出現(xiàn)寬厚透亮莢膜且細(xì)胞壁明顯，或有出芽現(xiàn)象即為隱球菌陽性感染結(jié)果。膠體金莢膜多糖抗原檢測：在預(yù)先準(zhǔn)備好的LF Specimen Diluent試劑杯中加入腦脊液樣本40μL，將膠體金莢膜多糖抗原免疫層析法試紙條（美國Inc公司）白端浸入混懸液，靜置10 min后讀取結(jié)果。結(jié)果判斷：質(zhì)控線及檢測線均顯示為陽性結(jié)果；顯示1條為陰性結(jié)果；無顯示為無效結(jié)果，需進(jìn)行重新檢測。對檢測為陽性結(jié)果的樣本需稀釋20倍后重新檢測后與原結(jié)果對比，以避免出現(xiàn)假陽性情況。

1.3 觀察指標(biāo)比較兩種方法的陽性檢測結(jié)果及敏感度。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法采用SPSS 22.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計數(shù)資料用[n（%）]表示，比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者臨床癥狀表現(xiàn)比較兩組患者頭痛、嘔吐、發(fā)熱、視力下降、盜汗、聽力下降及意識水平下降等臨床癥狀表現(xiàn)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，見表1。

表1 兩組患者臨床癥狀表現(xiàn)比較[n（%）]Table 1 Comparison of clinical symptoms between the two groups[n(%)]

2.2 兩組患者檢測結(jié)果比較觀察組墨汁染色及聯(lián)合檢測的陽性率（50.00%、90.00%）均高于對照組（0.00%、6.67%），觀察組中聯(lián)合檢測陽性率為90.00%，高于墨汁染色的50.00%，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 兩組患者檢測結(jié)果比較[n（%）]Table 2 Comparison of test results between the two groups[n(%)]

2.3 兩種檢測方法的特異度和敏感度比較聯(lián)合檢測的敏感度高于墨汁染色，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；兩種檢測方法特異度、陽性預(yù)測值及陰性預(yù)測值比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義，見表3。

表3 兩種檢測方法特異度和敏感度比較（%）Table 3 Comparison of specificity and sensitivity between two detection methods(%)

3 討論

隱球菌性腦膜炎是由于新型隱球菌及格特隱球菌菌體經(jīng)呼吸道吸入后，透過肺泡間隙進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)，通過逃逸機(jī)體巨噬細(xì)胞吞噬作用及免疫識別殺傷后，穿過血腦屏障進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)，從而引發(fā)隱球菌性腦膜炎[5-6]。據(jù)統(tǒng)計，該病由新型隱球菌引起的隱球菌性腦膜炎占80%，格特隱球菌占20%。近年來，隨著抗生素等藥物濫用，艾滋病、惡性腫瘤及器官移植等增加，隱球菌性腦膜炎的發(fā)病率越來越高[7]；同時，由于該病患者無特異性癥狀表現(xiàn)，多表現(xiàn)為頭痛，惡心，嘔吐，發(fā)熱及腦膜刺激征等常規(guī)癥狀，與一般的中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染癥狀類似[8]。本研究結(jié)果表明，兩組患者頭痛、嘔吐、發(fā)熱、盜汗、視力、聽力及意識水平下降等臨床癥狀表現(xiàn)比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，與程耀等[9]報道結(jié)果相近。

墨汁染色鏡檢是隱球菌性腦膜炎的傳統(tǒng)經(jīng)典檢測方法，該法雖然簡單易行，但陽性率（54%～74%）及敏感度（＜50%）均較低，臨床需反復(fù)多次檢查才能找到隱球菌[6-7]。因此，為提高隱球菌腦膜炎早期診斷率，臨床需尋找一種快速、靈敏、特異性的早期檢測方法。隱球菌抗原檢測是通過免疫層析法，可對患者腦脊液中的新型隱球菌、格特隱球菌等多個隱球菌種屬的的莢膜多糖抗原進(jìn)行定性和半定量檢測，原理為通過層析作用將檢測樣本層析至金標(biāo)抗隱球菌抗原捕獲單抗和位于檢測膜上的金標(biāo)對照抗體，若樣本中存在隱球菌抗原，其將與金標(biāo)抗隱球菌抗體結(jié)合而呈現(xiàn)出陽性結(jié)果，臨床報道顯示，該法對隱球菌的檢測率、敏感度均較高[8-12]。本研究結(jié)果顯示，聯(lián)合檢測結(jié)果的陽性率及敏感度均高于傳統(tǒng)墨汁染色（P＜0.05），與尚鵬程等[13]相關(guān)報道結(jié)果一致。提示，聯(lián)合檢測對隱球菌性腦膜炎診斷價值高。

綜上所述，隱球菌性腦膜炎無特異性臨床癥狀表現(xiàn)，墨汁染色聯(lián)合隱球菌抗原檢測對隱球菌性腦膜炎的陽性檢測率及敏感度高，對于隱球菌性腦膜炎的臨床輔助具有較高診斷價值。