血清CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF聯(lián)合檢測對胰腺癌的診斷價(jià)值研究

邢瑞青，彭道榮

(空軍軍醫(yī)大學(xué)附屬西京醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)研究所，陜西西安 710032)

胰腺癌為胰腺最常見的惡性腫瘤之一，占消化道惡性腫瘤的8%～10%[1]。由于其惡性程度高，容易發(fā)生肝轉(zhuǎn)移，經(jīng)手術(shù)治愈的病例極少，預(yù)后差，5年生存率不足10%[2-3]。作為病死率最高的惡性腫瘤之一，目前仍沒有一種血清標(biāo)志物對胰腺癌的診斷具有滿意的靈敏度和特異度。血清糖蛋白抗原199(CA19-9)是胰腺癌的傳統(tǒng)血清腫瘤標(biāo)志物之一，且在胰腺癌的診斷方面仍然存在一定的局限性[4-5]。近年來，在胰腺癌的臨床診斷方面又出現(xiàn)了一些新的相關(guān)標(biāo)志物，如異常凝血酶原(PIVKA-Ⅱ)、表皮生長因子(VEGF)等。本研究旨在探討CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF聯(lián)合檢測對胰腺癌的診斷價(jià)值，為提高胰腺癌的早期診斷率提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2017年1月至2018年1月來本院就診并經(jīng)病理證實(shí)且未經(jīng)手術(shù)等相關(guān)治療的胰腺癌患者73例(胰腺癌組)，其中男53例，女20例，平均(54.92±11.50)歲。胰腺良性病變(胰腺炎、胰腺囊腫)患者71例(胰腺良性病變組)，其中男46例，女25例，平均(56.24±13.45)歲。健康對照組均來自本院體檢健康人群，隨機(jī)抽取56例，其中男31例，女25例，平均(51.05±9.28)歲?；疾〗M與健康對照組年齡、性別經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，資料具有可比性。所有研究對象入選前均簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：肝癌轉(zhuǎn)移性胰腺癌患者，伴有肝硬化的胰腺癌患者，存在凝血功能障礙的胰腺癌患者均不納入胰腺癌組；伴有肝硬化，凝血功能障礙的胰腺炎、胰腺囊腫患者亦不被納入胰腺良性病變組。所有研究對象近3個月均未使用維生素K和華法林等藥物治療。

1.2儀器與試劑 CA19-9采用瑞士羅氏E601型電化學(xué)發(fā)光分析儀進(jìn)行檢測，羅氏原裝試劑，應(yīng)用伯樂腫瘤標(biāo)志物復(fù)合質(zhì)控，校準(zhǔn)品為羅氏原裝。PIVKA-Ⅱ采用日本Lumipulse G1200全自動化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫分析儀檢測，試劑由珠海麗珠股份有限公司提供。 VEGF采用廈門天中達(dá)TZD-CL-200S化學(xué)發(fā)光免疫分析儀檢測，試劑由威海威高生物科技有限公司提供。PIVKA-Ⅱ和VEGF質(zhì)控品、校準(zhǔn)品均為原裝配套試劑。

1.3方法 標(biāo)本收集方法：受檢者均于入院后第2天清晨空腹靜脈采血3～4 mL，3 000 r/min離心10 min，分離血清于-70 ℃凍存待測。對照組采集清晨空腹靜脈血3～4 mL，同樣按上述方法處理。所有標(biāo)本均無乳糜及溶血。指標(biāo)陽性判斷標(biāo)準(zhǔn)：CA19-9>27 U/mL，PIVKA-Ⅱ>40 mAU/mL，VEGF>160 pg/mL為陽性，小于上述值為陰性；聯(lián)合檢測中有一項(xiàng)陽性即為陽性標(biāo)準(zhǔn)。檢測方法：CA19-9采用電化學(xué)發(fā)光法檢測；PIVKA-Ⅱ采用化學(xué)發(fā)光酶聯(lián)免疫法檢測；VEGF采用化學(xué)發(fā)光法檢測。所有檢驗(yàn)操作嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室室內(nèi)質(zhì)量控制文件進(jìn)行。在試驗(yàn)標(biāo)本檢測前、檢測中、檢測后分別進(jìn)行質(zhì)控檢測。室內(nèi)質(zhì)控和室間質(zhì)評均合格。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。因樣本濃度均呈偏態(tài)分布，故以中位數(shù)(四分位數(shù))[M(P25,P75)]表示，組間比較采用非參數(shù)Kruskal-Wallis檢驗(yàn)，兩兩比較采用MannWhitneyU檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以率表示，比較采用χ2檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。繪制受試者工作特征曲線(ROC曲線)，計(jì)算曲線下面積。

2 結(jié) 果

2.13組血清CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF水平比較 胰腺癌組血清PIVKA-Ⅱ水平顯著高于健康對照組、胰腺良性病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-6.18、-1.94，P<0.05)，而胰腺良性病變組與健康對照組之間，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.30，P>0.05)。血清CA19-9水平在胰腺癌組高于健康對照組、胰腺良性病變組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-7.69、-2.10，P<0.05)，而胰腺良性病變組與健康對照組之間，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z=-1.01，P>0.05)。見表1。

表1 3組血清CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF水平比較[M(P25,P75)]

注：與健康對照組相比，*P<0.05;與胰腺良性病變組相比，#P<0.05

圖1 ROC曲線評價(jià)各指標(biāo)單獨(dú)對胰腺癌的診斷價(jià)值圖

2.2CA19-9、PIVKⅡ、VEGF用于評價(jià)胰腺癌診斷價(jià)值的ROC曲線分析 結(jié)果顯示，用于評價(jià)胰腺癌的ROC曲線下面積CA19-9最大,其次為PIVKA-Ⅱ、VEGF；與參考線下面積相比，除VEGF外，CA19-9、PIVKA-Ⅱ曲線下面積差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見圖1、表2。

表2 ROC曲線評價(jià)各指標(biāo)單獨(dú)對胰腺癌的診斷價(jià)值參數(shù)

2.3不同標(biāo)志物單項(xiàng)與聯(lián)合檢測對胰腺癌診斷的診斷價(jià)值 CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF、CA19-9+PIVKA-Ⅱ+VEGF在對胰腺癌診斷的靈敏度、陰性預(yù)測值、準(zhǔn)確度方面的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2分別=43.01、18.24、20.23，均P<0.05)，3項(xiàng)聯(lián)合檢測可使診斷的靈敏度和陰性預(yù)測值分別提高到87.80%和75.50%，特異度和準(zhǔn)確度均維持在70.00%左右。見表3。

表3 不同標(biāo)志物單項(xiàng)與聯(lián)合檢測對胰腺癌診斷的診斷價(jià)值(%)

3 討 論

CA19-9是胰腺癌診斷常用的腫瘤標(biāo)志物之一，與既往報(bào)道一致，本研究結(jié)果顯示，胰腺癌組血清CA19-9水平顯著高于胰腺良性病變組與健康對照組。近年來，在胰腺癌的臨床診斷方面又出現(xiàn)了一些新的相關(guān)標(biāo)志物，有研究報(bào)道，PIVKA-Ⅱ除對原發(fā)性肝細(xì)胞癌具有特異的診斷價(jià)值外，對胰腺癌等其他消化道腫瘤亦具有一定的臨床診斷價(jià)值[6-8]。PIVKA-Ⅱ是指維生素K缺乏或拮抗劑Ⅱ誘導(dǎo)的蛋白質(zhì),又稱為脫-γ-羧基凝血酶原,它是肝臟合成的無凝血活性的異常凝血酶原。1984年LIEBMAN等[6]首次提出PIVKA-Ⅱ可能是原發(fā)性肝細(xì)胞癌的腫瘤標(biāo)志物。MATSUEDA等[9]報(bào)道則發(fā)現(xiàn)，PIVKA-Ⅱ在胰腺的肝樣癌中也有高表達(dá)。與報(bào)道一致，本研究結(jié)果亦發(fā)現(xiàn)，胰腺癌組血清PIVKA-Ⅱ水平顯著高于胰腺良性病變組和健康對照組。

VEGF又稱血管通透因子,是一種特異度高的促血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子，具有促進(jìn)血管通透性增加、細(xì)胞外基質(zhì)變性、血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增殖和血管形成等作用。有研究報(bào)道，胰腺癌組織中VEGF的表達(dá)與腫瘤分期和淋巴轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[10-11]。本研究中胰腺癌組血清VEGF水平與胰腺良性病變組及健康對照組并無顯著差異，可能與本研究標(biāo)本多數(shù)來自早期胰腺癌患者相關(guān)。

有研究報(bào)道，不同血清腫瘤標(biāo)志物對胰腺癌的診斷價(jià)值存在差異，目前仍沒有一種血清標(biāo)志物對胰腺癌的診斷具有滿意的靈敏度和特異度[12-13]。本研究結(jié)果顯示，CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF單項(xiàng)檢測診斷胰腺癌時(shí)，PIVKA-Ⅱ、VEGF的診斷特異度雖高，但靈敏度、陰性預(yù)測值及準(zhǔn)確度均在60.00%以下；與PIVKA-Ⅱ和VEGF相比，CA19-9的ROC曲線下面積最大，診斷效能最佳，但其診斷靈敏度、特異度、陽性預(yù)測值、陰性預(yù)測值及準(zhǔn)確度也僅維持在70.00%左右；而CA19-9+PIVKA-Ⅱ+VEGF 3項(xiàng)聯(lián)合檢測時(shí)，可顯著提高胰腺癌的診斷靈敏度，使診斷的靈敏度和陰性預(yù)測值分別提高到87.80%和75.50%，準(zhǔn)確度仍維持在70.00%左右。

4 結(jié) 論

CA19-9、PIVKA-Ⅱ及VEGF對胰腺癌的診斷均具有重要臨床價(jià)值；CA19-9、PIVKA-Ⅱ、VEGF 3項(xiàng)聯(lián)合檢測可顯著提高胰腺癌診斷的靈敏度。