何首烏栽培、化學(xué)成分及炮制加工研究進(jìn)展

柳 敏，曾 援2，黃曉旭，周茂嫦

(1.畢節(jié)市中藥研究所，貴州 畢節(jié) 551700；2. 畢節(jié)市公安司法鑒定中心，貴州 畢節(jié) 551700)

何首烏(Polygonum multiflori)是一種蓼科蓼族多年生纏繞草本植物，藤莖葉和塊根均可入藥，嫩莖作保健型蔬菜，可炒食或涼拌。藤莖入藥為夜交藤，對(duì)神經(jīng)衰弱和失眠等很有成效[1]?！吨袊?guó)藥典》收載了何首烏及炮制品制何首烏，二者性味歸經(jīng)與功能主治有所不同，何首烏具有解毒、截瘧、潤(rùn)腸通便等功效；而炮制品制何首烏有補(bǔ)肝腎、強(qiáng)筋骨、化濁降脂等功效[2]。目前，集中研究的何首烏中有效化學(xué)成分主要有二苯乙烯苷類、蒽醌類、磷酯與苯丙素類及黃酮類等物質(zhì)。何首烏藥用價(jià)值的不斷開發(fā)與利用，使其需求量不斷增大，野生何首烏因產(chǎn)量極低而無(wú)法滿足市場(chǎng)需求，人工栽培的何首烏已成為現(xiàn)今的主要供給方式。本文從何首烏的栽培技術(shù)、化學(xué)成分及炮制方法等3個(gè)方面進(jìn)行綜述，為深入研究何首烏提供依據(jù)和參考。

1 栽培技術(shù)

1.1 繁殖技術(shù)

1.1.1種子繁殖

何首烏種子繁殖系數(shù)大，方法簡(jiǎn)單，生長(zhǎng)健壯，對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)，但整個(gè)生長(zhǎng)周期長(zhǎng)，且變異性大，不能保持原有的優(yōu)良性狀。3～4月份將何首烏種子條行撒播于施糞水后的田地中，撒后覆土約3 cm厚，澆水保持濕潤(rùn)并及時(shí)除草，出苗長(zhǎng)至5 cm高時(shí)，趁陰雨天間苗，澆施稀釋的糞水以促進(jìn)生長(zhǎng)，苗高約15 cm時(shí)按株距30 cm、行距45 cm進(jìn)行穴栽，澆水確保成活率。

1.1.2扦插育苗

何首烏扦插育苗對(duì)整株何首烏損傷大，比較浪費(fèi)材料，扦插苗根系較淺、較弱，但是繁殖容易且材料充足，成苗快，能保持原品種的優(yōu)良特性。選早春老莖或夏季嫩枝[3]，早春老莖扦插應(yīng)挑選2～3年生2 mm以上的老莖在抽芽前進(jìn)行，插條應(yīng)有3個(gè)以上的芽眼，泥漿處理晾干后再種，苗床施有機(jī)肥后整平整細(xì)，按行距株距均30 cm、穴深約15 cm，每穴2～3條插入土壤，留有芽眼露出地面，插后蓋地膜來保濕增溫，提高成活率；夏季嫩枝扦插應(yīng)選生長(zhǎng)旺盛、健壯無(wú)病的莖藤，扦插方法與早春老莖扦插相同，插后不蓋地膜，可搭棚遮陰保濕。王浩等[4]選用硬枝插條并用黃泥漿處理，豎向扦插育苗，提高種苗的成活率，保證成苗質(zhì)量穩(wěn)定。王華磊等[5]用正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)得出何首烏最佳扦插生長(zhǎng)條件為選用三節(jié)黃色枝條或三節(jié)褐色老枝，在40 mg/L的萘乙酸溶液中浸泡2 h后，間隔1 cm扦插。前人扦插試驗(yàn)總結(jié)出選用木質(zhì)化有3個(gè)芽眼以上的何首烏莖，再用生根粉浸泡可提高扦插苗的成活率。

1.1.3組織培養(yǎng)育苗

組織培養(yǎng)繁殖系數(shù)大，繁殖速度快，適合大規(guī)模培育，能保持母本的優(yōu)良特性，但組織培養(yǎng)成本高、操作管理復(fù)雜、對(duì)技術(shù)及環(huán)境要求較高。王凌暉[6]、趙云峰[7]等都考察了6-芐氨基嘌呤(6-BA)、吲哚乙酸(IBA)、2,4-D和萘乙酸(NAA)誘導(dǎo)何首烏莖段產(chǎn)生愈傷組織的最適宜增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基。曾文丹等[8]選用幼嫩單芽莖段作外植體，用0.1%HgCl2消毒滅菌，浸沒間歇式培養(yǎng)增殖系統(tǒng)作為培養(yǎng)方式，篩選出了適宜何首烏的不定芽誘導(dǎo)初代培養(yǎng)基、繼代增殖培養(yǎng)基和生根培養(yǎng)基，從而建立了何首烏的離體快繁技術(shù)體系，為大批量生產(chǎn)何首烏種苗提供新依據(jù)。

1.1.4塊根繁殖

何首烏塊根繁殖用量多，成本高，但能保持原品種的優(yōu)良特性。4月左右挑選帶芽眼的小塊根，按株行距15 cm×15 cm栽于稀松肥沃地塊中，每穴栽1個(gè)小塊根，深約8 cm，覆蓋5 cm厚的土，適度澆水保濕，雨季及時(shí)排水以防塊根腐爛[9]。

1.1.5水培繁殖

水培繁殖屬于無(wú)性繁殖，具有操作簡(jiǎn)便、成本低，室內(nèi)操作不受外部環(huán)境影響的特點(diǎn)。用何首烏嫩枝作原材料，清洗后減去多余葉片，浸泡在生根粉中，再放入清水中培養(yǎng)生根。高潔等[10]以何首烏嫩枝為材料，進(jìn)行2號(hào)生根粉(ABT 2)不同濃度的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，研究水培繁殖及生根過程中內(nèi)源激素含量及氧化酶活性的動(dòng)態(tài)變化。

1.2 栽培技術(shù)對(duì)藥材品質(zhì)、產(chǎn)量的影響

何首烏人工種植沒有統(tǒng)一的規(guī)范標(biāo)準(zhǔn)，導(dǎo)致市場(chǎng)上何首烏品質(zhì)參差不齊，為提高人工種植何首烏的品質(zhì)和產(chǎn)量，近年來對(duì)何首烏種植技術(shù)從土壤、施肥、栽培密度等方面開展了許多研究。如劉晗等[11]探尋了都勻市4個(gè)不同種植基地的土壤養(yǎng)分對(duì)何首烏品質(zhì)和產(chǎn)量的影響，認(rèn)為有效磷不利于何首烏塊根的生長(zhǎng)，有機(jī)質(zhì)和全氮含量高的土壤種出的何首烏產(chǎn)量更高。周明等[12]采用三因素四水平九處理的“3414”田間肥效不完全試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)適合十堰山區(qū)何首烏高產(chǎn)量、品質(zhì)好的最佳施肥方案為氮肥10 kg/667 m2、磷肥7.5 kg/667 m2、鉀肥6 kg/667 m2。王華磊等[13]在貴州都勻進(jìn)行的不同栽培密度對(duì)何首烏塊根及品質(zhì)影響的研究中，發(fā)現(xiàn)不同種植密度下何首烏塊根個(gè)數(shù)、根長(zhǎng)和根粗無(wú)顯著差異，而塊根鮮重則差異顯著，適宜的種植密度能顯著提高何首烏產(chǎn)量，也提高了何首烏中二苯乙烯苷和結(jié)合蒽醌含量。蔡麗芬[14]、李帥鋒[15]等都用HPLC測(cè)定了不同采收期何首烏中二苯乙烯苷和蒽醌類成分的含量，何首烏生長(zhǎng)到第3年時(shí)二苯乙烯苷含量最高，11月中旬為何首烏的最佳采收期，在9、10月為較適宜的采收期。蔡中齊等[16]從不同采收期何首烏中磷脂類成分變化和總量變化的研究中得出11、12月為何首烏適宜的采收期。雖然對(duì)何首烏藥材品質(zhì)和產(chǎn)量的影響因素已有一些相關(guān)研究，但仍存在對(duì)產(chǎn)量或含量的檢測(cè)指標(biāo)不夠完善，肥料品種研究不全面，采收時(shí)間研究年限短或采收期研究月份少、缺乏對(duì)整個(gè)生長(zhǎng)過程成分積累規(guī)律的分析，導(dǎo)致某些研究結(jié)果不全面或相差甚遠(yuǎn)?？梢姡€需更精細(xì)全面的對(duì)何首烏的種植技術(shù)進(jìn)行研究。

1.3 栽培模式對(duì)經(jīng)濟(jì)效益的影響

為提高何首烏種植的經(jīng)濟(jì)效益，對(duì)何首烏的栽種模式進(jìn)行了大量的研究。邵建明等[17,18]對(duì)何首烏搭架栽培下的單一栽種、套種絲瓜、蘿卜、豇豆、菜心等6種不同栽種模式產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)效益進(jìn)行了試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果為套種模式的經(jīng)濟(jì)效益比單一栽種模式的效益更高，其中以何首烏-豇豆-菜心的三維立體套種模式所獲收益最高。趙宇[19]報(bào)道了何首烏套種甜玉米的高效栽培模式，該模式利用玉米生長(zhǎng)期短，何首烏生長(zhǎng)期長(zhǎng)的特點(diǎn)，將何首烏藤莖引上玉米莖稈，節(jié)約了何首烏的搭架成本，提高了栽培的經(jīng)濟(jì)效益。陳艷瓊[20]、吳慶華[21]等就何首烏搭架栽培、無(wú)藤和少藤栽種模式的產(chǎn)量和經(jīng)濟(jì)效益進(jìn)行了試驗(yàn)分析，發(fā)現(xiàn)何首烏無(wú)架栽培經(jīng)濟(jì)效益更高，何首烏少藤栽培時(shí)留藤50 cm長(zhǎng)的經(jīng)濟(jì)效益更高。栽培模式的研究?jī)H探討了經(jīng)濟(jì)效益，缺乏對(duì)活性成分含量的檢測(cè)分析。

2 化學(xué)成分

隨著對(duì)何首烏的開發(fā)與利用，國(guó)內(nèi)外對(duì)何首烏的化學(xué)成分研究逐漸增多。主要集中在對(duì)二苯乙烯苷類和蒽醌類的研究、少部分針對(duì)磷脂與苯丙素類、黃酮類等化學(xué)成分及其功能的研究。二苯乙烯苷類化合物是一類具有多種生理活性的天然成分，已發(fā)現(xiàn)的二苯乙烯苷(2,3,5,4’-四羥基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷)含量高，具有抗氧化、抗動(dòng)脈粥樣硬化等功能[22]，已成為藥典對(duì)何首烏進(jìn)行質(zhì)量控制的指標(biāo)性成分之一，其含量不得低于干藥材中的1.0%[2]。王浩等[23]報(bào)道目前從何首烏中分離出的二苯乙烯苷類達(dá)37種，其中二苯乙烯苷類單體報(bào)道了24種，二苯乙烯苷類二聚體13種。蒽醌類化合物是何首烏另一質(zhì)量控制指標(biāo)，結(jié)合蒽醌以大黃素和大黃素甲醚的總量計(jì)，不得低于干藥材的0.05%，制何首烏游離蒽醌以大黃素和大黃素甲醚的總量計(jì)，不得少于0.1%。目前已分離出的蒽醌類衍生物有大黃素、大黃素甲醚、大黃酚、大黃酸、二蒽酮及其苷類化合物共37種[23]。此外，何首烏中還含有卵磷脂、肌醇磷脂、乙醇胺磷脂、磷脂酸、心磷脂[24]、磷脂酰甘油、磷脂酰膽堿、磷脂酰肌醇等磷酯類化合物具有降血脂、保護(hù)心血管等作用。王浩等[23]報(bào)道何首烏中含兒茶素、3-O-沒食子酰表兒茶素、3-O-沒食子酰兒茶素等26種黃酮類化合物和對(duì)苯二酚、β-谷甾醇、何首烏丁素等23種其他化合物。除上述幾類主要化合物外，何首烏還含淀粉、粗脂肪、游離氨基酸及少量的錳、鐵、鋅等微量元素[25]。

3 炮制加工

不同的炮制加工對(duì)中藥材的藥效也會(huì)有不同的影響?！吨袊?guó)藥典》何首烏炮制法為黑豆汁燉法、蒸法、黑豆汁蒸法[2]。九蒸九曬炮制法是《本草綱目》中記載的炮制方法：用何首烏一斤，切片，黑豆三斗浸泡一夜，用砂鍋蒸之，豆熟后，去豆曬干何首烏，再以豆蒸，如此反復(fù)九蒸九曬。李衛(wèi)先等[25]采用同一種炮制方法不同蒸制次數(shù)炮制何首烏，比較了各炮制品中的蒽醌類成分、總糖、卵磷脂、二苯乙烯苷、水溶性浸出物的含量，得出七蒸七曬炮制品較好，表明蒸制次數(shù)和時(shí)間會(huì)對(duì)何首烏化學(xué)成分含量有影響。劉興朵等[26]分析高壓炮制法對(duì)何首烏中大黃素、大黃素甲醚及二苯乙烯苷含量的影響，結(jié)果表明隨著高壓炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，何首烏中結(jié)合蒽醌、二苯乙烯的含量逐漸下降；游離蒽醌含量逐漸上升，為了增加其藥效、減少其毒性，將炮制時(shí)間定為4 h較佳。在保證質(zhì)量和藥效的前提下，高壓蒸制法的時(shí)間明顯比傳統(tǒng)蒸制法短。杜晨暉等[27]建立了一種以降低蒽醌類成分而不破壞二苯乙烯苷的發(fā)酵炮制何首烏的新方法，篩選發(fā)現(xiàn)米根霉、菌株YMS-006具有專一降解蒽醌類成分而不破壞二苯乙烯苷的能力。郭海霞[28]開展了擠壓膨化炮制何首烏的新方法探索，通過對(duì)比膨化前后游離蒽醌、結(jié)合蒽醌、二苯乙烯苷、水溶性多糖等主要成分的含量分析結(jié)果表明，膨化后蒽醌類成分存在化學(xué)轉(zhuǎn)變，含量降低；二苯乙烯苷的含量基本無(wú)變化；水溶性多糖的含量增加。研究表明，不同的炮制方法對(duì)何首烏有效成分含量存在一定的影響。發(fā)酵和膨化炮制法針對(duì)二苯乙烯苷沒影響，但是對(duì)蒽醌類成分的含量影響較大，2015年版《中國(guó)藥典》對(duì)蒽醌類成分的含量有明確的規(guī)定。在選用制首烏時(shí)，為更好的發(fā)揮療效，可選擇不同的炮制品。

4 展 望

何首烏生長(zhǎng)范圍廣且品種多，來源主要依靠人工種植，導(dǎo)致了市面上何首烏品質(zhì)參差不齊。為了醫(yī)藥、保健、化工等方面能得到高品質(zhì)的何首烏，要繼續(xù)利用現(xiàn)代生物工程技術(shù)大量繁殖優(yōu)質(zhì)種苗，加快對(duì)種植何首烏品種的鑒定、分類及質(zhì)量分析，加強(qiáng)對(duì)何首烏抗病蟲基因的轉(zhuǎn)入、生物防治的研究。何首烏化學(xué)成分研究中，除蒽醌類和二苯乙烯苷類的分離及藥用活性相關(guān)研究較多外，其他化合物的相關(guān)研究較少。因此，建議更深入、更全面的研究何首烏的活性成分，進(jìn)一步開發(fā)利用好何首烏養(yǎng)生和藥用價(jià)值，帶動(dòng)何首烏資源的發(fā)展。何首烏生用和炮制后作用有所不同，且炮制后能減輕部分毒性，為改變操作繁瑣的傳統(tǒng)炮制方法及深入開發(fā)何首烏的藥用功能，對(duì)炮制方法及工藝需要進(jìn)行更深入的研究。