雷慧娟,劉芳,雷嘉豪
高安市中醫(yī)院檢驗科 (江西高安 330800)
全自動尿沉渣分析儀是一種利用顯微放大成像技術(shù)對患者尿液樣本中的細(xì)胞和物質(zhì)進(jìn)行自動識別的新型檢驗儀器設(shè)備,是形態(tài)學(xué)在臨床尿檢中的應(yīng)用成果[1-2]。顯微鏡檢查是傳統(tǒng)的人工尿液檢查方法,通過在顯微鏡下觀察尿樣沉渣可以辨別出尿液中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型等的數(shù)量,檢驗結(jié)果較為準(zhǔn)確[3]。本研究旨在比較全自動尿沉渣檢測儀與顯微鏡檢測結(jié)果的差別,現(xiàn)報道如下。
采集我院2017年1月只2018年7月收治的患者尿液樣本66份,尿液取樣為晨起第一次尿液,標(biāo)本均以一次性尿檢無菌杯盛送,采集后統(tǒng)一放置,于2 h內(nèi)送實驗室檢測。樣本中包括男性尿液29份,女性尿液37份,患者年齡24~69歲,平均(54.29±5.44)歲。
全自動尿沉渣分析儀檢測:采用深圳市美僑醫(yī)療科技有限公司生產(chǎn)的Mejer-700型尿沉渣分析儀,儀器采用全自動化檢測技術(shù),觸摸屏操作;使用與Mejer儀器配備配套的稀釋液、鞘液洗液、熒光染品和check質(zhì)控;將儀器與計算機(jī)系統(tǒng)和打印機(jī)相連,按照全自動分析儀的說明書操作,刻度管注入尿液樣本10 ml混勻,按照說明熒光染色,孵育后放置在進(jìn)樣針下方,選取自動模式吸取樣本進(jìn)行檢測,注意尿液給樣時針頭需沒過尿樣高度,避免在吸樣檢測時吸入空氣影響檢測結(jié)果和儀器的使用壽命;樣本與樣本檢測之間需進(jìn)行清水給樣以清洗儀器管道,避免尿液中的沉渣物質(zhì)堵塞儀器;儀器分析后的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型、上皮細(xì)胞、吞噬細(xì)胞等數(shù)據(jù)均為儀器讀數(shù),并由計算機(jī)打印留存。
顯微鏡檢測:取10 ml尿液置于離心管,3 000 r/min,離心10 min,去除上清保留沉淀物質(zhì),離心管內(nèi)留有約0.2 ml的尿液沉渣;輕輕搖動離心管使沉淀混勻,此沉淀即為患者尿液樣本中的有形成分;采用玻片法觀察尿液沉渣中的成分,以10×10倍放大觀察有形成分的類別;再以10×40倍放大觀察沉渣中的紅細(xì)胞、白細(xì)胞和管型數(shù)量;連續(xù)觀察10個不同視野,取10次檢測的中間值。
記錄兩種方法檢測尿液紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型3項指標(biāo)的結(jié)果,并進(jìn)行對比分析。
兩種方法檢測所得的尿沉渣指標(biāo)陽性結(jié)果整理如表1,全自動尿沉渣分析儀檢出紅細(xì)胞和管型指標(biāo)陽性數(shù)少于鏡檢,而白細(xì)胞指標(biāo)陽性數(shù)高于鏡檢??紤]到顯微鏡檢時的視野清晰度較差,紅細(xì)胞和管型細(xì)胞的假陽性率較高,而白細(xì)胞在Mejer-700檢測時容易被熒光檢測到,使得其Mejer-700陽性率高于顯微鏡檢。
表1 兩種檢測方法的尿沉渣各項指標(biāo)檢測結(jié)果(例)
兩種檢測方法所檢出的各項指標(biāo)陽性結(jié)果有微小差異,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表2。
表2 兩種方法對66份尿液樣本各項指標(biāo)的檢出陽性率對比[例(%)]
尿液成分的變化反映著人的代謝狀態(tài),尿液中紅細(xì)胞增多,排除女性的行經(jīng)期可考慮急性炎癥或劇烈運(yùn)動導(dǎo)致;尿液中白細(xì)胞數(shù)量增加,可考慮尿道炎、尿路感染等疾病[8]。患者腎臟出現(xiàn)病理損害時,腎小球通透性增強(qiáng),部分蛋白質(zhì)和細(xì)胞碎片未過濾完全進(jìn)入腎小管并形成柱形蛋白聚體,尿液中的管型大量增加形成管型尿。當(dāng)尿液中管型增多時,需考慮患者患有腎損傷性疾病,必須結(jié)合臨床癥狀判斷和其他檢查分析原因[7]。
全自動尿沉渣分析儀采用流式細(xì)胞熒光感應(yīng)分析的原理,對尿液樣本進(jìn)行熒光染色,通過儀器內(nèi)的熒光散射F1、F2通道感應(yīng)樣本細(xì)胞中的熒光強(qiáng)度變化,從而對樣本中存在的細(xì)胞和其他有形成分進(jìn)行定量測定。檢測時樣本不需要離心,僅需滴入熒光染料就可在儀器下自動識別。該方法對實驗技術(shù)人員的操作能力有較高的要求,熒光染色的孵育時間不宜過長,時間太久會使得陰性細(xì)胞也被染色,使得檢測結(jié)果假陽性升高[4-5];同時該方法對儀器也有一定的要求,儀器在長期使用過程中,通道中會堆積熒光染色物質(zhì),經(jīng)久變硬會堵塞通道,因此在平時的使用中應(yīng)注意鞘液的有無和通道的清洗。
顯微鏡檢測是經(jīng)過離心后取尿沉渣涂于載玻片,以高倍鏡下觀察細(xì)胞和管型個數(shù),此方法雖然時間長,易受主觀判斷的影響[6],但避免了檢測時的假陽性。另外,收集好的尿液樣本需快速鏡檢,放置時間過長會使得低張尿出現(xiàn)溶血,使得高張尿出現(xiàn)脫水反應(yīng),影響鏡下視野,導(dǎo)致檢驗結(jié)果出現(xiàn)偏差,因此臨床進(jìn)行顯微鏡檢測時應(yīng)減少放置時間。
本研究結(jié)果顯示,兩種檢查方法所得尿液檢查結(jié)果比較,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),這也驗證了全自動尿沉渣分析儀在臨床的應(yīng)用效果。但根數(shù)據(jù)中全自動儀檢出紅細(xì)胞、管型的陽性率低于人工鏡檢,考慮紅細(xì)胞無細(xì)胞核,僅細(xì)胞膜被熒光劑染色,儀器識別時存在一定的漏誤,而管型識別亦依靠熒光染色,當(dāng)尿液中管型斷裂時,儀器不容易識別,這可能是儀器檢出陽性數(shù)略少的原因;全自動儀白細(xì)胞讀數(shù)高于顯微鏡檢測,考慮是由于白細(xì)胞染色后熒光強(qiáng)度較強(qiáng),容易被儀器識別,而顯微鏡視野下白細(xì)胞不容易被分辨,這也是鏡檢白細(xì)胞陽性略少的原因。
綜上所述,全自動尿液分析儀具有操作簡便、耗時短、檢出率高的特點,而顯微鏡人工檢測具有視野觀察和避免假陽性的優(yōu)勢,臨床可根據(jù)實際情況進(jìn)行靈活應(yīng)用和聯(lián)合參考。