投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚生長和免疫的影響

劉 康，何金釗

(廣西壯族自治區(qū)水產(chǎn)引育種中心，廣西 南寧 530031)

長吻鮠(Leiocassislongirostris)主要分布于長江干、支流和大型通江湖泊中，其個體大、生長快、產(chǎn)量高、病害少、抗逆性強，肉嫩味美，蛋白質(zhì)含量高，是一種暢銷國內(nèi)外的高價值淡水養(yǎng)殖魚類。目前，對長吻鮠的研究大多是關(guān)于養(yǎng)殖技術(shù)方面的[1-3]，關(guān)于疾病、營養(yǎng)、免疫以及分子等研究較少。潘貞禮等[4]探索了投喂頻率對長吻鮠幼魚的特定生長率和攝食率的影響，但投喂頻率和投喂量二者結(jié)合對魚類生長的影響尚沒有深入研究。

水產(chǎn)養(yǎng)殖中，飼料投喂量少，達(dá)不到最大生長性能；過度投喂，會造成消化不完全，飼料利用率低，既增加養(yǎng)殖成本，又導(dǎo)致水質(zhì)惡化，最終影響魚的生長。優(yōu)化投喂模式可以提高水產(chǎn)養(yǎng)殖的生產(chǎn)效率[5-10]，但其還落后于陸生動物養(yǎng)殖業(yè)，存在著很大的研究空間。

本試驗探討了長吻鮠規(guī)?；B(yǎng)殖中的投喂模式，尋找科學(xué)合理的投喂頻率和投喂水平，既可以節(jié)省成本，提高養(yǎng)殖效率，又可以促使養(yǎng)殖更健康，對長吻鮠規(guī)?；B(yǎng)殖有重要的指導(dǎo)意義。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗魚來自廣西水產(chǎn)引育種中心武鳴基地繁殖的健康、活力好、規(guī)格均勻的長吻鮠幼魚，平均全長(4.94±0.52)cm，體長(3.87±0.37)cm，體質(zhì)量(1.15±0.27)g。試驗用飼料采用市售的長吻鮠專用飼料。

1.2 方法

1.2.1 試驗設(shè)計和養(yǎng)殖

試驗前暫養(yǎng)1周后，挑選體質(zhì)健壯、規(guī)格整齊的長吻鮠幼魚隨機分組，移入水泥池( 2 m× 1 m× 1 m)中飼養(yǎng)，每個處理組放魚60尾。采用2×5雙因子試驗設(shè)計， 在日投喂2次和3次的頻率下投喂水平分別為魚體質(zhì)量的2%(A、F)、4%(B、G)、6%(C、H)、8%(D、I)和10%(E、J)，分為10個試驗組(表1)，每個試驗組設(shè)3個重復(fù)，共30個處理組。試驗養(yǎng)殖42 d，每隔7 d每個處理組隨機挑選15尾魚稱重，按照體質(zhì)量的百分比計算出相對應(yīng)的投喂量，各處理組每次投喂量按投喂次數(shù)均勻分配。2次/d時9：00和18：00投喂；3次/d時8：00、12:00和16：00投喂。

表1 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚生長和免疫的影響試驗設(shè)計Tab.1 Experimental design of effects of feeding frequency and feeding level on growth and immunity of juvenileLeiocassis longirostris

1.2.2 生長指標(biāo)測定

試驗開始時，測量每個試驗組魚的初總質(zhì)量和初體長。試驗結(jié)束時，取樣前禁食24 h，稱各組魚末總質(zhì)量，測末體長，計算出長吻鮠幼魚最終均質(zhì)量、特定生長率(SRG)和肥滿度(CF)。

1.2.3 抗氧化指標(biāo)測定

每組隨機挑選14尾魚，經(jīng)MS-222麻醉后用毛巾將魚體表擦干，然后用1 mL注射器于尾靜脈迅速抽取4～5 mL血液置于4 ℃冰箱中靜置2～4 h，待血液凝固析出血清后，于4 000 r/min、4 ℃離心10 min，分離出血清，用1.5 mL塑料離心管密封，冷藏待用?？偝趸锲缁?T-SOD)、丙二醛(MDA)、溶菌酶(LYS)采用南京建成生物工程研究所的試劑盒測定。

1.2.4 相關(guān)統(tǒng)計分析

增重率(WGR，%)：

XWGR=100%×(Wt-W0)/W0

(1)

特定生長率(SGR，%)：

XSGR=100%×(lnWt-lnW0)/t

(2)

肥滿度(CF，g/cm3)：

(3)

式中：Wt、Wo—魚的末體質(zhì)量和初始平均體質(zhì)量，g；t—試驗天數(shù)，d；Lt—魚的末體長，cm。

2 結(jié)果

2.1 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚生長的影響

圖1～圖3及表2顯示，投喂頻率對長吻鮠幼魚的末體質(zhì)量、特定生長率和肥滿度影響不顯著(P>0.05)，投喂水平對這幾項指標(biāo)影響顯著(P<0.05)。當(dāng)投喂頻率固定不變時，各指標(biāo)隨投喂水平的增加先升高后降低，投喂水平6%時取得最大值；投喂頻率為2次/d，末體質(zhì)量顯著高于其他各組(P<0.05)；在投喂水平為6%、投喂頻率為2次/d和3次/d時，特定生長率無顯著差異，但均顯著高于其他試驗組(P<0.05)?；貧w分析表明，在投喂頻率分別為2次/d和3次/d時，長吻鮠幼魚的末體質(zhì)量和特定生長率與投喂水平之間存在高度的二次相關(guān)性，兩條曲線幾乎重合。當(dāng)投喂頻率為2次/d、投喂水平為6%時，長吻鮠幼魚的肥滿度顯著高于其他各組(P<0.05)。在投喂水平為2%時，各試驗組長吻鮠幼魚的指標(biāo)均處于最低水平，顯著低于其他各組(P<0.05)。

圖1 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚末體質(zhì)量的影響Fig.1 The effect of feeding frequency and feeding level on terminal body mass of juvenile Leiocassis longirostris

圖2 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚特定生長率的影響Fig.2 The effect of feeding frequency and feeding level on SGR of juvenile Leiocassis longirostris

圖3 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚肥滿度的影響Fig.3 The effect of feeding frequency and feeding level on CF of juvenile Leiocassis longirostris

表2 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚生長的影響Tab.2 The effect of feeding frequency and feeding level on growth of juvenile Leiocassis longirostris

2.2 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚免疫指標(biāo)的影響

由表3可以看出，投喂頻率和投喂水平的交互作用對血清中MDA和LYS的含量有顯著影響(P<0.05)，對T-SOD的含量影響不顯著(P>0.05)。主效應(yīng)P值雙因素方差分析顯示，投喂頻率 × 投喂水平的血清MDA、T-SOD和LYS分別對應(yīng)0.000 nmol/L、0.161 ng/L和0.000 μg/L。MDA含量在C組時最低，顯著低于D、E、I、J組(P<0.05)，低于其余各組但不顯著(P>0.05)；T-SOD含量在B、C組達(dá)到最大值，顯著高于E組(P<0.05)，高于其余各組但不顯著(P>0.05)；LYS含量在C、H組時顯著高于其他各組(P<0.05)。

3 討論

3.1 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚生長的影響

本試驗中，投喂頻率對長吻鮠幼魚的末體質(zhì)量、特定生長率和肥滿度均無顯著影響(P>0.05)，與Silva等[11]認(rèn)為投喂頻率對各項生長指標(biāo)無顯著差異的研究結(jié)果基本一致；但與強俊等[12]、何利君等[13]研究結(jié)果不同。不同魚的種類、規(guī)格等，其生長性能受到投喂頻率的影響也不一樣。仇登高等[14]發(fā)現(xiàn)不同投喂頻率對鞍帶石斑魚的存活率、肥滿度、體質(zhì)量變異系數(shù)、飼料系數(shù)和日增重等均無顯著影響(P>0.05)；李卓欽等[15]發(fā)現(xiàn)投喂頻率為2次/d時，斑點叉尾鮰幼魚末體質(zhì)量和增重率顯著高于3次/d(P<0.05)；丁立云等[16]發(fā)現(xiàn)投喂頻率3次/d時，彭澤鯽的增重率和特定生長率顯著高于1次/d和2次/d。

本試驗的投喂水平為2%、4%、6%時，2次/d的末體質(zhì)量、特定生長率和肥滿度均高于3次/d；當(dāng)投喂水平為8%和10%時，末體質(zhì)量和特定生長率則低于3次/d。這可能是投喂水平偏低時，投喂頻率為3次/d，長吻鮠幼魚要多花能量用于進(jìn)食，反而抑制了生長。這與孫曉鋒等[17]研究結(jié)果基本一致，即2次/d投喂的吉富羅非魚幼魚生長性能要好于3次/d。投喂水平較高時，投喂頻率為2次/d，長吻鮠幼魚單次攝入的能量即可滿足生長所需，使長吻鮠幼魚能更好地生長。

本試驗中，在兩種投喂頻率下，長吻鮠幼魚的末體質(zhì)量、特定生長率均隨著投喂水平增加呈現(xiàn)先升高后降低，即投喂水平為8%和10%時，生長水平顯著低于6%水平。其原因可能是攝入的能量過多，導(dǎo)致在魚的生長前期，脂肪在體內(nèi)堆積，造成消化器官的損壞，影響之后生長過程中的消化吸收，從而使生長受到限制。Rasmussen等[18]也證明了脂肪在高投喂水平下快速生長的魚體內(nèi)更加容易沉積。本試驗結(jié)果與Sun等[19]研究投喂水平對軍曹魚(Rachycentroncanadum)生長的影響和Silva等[11]研究投喂水平對大蓋巨脂鯉(Colossomamacropomum)生長的影響等研究結(jié)果一致。羅琳等[20]研究了不同投喂水平(3.0%、3.5%、4.0%)對鯽魚生長性能的影響，發(fā)現(xiàn)在高投喂頻率下(6次/d)，鯽魚的特定生長率隨著投喂水平的增加而顯著增加(P<0.05)，這與本試驗結(jié)果有差異，可能是由于本試驗投喂水平的分組跨度比較大，能比較全面反映投喂水平對魚類生長變化的影響；徐革鋒等[21]研究不同投喂水平對細(xì)鱗鮭幼魚生長的影響，發(fā)現(xiàn)隨著投喂水平的增加，相對增重率和特定生長率先升高后降低，與本試驗結(jié)果一致。

3.2 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚免疫的影響

T-SOD可以消除魚體內(nèi)多余的自由基，免除其對機體的傷害，可以用于反映機體抗氧化性的強弱和非特異性免疫功能的重要生理指標(biāo)[22-23]。當(dāng)魚的機體產(chǎn)生的自由基與抗氧化系統(tǒng)失衡時，MDA的含量會過多產(chǎn)生，因此，其含量可以間接反映機體的氧化受損程度以及考查抗氧化能力的重要指標(biāo)[22,24]。本試驗中，T-SOD的含量隨著投喂水平的增加呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢，在6%時達(dá)到最大值；MDA的含量隨著投喂水平的增加呈現(xiàn)出升高的趨勢，且在8%和10%時的含量顯著高于其他投喂水平。這表明，投喂水平越高，魚體攝入過量飼料，抗氧化能力反而會降低，從而導(dǎo)致免疫功能下降，這與陳文霞等[25]的研究結(jié)果相符。LYS是機體非特異性免疫的重要指標(biāo)，其含量的高低可以反映溶菌能力的強弱[26]。LYS隨著投喂水平的增加呈現(xiàn)出先升高后降低的趨勢，在6%投喂水平時顯著高于其他試驗組，說明在一定范圍內(nèi)，提高投喂水平可以增強魚的機體非特異性免疫，超過一定水平，有可能會使魚的肝臟受損，導(dǎo)致酶活性降低。

表3 投喂頻率和投喂水平對長吻鮠幼魚免疫指標(biāo)的影響Tab.3 The effect of feeding frequency and feeding level on immunity indicators of juvenile Leiocassis longirostris

注：同一列數(shù)據(jù)右上角標(biāo)不同字母表示有顯著差異(P<0.05)

4 結(jié)論

方差分析表明，投喂頻率和投喂水平對長吻鮠各生長指標(biāo)均存在顯著的交互作用(P<0.05)，對血清MDA、LYS存在顯著的交互作用(P<0.05)，綜合生長和免疫指標(biāo)，在本試驗條件下，投喂頻率為2次/d、投喂水平為6%的投喂模式更利于長吻鮠幼魚的生長。

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