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    可溶性血管黏附蛋白-1與動(dòng)脈僵硬度的相關(guān)性分析

    2019-03-04 02:22:50張艷迪陳大偉姜樹強(qiáng)龍麗娟張婧靳英郭廣晉王建昌
    安徽醫(yī)藥 2019年3期
    關(guān)鍵詞:三酰甘油低密度

    張艷迪,陳大偉,姜樹強(qiáng),龍麗娟,張婧,靳英,郭廣晉,王建昌

    VAP-1是一種雙功能蛋白,以可溶性和膜結(jié)合型兩種形式存在,在內(nèi)皮細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等細(xì)胞中均有表達(dá)。它是由Marko Salmi[1]首先發(fā)現(xiàn),內(nèi)皮VAP-1可以參與炎癥反應(yīng),同時(shí)具有氨基脲敏感胺氧化酶SSAO酶活性,SSAO的的終產(chǎn)物可促進(jìn)動(dòng)脈硬化的發(fā)展。目前的研究已經(jīng)證實(shí)VAP-1在急性和慢性高血糖或糖尿病病人[2]、慢性腎臟病[3]、吸煙人群[4]中水平是升高的,與蛋白尿水平[3]呈正相關(guān)。這些研究與動(dòng)脈硬化危險(xiǎn)因素密切相關(guān),但目前關(guān)于兩者的研究在國(guó)內(nèi)外較少,筆者選擇評(píng)估動(dòng)脈硬化度的非侵入性方法踝-臂動(dòng)脈脈搏波傳導(dǎo)速度(baPWV),來研究sVAP-1與動(dòng)脈硬化的關(guān)系。

    1 資料與方法

    1.1研究對(duì)象選取2013—2014年空軍總醫(yī)院健康體檢中心的579例體檢者,年齡(56.62±8.02)歲,年齡范圍為34~86歲,男性361例,年齡(49.63±7.54)歲,年齡范圍為33~78歲,女性215例,年齡(52.3±8.02)歲,年齡范圍為38~86歲。

    1.2排除標(biāo)準(zhǔn)排除了影響sVAP-1的因素:炎癥性肝疾病、終末期腎病、炎癥性皮膚疾病(如銀屑病和濕疹)、炎癥性神經(jīng)系統(tǒng)疾病(如多發(fā)性硬化癥和阿爾茨海默癥)、炎癥相關(guān)的眼部疾病(如色素性視網(wǎng)膜炎、年齡相關(guān)性黃斑變性)、充血性心力衰竭。

    1.3一般資料所有研究對(duì)象被要求在健康體檢前的12 h進(jìn)食易消化食物,避免劇烈運(yùn)動(dòng)、暴飲暴食、飲用咖啡、酒精。測(cè)量身高和體質(zhì)量,計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(BMI);血壓的測(cè)量,體檢者取仰臥位,測(cè)量?jī)纱伍g隔5 min的血壓值;詢問慢性病患病史(高血壓病史、糖尿病病史、腦梗死病史、動(dòng)脈硬化病史),家族史、吸煙史、飲酒史等,每天或每周吸煙、飲酒至少6個(gè)月以上者可認(rèn)為有吸煙、飲酒史,每天服用降壓藥物或測(cè)得血壓≥140/90 mmHg則為高血壓,注射胰島素或服用降糖藥物或空腹血糖≥7 mmol/L為糖尿??;抽取靜脈血在我院臨床化驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室中心化驗(yàn)血糖、總膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、血肌酐、血尿素氮、血尿酸等生化指標(biāo)。動(dòng)脈硬化檢測(cè)儀測(cè)定動(dòng)脈僵硬度指標(biāo)baPWV,取兩側(cè)的平均值為最后分析數(shù)據(jù)。向參與者提供書面知情同意,對(duì)于不識(shí)字者提供口頭知情同意,本項(xiàng)研究經(jīng)空軍總醫(yī)院機(jī)構(gòu)倫理審查委員會(huì)同意。

    1.4sVAP-1的測(cè)量根據(jù)試劑盒說明(MedSystem Diagnostic GmbH,Vienna,Austria)用ELISA測(cè)定sVAP-1的濃度,單位ng/mL。將分析血清樣品用緩沖液稀釋1∶100,然后轉(zhuǎn)移到微孔板涂抗sVAP-1抗體。添加與生物素結(jié)合的小鼠抗體后,將該板在室溫下孵育2 h并以300輪/分鐘搖動(dòng)。孵育后,將鏈霉親和素辣根過氧化物酶添加到每個(gè)孔內(nèi)和以300輪/分鐘搖動(dòng)1 h。最后,使用450型酶標(biāo)儀及620 nm波長(zhǎng)讀取每個(gè)樣品在450 nm處的吸光度。

    2 結(jié)果

    2.1sVAP-1及baPWV與臨床特征的相關(guān)性分析結(jié)果baPWV與年齡、收縮壓、舒張壓、體質(zhì)量指數(shù)、空腹血糖、三酰甘油、膽固醇、低密度脂蛋白、C反應(yīng)蛋白、腎小球?yàn)V過率、高血壓、糖尿病存在相關(guān)性(r=0.561、0.539、0.29、0.186、0.201、0.114、0.155、0.111、0.202、-0.174、0.382、0.174,P<0.05);sVAP-1與年齡、體質(zhì)量指數(shù)、空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白、糖尿病具有相關(guān)性(r=0.273、-0.176、0.179、-0.130、0.110、0.129、0.141,P<0.05)。見表1。在控制了體質(zhì)量指數(shù)、空腹血糖、三酰甘油、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、糖尿病等因素后偏相關(guān)分析結(jié)果顯示,sVAP-1與baPWV仍具有相關(guān)性(r=0.233,P<0.001),見圖1。

    表1 baPWV及sVAP-1與臨床特征的相關(guān)性的相關(guān)性分析結(jié)果

    2.2年齡分組后三組間sVAP-1比較將年齡分為≤45歲、>45~55歲、≥55歲三組,三組間sVAP-1水平差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[(306.84±7.15)比(341.61±106.2)比(374.83±98.27),P<0.001],隨著年齡的增加水平增加,見表2。sVAP-1與baPWV在多重線性回歸分析無相關(guān)性(b=-0.002,P>0.05),但將年齡分為三組后,在55歲以上人群中,sVAP-1與平均baPWV及最大baPWV均具有明顯的相關(guān)性(β=0.052、0.05,P<0.05),而且在控制了年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、血糖、三酰甘油、膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、糖尿病后仍具有明顯的獨(dú)立相關(guān)性(β=0.049、0.048,P<0.05),見表3。

    表2 年齡分組后三組間sVAP-1比較9

    圖1 sVAP-1和年齡間的相關(guān)性

    3 討論

    sVAP-1作為一個(gè)非經(jīng)典內(nèi)皮黏附分子[5],可通過調(diào)控轉(zhuǎn)錄因子、趨化因子和其他黏附分子來調(diào)節(jié)炎癥微環(huán)境,參與白細(xì)胞的滾動(dòng)[6],黏附和遷移至炎癥環(huán)境,各種趨化因子、細(xì)胞因子和酶的分泌,損傷血管內(nèi)皮,導(dǎo)致動(dòng)脈硬化,是其致動(dòng)脈硬化的重要機(jī)制。而且它也是一種氨基脲敏感胺氧化酶(SSAO),這種酶[7]可催化伯胺生成醛、過氧化氫、和氨,其中過氧化氫是氧化應(yīng)激的來源并可促進(jìn)動(dòng)脈硬化病變,而醛基和氨則有助于自由基的產(chǎn)生、氧化低密度脂蛋白膽固醇和寡糖的修飾,最終導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性、晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)的形成、血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,在一項(xiàng)動(dòng)物研究[8]中發(fā)現(xiàn)小鼠內(nèi)皮VAP-1過度表達(dá)得出血清AGEs濃度增加,白細(xì)胞結(jié)合力增強(qiáng),肝臟氧化還原敏感的蛋白表達(dá)上調(diào),并加速動(dòng)脈硬化。這些是動(dòng)脈硬化病變的主要機(jī)制之一。同時(shí)內(nèi)皮中sVAP-1也可借助于SSAO酶活性通過與淋巴細(xì)胞,粒細(xì)胞和單核細(xì)胞的結(jié)合參與炎癥反應(yīng)。sVAP-1在動(dòng)脈硬化的形成過程中可能發(fā)揮一定作用,或許是動(dòng)脈硬化的一種新型的危險(xiǎn)因素。

    從目前的臨床研究中我們可以發(fā)現(xiàn),sVAP-1與年齡[9]、三酰甘油[10]、體質(zhì)量指數(shù)[11]、糖尿病[3]、吸煙[4]等動(dòng)脈硬化危險(xiǎn)因素均一定關(guān)聯(lián),同樣的在我們的研究中發(fā)現(xiàn)sVAP-1與體質(zhì)量指數(shù)、三酰甘油呈負(fù)相關(guān)(r=-0.176、-0.130,P<0.05),與糖尿病也具有密切的相關(guān)性,這與最近的幾項(xiàng)研究結(jié)果一致,在一項(xiàng)非糖尿病[12]病人中通過改變血清sVAP-1的濃度,其與頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度獨(dú)立相關(guān),此研究說明了血清sVAP-1的急性改變是高血糖引起動(dòng)脈硬化一種新型的標(biāo)志物,頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度是動(dòng)脈硬化指數(shù)。Aalto等[9,13]的兩項(xiàng)研究中證實(shí)VAP-1早期動(dòng)脈硬化有相關(guān)性,有研究中還發(fā)現(xiàn)VAP-1可預(yù)測(cè)心血管事件和動(dòng)脈硬化的全因死亡率。在我國(guó)的一項(xiàng)綜述研究[14]中,通過抑制VAP-1/SSAO,可減輕炎性反應(yīng),減緩甚至阻斷AS的進(jìn)展。VAP-1與動(dòng)脈硬化危險(xiǎn)因素、心血管事件相關(guān)性的研究結(jié)果,更加證實(shí)了VAP-1與動(dòng)脈硬化的關(guān)聯(lián)性。

    在本研究中選擇一種重要的評(píng)估動(dòng)脈硬化度無創(chuàng)方法baPWV,它可反應(yīng)動(dòng)脈彈性及硬度,是評(píng)估動(dòng)脈硬化的經(jīng)典指標(biāo),其值越大,動(dòng)脈彈性越差,而年齡也是血管彈性改變的重要原因,隨著年齡的增加,血管彈性逐漸減退,僵硬度增加,一項(xiàng)研究[16]發(fā)現(xiàn)隨著年齡的增長(zhǎng),baPWV呈現(xiàn)一定的線性曲線,同時(shí)發(fā)現(xiàn)baPWV可能是老年人動(dòng)脈硬化度較敏感的一項(xiàng)指標(biāo)。在我們的研究中發(fā)現(xiàn)年齡、sVAP-1與baPWV均具有相關(guān)性,在55歲以上人群中sVAP-1與baPWV具有獨(dú)立的相關(guān)性,而在先前的幾項(xiàng)研究[3,13,17]已經(jīng)證實(shí),SSAO的酶活性和可溶性血管黏附蛋白濃度與年齡呈正相關(guān),大量的實(shí)驗(yàn)和臨床數(shù)據(jù)[18]中顯示這一關(guān)聯(lián)性可能與炎癥有關(guān),隨著年齡的增長(zhǎng)一些炎癥因子(細(xì)胞因子、趨化因子、黏附分子等)可能有輕微上調(diào);而且也發(fā)現(xiàn)在人類年齡與多種炎癥獨(dú)立相關(guān)(血管細(xì)胞黏附分子-1、細(xì)胞間黏附分子-1、E-選擇素),sVAP-1同樣是一種黏附分子,毋庸置疑其水平將隨年齡而增加,在本研究也證實(shí)了這一結(jié)論,年齡在55歲以上人群其sVAP-1濃度最高,這說明當(dāng)sVAP-1達(dá)到足夠水平時(shí)對(duì)老年人群動(dòng)脈硬化有獨(dú)立影響。

    表3 sVAP-1與baPWV的多重線性分析結(jié)果

    注:模型1:未校正;模型2:校正了年齡、性別、體質(zhì)量指數(shù)、血糖、三酰甘油、膽固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、糖尿病因素

    總結(jié),就本研究而言,sVAP-1對(duì)動(dòng)脈硬化存在影響,尤其在老年人群中與baPWV具有獨(dú)立的相關(guān)性,因?yàn)閟VAP-1酶和黏附能力的雙重作用,以及其與炎癥性疾病的強(qiáng)關(guān)聯(lián),使sVAP-1成為藥物發(fā)現(xiàn)的一個(gè)有趣的治療靶點(diǎn)。因此,同時(shí)監(jiān)測(cè)老年人群baPWV和sVAP-1水平,對(duì)血管動(dòng)脈硬化的預(yù)防可能起到一定作用,并且sVAP-1可能成為治療動(dòng)脈硬化一個(gè)新的靶點(diǎn)。

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