3種形態(tài)飼料對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)和免疫力的影響

陳度煌，何國(guó)森，劉銀華，劉艷艷，李學(xué)貴

(福建省淡水水產(chǎn)研究所， 福建 福州 350002)

大口黑鱸Micropterussalmoides，俗稱加州鱸、淡水瓜，是典型淡水肉食性魚(yú)類。大口黑鱸因生長(zhǎng)快，抗病力強(qiáng)，肉質(zhì)鮮美細(xì)嫩，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高，經(jīng)濟(jì)價(jià)值高，深受養(yǎng)殖者和消費(fèi)者青睞[1]。在全國(guó)的養(yǎng)殖市場(chǎng)年產(chǎn)量達(dá)到30萬(wàn)t，在國(guó)內(nèi)特種魚(yú)養(yǎng)殖上，算是產(chǎn)量比較大的品種。目前，大口黑鱸養(yǎng)殖仍以投喂冰鮮小雜魚(yú)為主，另外2種配合飼料形式是軟顆粒飼料與膨化顆粒飼料。大口黑鱸養(yǎng)殖中配合飼料使用量在整個(gè)大口黑鱸餌料使用量中的比重還很低，其中最主要的原因就是對(duì)大口黑鱸攝食特性和基本營(yíng)養(yǎng)需求尚不十分清楚，導(dǎo)致配合飼料喂養(yǎng)大口黑鱸后期出現(xiàn)生長(zhǎng)停滯、肝臟病變和疾病頻發(fā)的狀況，養(yǎng)殖后期只能轉(zhuǎn)投冰鮮魚(yú)，即便在養(yǎng)殖前期，使用冰鮮魚(yú)養(yǎng)殖的總體比例還是比較大[2]。

雖然國(guó)內(nèi)外對(duì)大口黑鱸配合飼料已有較多相關(guān)報(bào)道[3-7]，但對(duì)大口黑鱸的營(yíng)養(yǎng)需求、配合飼料的應(yīng)用和對(duì)大口黑鱸免疫力影響的研究仍較少，大口黑鱸成魚(yú)營(yíng)養(yǎng)需求及高效環(huán)保人工配合飼料的研究亟待解決。為此，本研究比較投喂膨化顆粒料、軟顆粒飼料和冰鮮魚(yú)3種形態(tài)的飼料對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)速度、飼料效率及免疫力的影響，以期為大口黑鱸的養(yǎng)殖及配合飼料的研究開(kāi)發(fā)提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì)與試驗(yàn)用魚(yú)

試驗(yàn)在南平市延平區(qū)欣欣魚(yú)種場(chǎng)進(jìn)行，網(wǎng)箱3.0 m×1.5 m×2.0 m。試驗(yàn)共設(shè)3組，每組設(shè)2次重復(fù)(把中位數(shù)當(dāng)作第3次重復(fù))，共計(jì)6個(gè)網(wǎng)箱。處理組1：投喂膨化顆粒飼料；處理組2：投喂自制軟顆粒飼料(粉料，加水比例34%)；處理組3(CK)：投喂冰鮮魚(yú)。試驗(yàn)用魚(yú)馴養(yǎng)2周后，選取體質(zhì)健康、規(guī)格一致的大口黑鱸360尾，平均體重為86.3 g·尾-1。每個(gè)網(wǎng)箱放養(yǎng)大口黑鱸60尾。試驗(yàn)期間水溫為25.5～31.5℃，pH值為7.5～8.0，溶解氧值為4.5～6.0 mg·L-1。

1.2 試驗(yàn)飼料

膨化顆粒飼料為福建一家較大規(guī)模飼料公司生產(chǎn)的鱸魚(yú)專用飼料。自制軟顆粒飼料是用自配粉料加一定比例的水?dāng)嚢杌旌?，再用軟顆粒機(jī)擠壓成型，可以直接投喂或冷凍投喂的飼料；自配粉料由進(jìn)口魚(yú)粉、α-淀粉、豆粕、啤酒酵母、漁用多維多礦、免疫促生長(zhǎng)劑、膽堿、甜菜堿等原料組成，各種原料粉碎后90%以上過(guò)60目篩，按配比準(zhǔn)確稱量，混合均勻。冰鮮魚(yú)為市售冰鮮藍(lán)圓鲹Decapterusmaruadsi，切成小塊投喂。3種形態(tài)飼料營(yíng)養(yǎng)成分的測(cè)定值如表1所示。

表1 3種形態(tài)飼料營(yíng)養(yǎng)成分

注：表中數(shù)值均為平均值；括號(hào)外數(shù)值以鮮樣計(jì)的含量,括號(hào)內(nèi)數(shù)據(jù)為折算成以干物質(zhì)計(jì)的含量。

1.3 飼養(yǎng)管理

(1)對(duì)給定的飼料嚴(yán)格按組投喂，每日投餌2次，軟顆粒飼料當(dāng)天投喂不完的放入冰柜貯存。投餌量根據(jù)天氣、水溫、魚(yú)攝食狀況而定，以試驗(yàn)魚(yú)不再活躍攝食為度，每天詳細(xì)記錄各組別的實(shí)際攝食量。

(2)每天記錄各網(wǎng)箱魚(yú)的活動(dòng)情況等，若有死亡，進(jìn)行稱重，做好記錄。每天定時(shí)測(cè)定水溫，溶解氧。

(3)試驗(yàn)時(shí)間為2018年7月25日至9月22日，共計(jì)60 d。

1.4 試驗(yàn)測(cè)定指標(biāo)和方法

1.4.1生長(zhǎng)性能 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，停食1 d后，對(duì)網(wǎng)箱里的大口黑鱸進(jìn)行計(jì)數(shù)，測(cè)定總重，抽樣測(cè)定體長(zhǎng)、體重。生長(zhǎng)效果測(cè)定指標(biāo)：

尾絕對(duì)增重=試驗(yàn)結(jié)束尾重-試驗(yàn)開(kāi)始尾重

增重率=(尾絕對(duì)增重/試驗(yàn)開(kāi)始尾重)×100%

日增重=尾相對(duì)增重/試驗(yàn)天數(shù)

豐滿度=魚(yú)體重×100/[魚(yú)體長(zhǎng)]3

成活率=(成活尾數(shù)/總尾數(shù))×100%

飼料系數(shù)=總投餌量/魚(yú)體總增重量

蛋白質(zhì)效率(PER)=[(試驗(yàn)結(jié)束時(shí)魚(yú)體總重-試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)魚(yú)體總重)/(總投餌量×飼料蛋白質(zhì)含量)]×100%

1.4.2血清免疫指標(biāo) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每桶隨機(jī)取魚(yú)5尾，斷尾取血，3 000 r·min-1，離心5 min,取上層血清冷凍備用，測(cè)定大口黑鱸非特異性免疫力。超氧化物歧化酶活力(SOD)、溶菌酶活力(LSZ)、堿性磷酸酶活力(AKP)3種酶活力測(cè)定，均采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒，試驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格按照試劑盒使用說(shuō)明進(jìn)行，計(jì)算方法參照試劑盒說(shuō)明書(shū)。

1.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用Microsoft Excel作初步處理，先對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)作方差分析，若有顯著差異，再作Duncan氏多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 3種形態(tài)的飼料對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)性能的影響

從表2可以看出，處理組3(CK)投喂冰鮮魚(yú)的大口黑鱸生長(zhǎng)速度最快，尾絕對(duì)增重達(dá)115.97 g，其次是處理組2，處理組1投喂膨化顆粒飼料的大口黑鱸生長(zhǎng)最慢，只有109.75 g。處理組1、處理組2、處理組3(CK)相對(duì)增重率分別為126.92%、127.40%、136.12%。在飼料系數(shù)方面，以干物質(zhì)計(jì)，處理組2飼料系數(shù)為1.45，低于處理組1(1.55)。在蛋白質(zhì)效率方面，處理組2最高，達(dá)到128.66%，顯著高于處理組1和處理組3(CK)(P<0.05)。在豐滿度方面，處理組3(CK)達(dá)到1.61 g·cm-3，顯著高于處理組2、處理組1(P<0.05)。

表23種形態(tài)飼料對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)性能的影響

Table 2 Effects of three kinds of feed on the growth performance of largemouth bass

生長(zhǎng)性能指標(biāo)組別123(CK)平均初重(g·尾-1)86.4787.2385.20平均末重(g·尾-1)196.22198.36201.17尾絕對(duì)增重(g)109.75111.13115.97增重率(%)126.92 a127.40 a136.12 b日增重(g)1.831.852.27豐滿度(g·cm-3)1.53 a1.53 a1.61 b成活率(%)90.8387.5089.17飼料系數(shù)1.702.155.52飼料系數(shù)(以干物質(zhì)計(jì))1.55 a1.45 b1.39 b蛋白質(zhì)效率(%)(以干物質(zhì)計(jì))121.03 a128.66 b119.36 a

注：表中數(shù)值均為平均值；同行數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，相同小寫(xiě)字母表示差異不顯著。

2.2 3種形態(tài)飼料對(duì)大口黑鱸免疫力的影響

由表3可知，在堿性磷酸酶活力方面，處理組3(CK)活力最強(qiáng)，處理組2、處理組3(CK)顯著高于處理組1(P<0.05)；在溶菌酶活力方面，處理組1、處理組2、處理組3(CK)數(shù)值差異不顯著(P>0.05)；在總超氧化物歧化酶活力方面，處理組2、處理組3(CK)活力最強(qiáng)，達(dá)到141.18、140.33 U·mL-1，顯著高于處理組1(P<0.05)。

表33種形態(tài)飼料對(duì)大口黑鱸免疫力的影響

Table 3 Effects of three kinds of feed on the immunity of largemouth bass

組別堿性磷酸酶活力(U·L-1)溶菌酶活力(ug·mL-1)總超氧化物歧化酶活力(U·mL-1)135.2±1.8 a1.87±0.15 a129.26±11.20 a238.8±2.6 b1.82±0.18 a141.18±13.15 b3(CK)39.3±3.3 b1.85±0.27 a140.33±15.83 b

注：表中數(shù)值均為平均值±標(biāo)準(zhǔn)差；同列數(shù)據(jù)后不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，相同小寫(xiě)字母表示差異不顯著。

3 討論與結(jié)論

3.1 討論

3.1.13種形態(tài)飼料對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)性能的影響 大口黑鱸是兇猛的肉食性魚(yú)類，對(duì)蛋白質(zhì)的需求較高，在本試驗(yàn)中，投喂的冰鮮魚(yú)以干物質(zhì)計(jì)算，蛋白質(zhì)含量達(dá)到67.48%，高于其他2個(gè)處理組，充分滿足了大口黑鱸的生長(zhǎng)需要，所以投喂冰鮮魚(yú)的大口黑鱸生長(zhǎng)速度最快。處理組3(CK)大口黑鱸搶食較兇，可能是因?yàn)榇罂诤邝|的遺傳特性決定了對(duì)攝食冰鮮魚(yú)更加適應(yīng)，這與大口黑鱸的肉食性特點(diǎn)相吻合[8]。處理組3(CK)的豐滿度顯著高于其他處理組(P<0.05)，說(shuō)明在大口黑鱸生長(zhǎng)過(guò)程中，冰鮮魚(yú)提供的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)得到較充分的消化、吸收、利用，并造成一定的脂肪沉積。

與處理組3(CK)相比，處理組2飼料系數(shù)(以干物質(zhì)計(jì))雖小幅高于處理組3(CK)，低于處理組1，但蛋白質(zhì)效率最高，主要是因?yàn)檐涱w粒飼料與小雜魚(yú)一樣，更適合肉食性魚(yú)類的攝食習(xí)性，適口性好，因而集群性好，搶食性旺盛。此外，自制軟顆粒飼料營(yíng)養(yǎng)水平更加平衡，氨基酸組成更加合理，消化率高，避免了蛋白質(zhì)的浪費(fèi)。有研究表明[9-11]，在大口黑鱸養(yǎng)殖過(guò)程中，氨基酸、脂肪酸、纖維素等營(yíng)養(yǎng)素的平衡性起著重要作用，并非都是餌料投喂量越多，魚(yú)生長(zhǎng)越快。目前，有關(guān)大口黑鱸營(yíng)養(yǎng)需求的研究仍十分缺乏，大口黑鱸營(yíng)養(yǎng)需求及高效環(huán)保人工配合飼料的研究已成魚(yú)類營(yíng)養(yǎng)學(xué)一個(gè)重要而復(fù)雜的研究課題，一直是營(yíng)養(yǎng)研究人員努力的目標(biāo)。

3.1.23種形態(tài)飼料投喂大口黑鱸的優(yōu)缺點(diǎn) 目前大口黑鱸養(yǎng)殖生產(chǎn)中大部分還是以投喂小雜魚(yú)為主，小雜魚(yú)貨源供應(yīng)受休漁期和季節(jié)的制約，鮮度和品質(zhì)不好保證，質(zhì)量波動(dòng)很大，不同品種的小雜魚(yú)或同一品種不同地區(qū)、不同季節(jié)都會(huì)有差異。另外使用小雜魚(yú)對(duì)漁業(yè)資源破壞很大；更主要的是小雜魚(yú)殘餌對(duì)水質(zhì)影響相當(dāng)嚴(yán)重，嚴(yán)重影響了大口黑鱸養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和養(yǎng)殖效益。使用配合飼料投喂大口黑鱸，對(duì)于獲取更大的養(yǎng)殖經(jīng)濟(jì)效益和生態(tài)效益均具有重要意義[12]。

從商品化的角度上講，膨化顆粒飼料將是配合飼料的發(fā)展方向，但也存在著適口性差、對(duì)熱敏性成分破壞嚴(yán)重、投餌率不穩(wěn)定、消化率低等缺點(diǎn)，且在大口黑鱸的使用上，已經(jīng)證明容易導(dǎo)致肝膽疾病，無(wú)法全程取代小雜魚(yú)。

軟顆粒飼料可根據(jù)大口黑鱸的營(yíng)養(yǎng)需要配制，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定，營(yíng)養(yǎng)全價(jià)平衡，可免除膨化顆粒飼料制粒時(shí)的加熱和干燥過(guò)程，避免營(yíng)養(yǎng)成分的損失，特別是蛋白質(zhì)和熱不穩(wěn)定性維生素的破壞。同時(shí)，便于針對(duì)防病、治病的需要添加藥物，科研和開(kāi)發(fā)上使用價(jià)值高。但大口黑鱸軟顆粒飼料的推廣使用也存在一定的瓶頸，比如軟顆粒飼料加工、運(yùn)輸、貯存不方便，需要機(jī)械和凍庫(kù)，使用過(guò)程中溶失率高等。因此，在使用軟顆粒飼料過(guò)程中，如何根據(jù)實(shí)際需要，揚(yáng)長(zhǎng)避短，有待今后進(jìn)一步研究。

3.1.33種形態(tài)飼料對(duì)大口黑鱸免疫力的影響 魚(yú)類是低等脊椎動(dòng)物，特異性免疫機(jī)制還不完善，非特異性免疫在防御病原體感染中具有非常重要的意義[13]。目前，大口黑鱸高密度集約化養(yǎng)殖所導(dǎo)致疾病時(shí)有發(fā)生，提高其非特異性免疫力就成為防病的關(guān)鍵。非特異性免疫功能在草魚(yú)、羅非魚(yú)、鯉魚(yú)等的研究較多，但在大口黑鱸上的研究還非常少[14]。本試驗(yàn)在不添加其他免疫增強(qiáng)劑的情況下，比較分析投喂冰鮮魚(yú)、自制軟顆粒飼料、膨化顆粒飼料對(duì)大口黑鱸免疫力的影響，為大口黑鱸健康養(yǎng)殖提供參考。

超氧化物歧化酶、堿性磷酸酶、溶菌酶是評(píng)價(jià)魚(yú)類非特異性免疫力的常用指標(biāo)。超氧化物歧化酶(SOD)是機(jī)體抗氧化酶之一，有消除超氧陰離子自由基、抗氧化、防御機(jī)體衰老、預(yù)防生物分子損傷的作用，其活性與魚(yú)體的免疫水平關(guān)系緊密，對(duì)于增強(qiáng)吞噬細(xì)胞防御能力和機(jī)體免疫功能有重要作用。溶菌酶(LSZ)在機(jī)體免疫過(guò)程中，通過(guò)催化水解細(xì)菌細(xì)胞壁黏肽的乙酰胺基多糖，導(dǎo)致細(xì)菌裂解死亡。同時(shí)能清除其他抗菌因子作用后所殘余的細(xì)菌細(xì)胞壁，并增強(qiáng)其他免疫因子的抗菌敏感性，誘導(dǎo)調(diào)節(jié)其他免疫因子的合成與分泌，抵制外來(lái)病原的入侵。堿性磷酸酶(AKP) 是磷酸酶的一種，能夠通過(guò)改變病原體的表面結(jié)構(gòu)，增強(qiáng)機(jī)體對(duì)病原體的識(shí)別和吞噬能力，起著調(diào)理素的作用，加速吞噬細(xì)胞的吞噬和病原體的降解速度，進(jìn)而提高魚(yú)體的抗病力[15-18]。在本研究中，溶菌酶活力方面，投喂3種形態(tài)飼料數(shù)值差異不顯著，原因有待進(jìn)一步研究；但在堿性磷酸酶、總超氧化物歧酶方面，投喂冰鮮魚(yú)和投喂自制軟顆粒飼料都顯著高于投喂膨化顆粒飼料，這說(shuō)明冰鮮魚(yú)、自制軟顆粒飼料更符合大口黑鱸的攝食習(xí)性及生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)要求，提高了大口黑鱸對(duì)疾病的抵抗力。

3.2 結(jié)論

綜上所述，膨化顆粒飼料、軟顆粒飼料與冰鮮魚(yú)3種不同形態(tài)的飼料對(duì)大口黑鱸生長(zhǎng)和免疫力影響的研究表明，大口黑鱸投喂冰鮮魚(yú)生長(zhǎng)速度最快，其次是投喂自制軟顆粒飼料，最后是投喂膨化顆粒飼料；投喂冰鮮魚(yú)和自制軟顆粒飼料系數(shù)最低；投喂自制軟顆粒飼料蛋白質(zhì)效率最高；與膨化顆粒飼料相比，冰鮮魚(yú)、軟顆粒飼料具有改善大口黑鱸非特異性免疫功能的作用。數(shù)據(jù)顯示，免疫力與生長(zhǎng)性能存在一定的正相關(guān)，非特異性免疫力高，生長(zhǎng)性能也更好。綜合分析生長(zhǎng)和免疫力指標(biāo)，研究認(rèn)為使用自制軟顆粒飼料養(yǎng)殖大口黑鱸，可以實(shí)現(xiàn)與冰鮮魚(yú)養(yǎng)殖較為一致的效果，本試驗(yàn)中的軟顆粒飼料是值得推廣的一種優(yōu)質(zhì)高效配合飼料?？筛鶕?jù)大口黑鱸營(yíng)養(yǎng)需求，優(yōu)化飼料配方，生產(chǎn)出優(yōu)質(zhì)可靠的配合飼料，逐步替代冰鮮魚(yú)的使用，滿足大口黑鱸大規(guī)模人工養(yǎng)殖的需求。