李會(huì)方,何澤慶,王永權(quán),高洋
(吉林農(nóng)業(yè)科技學(xué)院,吉林吉林132101)
秦艽為龍膽科龍膽屬秦艽組植物的干燥根,始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》,又名大葉龍膽、大葉秦艽等[1]。古人稱(chēng)之為“風(fēng)藥中之潤(rùn)劑,散藥中之補(bǔ)劑”,治療風(fēng)濕痹證,無(wú)論偏寒偏熱、新病久病均可使用,故有風(fēng)寒濕痹要藥之稱(chēng)[2]。近年來(lái),有關(guān)秦艽的研究主要集中在藥用成分的分離鑒定和藥理學(xué)方面,旨在評(píng)價(jià)藥用價(jià)值和開(kāi)發(fā)新藥[3]。陳雷等[4]研究發(fā)現(xiàn):秦艽中的主要成分龍膽苦苷對(duì)熱和化學(xué)刺激引起的疼痛反應(yīng)有明顯的鎮(zhèn)痛作用,對(duì)急、慢性炎癥反應(yīng)均有一定的抑制作用。根據(jù)李慶[5]實(shí)驗(yàn)研究表明,秦艽醇提液對(duì)二甲苯致小鼠耳脹,蛋清致小鼠足跖骨腫脹炎作用,及醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增加有明顯的對(duì)抗作用,說(shuō)明秦艽醇提液對(duì)機(jī)體炎癥有顯著的抑制作用。
中藥軟膏劑是中藥傳統(tǒng)劑型之一,歷來(lái)受到人們的重視。隨著醫(yī)用高分子化合物材料的不斷開(kāi)拓,透皮治療系統(tǒng)研究的不斷發(fā)展,外貼性藥也更加受到醫(yī)藥界的矚目[6]。而軟膏具有親水性,能吸附傷口的分泌物,有良好的釋藥性能;不妨礙皮膚的正常功能,易清洗、不污染衣物等。O/W型軟膏易于清洗,涂抹在皮膚上,幾乎不留痕跡,很受人們的青睞,本文主要研究O/W型秦艽消炎止痛膏的消炎止痛作用。
本實(shí)驗(yàn)以秦艽為主藥,采用水煎煮、濃縮等方法將其制成軟膏劑并對(duì)小鼠進(jìn)行抗炎鎮(zhèn)痛實(shí)驗(yàn),以研究其抗炎鎮(zhèn)痛作用。
秦艽提?。簩⑶剀?500g,粉碎成粗粉,第1次加水2000mL,煎煮1h,過(guò)濾,得濾液備用。第2次加水2000mL,煎煮1h,過(guò)濾,得濾液。合并2次濾液,濃縮至100mL,備用。(經(jīng)過(guò)單因素以、正交試驗(yàn)以及相關(guān)文獻(xiàn)得出)油相部分:液體石蠟 3g,凡士林 1g,羊毛脂 1g,硬脂酸 2g,單硬脂酸甘油脂 2g置玻璃燒杯中,水浴加熱熔化并保溫在80℃左右。水相部分:先取甘油2g與尼泊金乙酯0.3g研勻,加入秦艽提取液中待溶脹完全,在水浴上加熱至80℃。在保溫情況下逐漸將水相慢慢的加入油相中,并不斷地急速朝一個(gè)方向攪拌至凝固,待溫度降至40℃時(shí)加入月桂氮卓酮2g攪拌均勻即得。
1.2.1 外觀性狀 本品色澤均勻一致、質(zhì)地細(xì)膩,且在常溫時(shí)保持形狀,不干涸或者液化。
1.2.2 刺激性將本品涂抹于皮膚時(shí)無(wú)疼痛、紅腫或產(chǎn)生斑疹等不良反應(yīng)。將供試品涂在已剃毛的小鼠背部皮膚上至少4h,在去除藥物后30~60min、24h、48h和72h肉眼觀察涂抹部位無(wú)紅斑、水腫等情況。
1.2.3 穩(wěn)定性對(duì)本品進(jìn)行耐熱、耐寒實(shí)驗(yàn)。將供試品分別置于55℃恒溫6h及-15℃24h,無(wú)油水分離。
1.2.4 酸堿度本品的酸堿度以中性為宜。取樣品加適當(dāng)溶劑(水或乙醇)振搖后,測(cè)定所得溶液的 pH 值為 5.5~6.5。
昆明種小鼠(由吉林生物制品廠(chǎng)提供),清潔級(jí),30只,體重(20±2)g,雌雄各半。
秦艽軟膏,羅紅霉素軟膏,扶他林軟膏。
試驗(yàn)小鼠進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后,飼養(yǎng)3天以適應(yīng)環(huán)境。將小鼠隨機(jī)分成6組,每組5只,抗炎試驗(yàn):A組:空白對(duì)照組(生理鹽水);B組:陽(yáng)性對(duì)照組(羅紅霉素軟膏);C組:秦艽軟膏組。鎮(zhèn)痛試驗(yàn):A組:空白對(duì)照組(生理鹽水);B組:陽(yáng)性對(duì)照組(扶他林軟膏);C組:秦艽軟膏組。
打孔器、分析天平等。
在小鼠右耳正反兩面分別用棉簽涂抹20μl二甲苯使其致炎,左耳不做處理作為自身空白對(duì)照。致炎30 min后,分別用三組試品涂抹炎處,每日涂抹3次,5天后采用頸椎脫臼法處死小白鼠,剪下雙耳,用內(nèi)徑為6mm的打孔器打下左右耳相應(yīng)部位的圓片,迅速用分析天平稱(chēng)重,計(jì)算出耳廓腫脹率及耳廓腫脹度。
表1秦艽軟膏劑對(duì)小鼠消炎試驗(yàn)
小鼠分組后于末次給藥后1h,腹腔注射0.6%冰醋酸0.2ml/只,記錄每只小鼠15min內(nèi)因疼痛發(fā)生扭體的次數(shù)并計(jì)算扭體反應(yīng)抑制率。
表2秦艽軟膏劑對(duì)小鼠止痛試驗(yàn)
扭體反應(yīng)抑制率(%)=(給藥組扭體數(shù)-對(duì)照組扭體數(shù))/對(duì)照組扭體數(shù)×100%
消炎試驗(yàn)結(jié)果表明:由表1數(shù)據(jù)可得出:用二甲苯對(duì)小鼠進(jìn)行炎癥模型復(fù)制,秦艽軟膏組與空白對(duì)照組比較,耳廓腫脹率明顯降低,證明秦艽軟膏具對(duì)小鼠具有抗炎作用,秦艽軟膏組與陽(yáng)性對(duì)照組比較,秦艽軟膏與羅紅霉素軟膏對(duì)小鼠耳廓腫脹率相近。
止痛實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:由表2數(shù)據(jù)可以得出用冰醋酸對(duì)小鼠進(jìn)行疼痛模型復(fù)制,秦艽軟膏組與空白對(duì)照組比較,扭體次數(shù)明顯降低,證明秦艽軟膏具對(duì)小鼠具有鎮(zhèn)痛作用,秦艽軟膏組與陽(yáng)性對(duì)照組比較,秦艽軟膏與扶他林軟膏對(duì)小鼠扭體反應(yīng)抑制率相近。
秦艽軟膏屬于軟膏劑卻區(qū)別于現(xiàn)有軟膏劑,這也填補(bǔ)了膏劑領(lǐng)域的一大空缺,更為人們的生活帶來(lái)便捷。本實(shí)驗(yàn)證明秦艽軟膏可明顯減少冰醋酸引起的小鼠疼痛模型的扭體次數(shù),對(duì)二甲苯引起小鼠耳廓腫脹有明顯的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:秦艽軟膏具有消炎、止痛的藥效學(xué)作用,本研究為秦艽臨床上治療風(fēng)濕痹證所致的發(fā)炎、關(guān)節(jié)紅腫提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。